兰索拉唑β-环糊精包合物的制备工艺研究

[摘要] 目的：制备兰索拉唑β-环糊精包合物。方法：用正交设计法研究物料比、温度、时间3个因素对兰索拉唑β-环糊精包合物制备工艺的影响。结果：包合温度对包封率有非常显著的影响，最佳工艺条件为兰索拉唑与β-环糊精的摩尔比为1∶3，包合温度为30℃，超声时间为35 min。结论：此方法可用于兰索拉唑β-环糊精包合物的制备。

[关键词] 兰索拉唑；β-环糊精；包合物

[中图分类号]R944 [文献标识码] A[文章编号] 1673-7210（2009）06（b）-045-03

Study on preparation procedure of β-cyclodextrin inclusion compound for lansoprazole

LING Chunsheng, BAI Ying, MIN Wei

(Department of Pharmaceutics, Henan University, Kaifeng 475004, China)

[Abstract] Objective: To prepare lansoprazole β-cyclodextrin inclusion compound. Methods: The orthogonal design was used to study the materials ratio, temperature, time of three factors on β-cyclodextrin inclusion compound lansoprazole preparation impact. Results: It was found that the temperature showed the most significant influence on inclusion rate, the optimum preparation conditions for inclusion compound were established as the molecular rate of lansoprazole to β-CD in the inclusion compound was 1∶3, inclusion temperature was 30℃ and reaction time was 35 min. Conclusion: The method can be used for preparation of lansoprazole β-cyclodextrin inclusion compound.

[Key words] Lansoprazole; β-Cyclodextrin; Inclusion compound

兰索拉唑（lansoprazole）是继奥美拉唑后成功开发上市的第二个新型质子泵抑制剂（PPIs）。它是高效治疗溃疡性疾病的药物，通过抑制胃壁细胞中H+/K+-ATP酶来抑制消化道的酸分泌。它是通过在胃壁细胞的细管酸性环境中转变成有活性的亚磺酰胺衍生物，该活性物连接到H+/K+-腺苷三磷酸（ATP）酶的巯基上（H+/K+-ATP酶催化胃酸分泌过程的最后一步），因而钝化了H+/K+-ATP酶，抑制了中枢及外周两者调节的胃酸分泌[1]，对于胃溃疡和十二指肠溃疡、反流性食道炎及卓-艾综合征等有很高的治愈率[2]。目前应用非常广泛，已上市的剂型包括胶囊剂、口服混悬液、片剂、分散片和注射剂。由于兰索拉唑对光、热较敏感，易吸潮，暴露于光及空气中易变质，给贮存及剂型的制备带来了麻烦，为了解决这些技术难题，本实验拟采用β-环糊精（β-CD）包合技术以提高其稳定性，解决制剂生产过程中的困难。

1 仪器与试药

1.1 仪器

UV-265 紫外分光光度计（日本岛津）；KQ5200DB 型数控超声波清洗机（昆山市超声仪器有限公司）；KWS-FIE2-B 型真空干燥箱（郑州市上街华科仪器厂）；AG135 型电子天平（Mettler Toledo, Switzerland）；紫外透射反射分析仪（上海康华生化仪器制造厂）。

1.2 试药

兰索拉唑对照品（中国药品生物制品检定所，批号为050212），兰索拉唑（河南帅克制药有限公司，批号为050401），β-环糊精（孟州市华兴生物化工有限责任公司，批号为050602），甲醇为分析纯，水为重蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 含量测定方法学观察

2.1.1 测定波长的选择精密称取兰索拉唑对照品和β-CD 适量，分别用甲醇稀释成浓度为12 μg/ml和200 μg/ml的溶液，以甲醇溶液为空白，用紫外分光光度计在200～400 nm 波长进行扫描， 测得兰索拉唑的最大紫外吸收波长为284 nm，而β-CD 溶液在相应波长处无吸收，故选择284 nm作为兰索拉唑的紫外测定波长。

2.1.2 线性关系的考察精密称取兰索拉唑对照品100 mg，置100 ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，制备对照品贮备液。分别精密吸取上述溶液0.5、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6 ml置100 ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，得系列浓度的对照品溶液，以甲醇为空白，在284 nm波长处测定A值，见表1。以吸收度A对浓度C回归，得标准曲线方程为A=0.019 66+ 0.042 92C（r=0.999 7）。结果表明，兰索拉唑浓度在5～16 μg/ml 范围内线性相关良好。

表 1 兰索拉唑线性关系（n=6）

2.1.3 稳定性考察取上述浓度为14 μg/ml的对照品溶液在284 nm 波长处，分别于0、0.5、2.0、4.0、8.0、12.0、24.0 h 测定，见表2。得RSD为0.46%，表明该溶液在24 h内稳定。

