淋病奈瑟球菌的耐药性分析

【摘要】目的：对228例淋病患者淋病奈瑟球菌的耐药性进行探讨分析。方法：对淋病奈瑟球菌采用纸片扩散法（K-B法）进行检测，对β内酰胺酶采用头孢硝噻吩纸片法进行检测。结果：228株淋病奈瑟球菌中，来自宁海县中医医院的有72株，其中β内酰胺酶检测阳性的有19株；来自湖州市妇幼保健院的有156株，其中β内酰胺酶检测阳性的有41株。所有检测为阳性的菌株在228株菌株中占2632%。来自所有的淋病奈瑟球菌菌株对5种抗菌药物的耐药性有明显的区别，菌株对四环素、青霉素和环丙沙星的耐药性比较高，对头孢曲松、大观霉素的耐药性比较低一些。结论： 根据研究数据，在临床上应当避免使用四环素、青霉素等作为抗菌的首选药物，应适当选取头孢曲松、大观霉素作为临床治疗淋病奈瑟球菌感染的首选药物。

【关键词】淋病；淋病奈瑟球菌；感染；耐药性分析

【Abstract】Objectives： To analyze the Neisseria gonorrhoeae resistance of gonorrhea among 228 patients. Methods： Disk diffusion method （KB method） was used to detect Neisseria gonorrhoeae. The nitrocefin paper method was used to detect β-lactamase. Results： Among the 228 Neisseria gonorrhoeae， there were 72 from Ninghai County Chinese Medicine Hospital， among which 19 positive β-lactamase were tested； 156 Neisseria gonorrhoeae were from Huzhou City， MCH， among which 41 positive β-lactamase were tested. Positive detection rate in 228 strains accounted for 26.32%. The resistance of all strains for Neisseria gonorrhoeae to five kinds of antibacterial drugs had significant difference. Resistance to tetracycline， penicillin and ciprofloxacin resistance was relatively high and resistance to ceftriaxone， spectinomycin was relatively low. Conclusion： According to research data， tetracycline， penicillin and other drugs should be avoided as the preferred antibacterial drugs in clinic， while ceftriaxone and spectinomycin should be properly selected as the first drug choice for the treatment of Neisseria gonorrhoeae infection in clinic.

【Key words】Gonorrhea； Neisseria gonorrhoeae； Infection； Resistance analysis

【中图分类号】R759.2【文献标志码】A

淋病是一种常见的性传播疾病，它是由淋病奈瑟球菌感染引起的一种炎性反应，分为急性与慢性，病发于生殖器官[1-3]。近年来，其发病率有所升高，淋病可能会入侵多个器官，引起其病变，淋病还可能促进HIV的传播，严重影响患者的生活。所以，淋病的预防和治疗是现在医疗上的一个重要的难题。在临床上，淋病主要靠抗菌药物进行治疗，但是由于这些抗菌药物的长期使用，导致淋病奈瑟球菌的耐药性逐步上升，因此，寻找对淋病奈瑟球菌治疗更加有效的抗菌药物刻不容缓。本文通过对淋病奈瑟球菌进行5种抗菌药物的耐药分析，探究分析更加有效的药物，现报道如下。

1资料与方法

11菌株来源以及收集

采取随机原则选取自2010年1月至2014年1月在宁海县中医医院治疗的淋病奈瑟球菌感染的患者72例，以及在湖州市妇幼保健院治疗的淋病奈瑟球菌感染的患者156例，共228例。所有患者在3周以内未使用抗生素进行治疗，其中男性患者134例，年龄在17～65岁，平均年龄384岁，女性患者94例，年龄在16～66岁，平均年龄376岁。所有的患者在疾病史等方面没有明显差异。对于菌株的收集，男性患者采用没有细菌的棉拭子（含生理盐水）插到尿道口3～4cm处进行采样，女性采用没有细菌的棉拭子（含生理盐水）在位于子宫颈内2cm处进行采取分泌物。将采取的样本在37℃、5%CO2的培养箱中置于选择性的培养基上进行培养24～48h，对菌株的形态进行观察，将疑似淋病奈瑟球菌的菌株进行分离出来，再经过革兰染色、氧化酶及糖发酵等检测之后确定为淋病奈瑟球菌，最后并对所有淋病奈瑟球菌菌株进行药物敏感分析。

12采用的药敏纸片

实验所用的四环素、青霉素、头孢曲松、大观霉素和环丙沙星药敏纸片均为Oxoid公司产品。

1.3方法

1.31药物敏感检测对淋病奈瑟球菌菌株采用纸片扩散法（K-B法）进行检测。用添加了1%特定的生长添加剂的GC琼脂基础作为培养基，测定出每种药物对菌株的抑菌圈直径，根据CLSI M100-S22标准，从而对菌株的药物耐药性进行判定。

