骨髓涂片常规检验质量控制

文章编号：1009-5519（2007）10-1533-02 中图分类号：R446 文献标识码：B

骨髓涂片常规检验质量是骨髓细胞学检验的基本方法，是血液病诊断、鉴别诊断、疗效观察、判断预后的主要检测手段。在骨髓涂片常规检查过程中，骨髓取材、涂片、染色的质量可直接影响细胞观察和分析。骨髓取材不良，再好的检验技术也难以得到正确的诊断；骨髓涂片欠佳，则影响骨髓细胞形态的观察；骨髓涂片染色失真，则造成骨髓细胞的误判和误诊。作好骨髓涂片常规检验的质量控制，是骨髓细胞学检查的关键，因此，我们建立了骨髓取材、涂片、染色质量控制标准，供参考。

1 骨髓取材

1.1 质量标准：（1）骨髓抽吸的瞬间，患者有特异的疼痛或酸胀感。（2）抽取的骨髓中含有骨髓小粒或脂肪组织。（3）抽取的骨髓液无外周血液稀释。

1.2 注意事项：（1）骨髓穿刺的禁忌证：血友病和有严重出血倾向的患者禁忌穿刺。（2）骨髓穿刺中的并发症：常见的并发症有低血压、心律不齐、心跳停止、呼吸停止、精神紧张、哮喘发作、出血等。（3）骨髓干抽：骨髓穿刺后抽不出骨髓。其原因：①技术方面的因素有穿刺深度不够、穿刺部位选择不当、针头内有组织堵塞；②器材方面的因素有针座与针管接触不好，空针内负压降低或无负压；③病理方面的因素有骨髓纤维化、毛细胞白血病、再生障碍性贫血等。（4）骨髓液稀释：骨髓液抽取过多，造成血液混入使骨髓稀释。

2 骨髓液涂片

2.1 质量标准：（1）骨髓膜厚薄均匀，有清楚的头、体、尾三部分。玻片上下留有一定距离，边缘整齐。（2）骨髓膜上无来回的横纹线条。（3）骨髓膜末端光滑，无参差不齐或线条样的现象。（4）骨髓膜长度、厚度适中。（5）骨髓膜上无花斑现象。（6）红细胞分开排列，既无相互重叠，又不过于分散。

2.2 注意事项：（1）载玻片需先用95%酒精浸泡后，去掉载玻片上的油脂和污垢，再用纱布擦干净备用，以免出现花斑现象。（2）拿取玻片时应手捏两端，不可触及玻面，以保持玻面清洁。（3）做推片的玻片，边缘必须光滑，以免造成骨髓膜出现毛刺状。（4）推片时动作要迅速及时，避免骨髓液凝固或变干。（5）涂片厚薄要灵活掌握，根据可疑疾病的不同选择厚薄，如白血病骨髓增生极度活跃，细胞数量增多，涂片要薄些，再生障碍性贫血骨髓增生极度减低，细胞数量明显减少，涂片要厚些。（6）推片时骨髓液量愈大、角度愈大、推片速度愈快，则骨髓膜愈厚，反之，骨髓膜愈薄。（7）涂片干燥后，最好立即固定染色，久放后染色效果不佳。

3 骨髓涂片染色

3.1 质量标准：（1）整个骨髓涂片着色均匀。（2）细胞着色鲜艳、匀称、结构清晰，便于辨认。（3）视野清晰、显色清楚、无沉渣颗粒。（4）酸碱适中，细胞无偏红偏蓝现象。（5）细胞核内部结构清晰，点状、网状等细微结构易分辨。（6）细胞浆颜色及透明度能反应各类各期细胞的相应特性，颗粒清楚。（7）细胞浆与细胞核着色的对比度较好。

3.2 注意事项：（1）常规染色固定时间不宜过长或过短，因为染液中的甲醇有溶剂和固定两种作用，固定时间过长，甲醇易挥发，涂片即有不易除去的沉渣；固定时间过短，固定不牢，加缓冲液后细胞溶解，骨髓膜被冲掉。（2）染液与缓冲液比例适当，一般为1∶2.7，细胞较多,骨髓膜较厚的涂片染料应多些；细胞较少，骨髓膜较薄的涂片缓冲液应多些。缓冲液稀释度愈大，染色时间愈长，细胞着色较好。（3）染色时间应由骨髓膜的厚薄、有核细胞的多少而定。贫血患者的骨髓涂片易着色，染色时间应短些，骨髓增生活跃的白血病患者细胞着色慢，染色时间应长些。（4）涂片可用自来水冲洗，平持玻片，滴加自来水，并轻轻晃动，待沉渣浮起后缓慢冲洗，切勿先倾去染液再用水冲洗，以免造成染料沉渣沉积在骨髓膜上。（5）染色偏酸时，红细胞和嗜酸性颗粒偏红，白细胞核呈极浅蓝色或不着色。（6）染色偏碱时，所有红、白细胞偏灰蓝色，颗粒深暗，嗜酸性颗粒可染成暗褐色甚至紫色或纯蓝色。

在骨髓细胞学检测过程中，保证检验质量是一个从临床到实验室的全面质量控制过程，每一个环节、每一项技术规程必须遵照要求严格操作，任何疏忽均可影响临床诊断，造成患者的痛苦或终身遗憾。因此，做好骨髓检验质量控制是骨髓细胞学诊断的保障。

收稿日期：2007-01-29

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