草莓的组织培养研究进展

摘要：在草莓的组织培养过程中，不同的外植体、消毒方法、不同种类不同浓度的植物生长调节物质对草莓的组织培养影响很大。本文从草莓的外植体消毒、愈伤组织诱导、增殖、再分化及生根等方面进行了综述。

关键词：草莓；组织培养；再分化

中图分类号： S668.4 文献标识码： A 文章编号： 1674-0432（2013）-08-14-2

草莓是蔷薇科草莓属多年生草本植物，原产地南美。草莓果肉含有大量蛋白质、糖类及果胶等营养物质，其维生素C含量高于苹果、葡萄等水果，口味酸甜，味道鲜美，是深受人们喜爱的绿色保健食品[1]。我国从20世纪80年代开始致力于草莓引种及种植，草莓的传统繁殖方法主要有分株繁殖和匍匐茎繁殖，但这种方法致使草莓苗容易感染病毒，导致品质劣化、产量降低等退化现象。为解决这一问题，研究者采取组织培养培养技术对草莓进行组织培养快繁，以期优化草莓质量[2]。目前，关于草莓的组织培养较多，本文从草莓的外植体消毒、愈伤组织诱导、增殖、再分化及生根等方面进行综述，以期为草莓优良品种选育奠定理论基础。

1 外植体选择

草莓的组织培养常用的外植体主要有花药、茎、及叶等，其中花药最为常见。如张慧琴等[3]以花药为外植体进行了辐照，对草莓花药愈伤组织诱导和分化的影响的研究。晁慧娟[2]等选用花药作外植体进行了草莓脱毒培养的试验，张敏等[4]选用花药为外植体对“法兰地”草莓作了花药的组织培养研究。

1.1草莓的外植体消毒

草莓外植体的消毒试剂常见的有酒精、升汞，酒精常与升汞联合使用，消毒前先用大量清水冲洗外植体，然后用70%～75%酒精浸泡外植体30s以内[5]，再以0.1%升汞处理8～15min，最后用无菌水冲洗干净。此外，次氯酸钠也可用作外植体消毒剂[6]，一般是酒精处理后再用10%的次氯酸钠浸泡外植体10min，最后用升汞和无菌水处理。

2 草莓诱导、增殖、生根培养基的选择

2.1 培养基的选择

培养基主要有MS、LS、N6和B5等，其中MS培养基最为常见，MS培养基在植物的组织培养试验中有良好的效果，多数植物的组织培养均选用MS培养基，目前，所有草莓的组织培养所选培养基都为MS培养基。

2.2 植物激素的筛选

植物组织培养常用激素包括6-BA、NAA、IAA、2，4-D、KT、TDZ、IBA等。一般情况下，6-BA的浓度范围在0.5～3.0mg/L之间[7，8]，NAA浓度范围在0.01～6.5mg/L之间，IAA的浓度范围在0.05～4.0mg/L之间[9]，2，4-D的浓度范围在0.2～2.0mg/L之间，KT的浓度范围在0.3～1.0mg/L之间，TDZ的浓度范围在1.0～3.0mg/L之间，IBA的浓度范围在0.05～0.3mg/L之间[10]。

2.2.1 外植体诱导的激素浓度筛选

最适植物生长调节剂的浓度比依据外植体的不同而不同。晁慧娟[2]的“甜查理”草莓花药培养脱毒技术得出，最适合诱导花药愈伤组织形成的植物生长调节剂浓度比是MS基本培养基附加激素6-BA1.0 mg/L、2，4-D2.0 mg/L。6-BA、KT等是诱导细胞分裂形成愈伤组织的常用激素[11-14]。若选用匍匐茎尖儿生长点儿做外植体，最适植物生长调节剂浓度比为MS基本培养基附加激素BA1.0mg/L和NAA0.05mg/L。草莓叶片也常被作为外植体用来分化愈伤组织。魏源文等[15]在实验中发现，MS基本培养基附加激素2.0 mg/L TDZ和0.25 mg/L IAA最适草莓叶片的分化。以花药为外植体为研究者进行草莓的组织培养所使用最多的方法，故也是草莓组织培养的最佳理想材料。

2.2.2 草莓增殖的激素浓度筛选

增殖培养基的作用是将由外植体诱导出来的愈伤组织或芽进行扩增，选用MS基本培养基附加激素6-BA1.0mg/L和IBA0.05mg/L作为芽增殖的培养基。吴正凯[16]等选用MS基本培养基附加激素6-BA0.50mg/L和NAA0.01mg/L，作为继代增殖培养基。

2.2.3 草莓再分化的激素浓度筛选

再分化培养基是将诱导出来的愈伤组织再分化成苗的培养基，基于愈伤组织细胞的性质，该植物生长调节剂浓度比对诱导愈伤外植体不区别，即由茎、叶、花药诱导出来的愈伤组织均可选用同一最佳再分化培养基。赵海红[17]从9种培养基中进行筛选，最后发现适合茎尖儿生长的最优激素浓度比为MS基本培养基附加6-BA0.5 mg/L、IAA1.0 mg/L、蔗糖30 g/L和琼脂8 g/L。

2.2.4 草莓生根的激素浓度筛选