表 2 兰索拉唑稳定性考察结果（n=7）

2.1.4 精密度实验精密量取上述浓度为14 μg/ml的对照品溶液，以甲醇溶液为对照，在284 nm处测其吸光度，连续测量5次，见表3。RSD为0.22%，表明仪器精密度良好。

表 3 兰索拉唑精密度考察结果（n=5）

2.1.5 回收率实验 取上贮备液2.5、5.0、10.0 ml，置50 ml容量瓶中，按处方量加入β-CD，再用甲醇稀释至刻度，得低、中、高3种样品，按照“2.1.2线性关系的考察”项下同法测定，计算回收率、平均回收率，结果见表4。

表 4 兰索拉唑回收率考察

2.1.6 含量测定精密称定兰索拉唑β-CD 包合物6.0 mg，置25 ml容量瓶中，用甲醇适量稀释至刻度，摇匀，吸取0.5 ml 置10 ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，以甲醇为空白，在284 nm波长处测其吸光度A，代入标准曲线方程中计算兰索拉唑含量。

2.2 兰索拉唑β-CD包合物制备方法的考察

2.2.1 兰索拉唑β-CD 包合物的制备称取适量β-CD，加水溶解后放入超声波清洗仪中，制成一定温度下的饱和溶液；另称取兰索拉唑适量，用少量甲醇溶解后，在避光条件下缓缓滴入β-CD 饱和溶液中，恒温超声适当的时间，冷藏24 h，抽滤，用适量甲醇洗涤，去掉未包入并附着在包合物表面的兰索拉唑，沉淀低温真空干燥，得白色粉末状包合物。

2.2.2 兰索拉唑β-CD 包合物最佳制备工艺的选择根据预实验结果，选择兰索拉唑与β-CD 的摩尔比、包合温度、包合时间3项考察因素，各取3个水平进行L9(34)正交实验，因素水平见表5，并以兰索拉唑包合物的包封率、收率为考察指标，筛选出最佳工艺条件。结果见表6。对本实验正交设计的评价指标如包封率、收率采用的是综合平衡法，即先对各评价指标分别按单一指标进行直观分析，然后对指标的分析结果进行综合比较，得出最佳实验方案。

表 5 正交设计L9(34)因素水平表

表 6 L9(34)正交表及实验结果

2.2.2.1 结果分析对包封率这个指标的影响因素主次为B＞C＞A；对收率的影响因素主次为B＞A＞C。方差分析结果表明，以包封率为评价指标，包合温度对结果有非常显著性影响，最佳工艺条件为A3B1C3；以收得率为评价指标，投料比、包合温度、包合时间对结果均无显著性影响，最佳工艺条件为A3B1C1。由于包封率比收得率更为重要，笔者以包封率为主要指标，收得率为参考指标，确定最佳包合工艺条件为A3B1C3。即兰索拉唑与β-CD的投料比为 1∶3，包合温度为30℃，超声时间为35 min。

2.2.2.2 样品测定用最佳处方及工艺制备3批样品（批号为060503、060504、060505），按照“2.1.6含量测定”项下同法对3批样品进行测定，计算包封率、收率，结果见表 7。结果表明，用本研究所得最佳处方及工艺制备的包合物包封率和收率均较高，且稳定，结果是可信、可靠的。

2.2.3 兰索拉唑β-CD 包合物薄层层析鉴别硅胶G板的制作：将硅胶和0.5%CMC水溶液按1 g∶3 ml 的比例，调匀，铺板，110℃ 活化30 min 备用。①取兰索拉唑，加DMSO 溶解，为样品a。②取β-CD，加DMSO溶解，为样品b。③取兰索拉唑β-CD 包合物，加水溶解，为样品c。④取兰索拉唑β-CD包合物，加脱包剂DMSO进行脱包，得脱包液为样品d。取样品a、b、c点于同一硅胶板上，见图1；另取样品a、b、d 点于另一硅胶板上，见图2。以乙酸乙酯∶正己烷∶甲醇（30∶25∶5）为展开剂，在紫外透射反射分析仪下观察，结果见图 1。

B

图 1 兰索拉唑β-CD 包合物TLC层析图

TLC 层析图显示兰索拉唑、兰索拉唑β-CD包合物水溶液、兰索拉唑β-CD包合物DMSO溶液的层析结果，兰索拉唑与兰索拉唑β-CD包合物DMSO溶液显示相同斑点，而兰索拉唑β-CD包合物水溶液不显示斑点，说明兰索拉唑β-CD包合物已经形成。

3 讨论

由于兰索拉唑对光、热不稳定，包合温度及超声时间对包合物的制备影响很大。包和温度过低会影响包封率，过高则在制备过程中会变黄、变质，影响其稳定性；超声时间过长则会使已包合的药物又重新析出来影响包封率，过短也会使包封率降低。

[参考文献]

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（收稿日期：2009-01-09）