1.3.2β内酰胺酶检测对所有的淋病奈瑟球菌菌株进行β内酰胺酶检测，采用头孢硝噻吩纸片法，就是测试时用一滴无菌水将Cefinase纸片湿润，将受试菌直接涂于经湿润后的Cefinase纸片，观察颜色反应，纸片由黄色变为红色为阳性，表示产生β内酰胺酶。

2统计学方法

对此次收集的数据资料结果运用SPSS 150统计学软件包进行统计学分析，主要采用t检验进行检验，计数资料采用χ2检验来进行检验，以P值

3结果

在检测之后，所有的淋病奈瑟球菌菌株对5种抗菌药物的耐药性有明显的差别，菌株对四环素、青霉素和环丙沙星的耐药性比较高，还有菌株对头孢曲松和大观霉素比较敏感，耐药性比较低，具体情况见表1。

在228株淋病奈瑟球菌菌株中，在宁海县中医医院的72例中，β内酰胺酶检测显示阳性的有19株；在湖州市妇幼保健院的156例中，β内酰胺酶检测显示阳性的有41株。这些检测为阳性的菌株在所有菌株占有2632%。

4讨论

据报道，淋病是一种古老而常见的疾病，其在世界上依然是发病率很高的性传播的疾病之一[4-6]，在我国性传播疾病中发病率也是居于第二位。淋病是指患者感染上淋病奈瑟球菌之后引发的一种炎性反应，还会引起多个部位的炎症，会有急性和慢性之分，感染主要是泌尿生殖系统化脓性的感染，发生在泌尿生殖器官上。淋球菌是革兰阴性双球菌，如果离开人体，就无法生存，多发于性活跃的青年男女[7-9]。淋病的主要症状有尿频尿急、尿痛、尿道口流脓或者是宫颈口阴道口有脓性的分泌物等，或有淋菌性结膜炎、直肠炎、咽炎等表现，或有播散性淋病症状。淋病还会引发多种并发症，甚至还可能促进HIV的传播，对患者的日常生活造成影响。

淋病的病原体是奈瑟球菌，在1879年首次被发现，其呈肾形，两个凹面相对，大小一致，它是一种嗜二氧化碳的需氧菌，革兰染色呈现阴性，经常存在多核白细胞中，对外界的抵抗力比较差。其细菌侵入细胞先借助于外膜上的菌毛和蛋白粘附在或者阴道的黏膜上皮细胞，然后侵入其中进行增殖，从而引起黏膜上皮的皮下感染，之后再侵入血液，在各个组织中引起淋球菌的感染。淋病的分类主要有男性淋病、女性淋病、附性腺炎、妇女阴道炎以及新生儿眼炎等，其传染方式主要分为性接触和非性接触两种[10-12]。对淋病的诊断主要根据患者自身病史以及实验室采取样本进行综合分析进行确定诊断。

在医学临床上，治疗淋病主要采用抗生素，起初效果比较明显，但是随着抗生素的使用越来越多，淋病奈瑟球菌对抗生素的耐药性也越来越强，所以找出一种对治疗淋病的更加有效的抗菌药物，也是现代医疗的急切需求。在20世纪40年代中期，青霉素的运用比较广泛，在医学上作为治疗淋病的首选药物[13-15]，之后随着青霉素的使用越来越多，淋病奈瑟球菌对青霉素的耐药性也变得越来越强，本研究也表明淋病奈瑟球菌菌株对青霉素的耐药性强的比重占499%，中间值占482%，说明青霉素已经不能作为治疗淋病的首选药物。据研究表明，引发淋病奈瑟球菌对青霉素的重要耐药机制是菌株内产生β内酰胺酶，本次研究表明，在宁海县中医医院的72例中，β内酰胺酶检测显示阳性的有19株；在湖州市妇幼保健院的156例中，β内酰胺酶检测显示阳性的有41株。这些检测为阳性的菌株在总的228例菌株占有2632%。淋病奈瑟球菌菌株内产生的β内酰胺酶会有质粒介导，这样会导致全部的菌株内产生更多的产酶或者耐药的菌株，就会使淋病的程度更加严重。淋病奈瑟菌对青霉素耐药的另外一种机制是由于染色体介导的PBP的改变，而染色体介导的耐药淋病奈瑟菌（CMRNG）不能通过β内酰胺酶试验检测到。通过研究可以看出，228株淋病奈瑟球菌菌株中对四环素、青霉素和环丙沙星的耐药性比较强，但是对头孢曲松和大观霉素比较敏感，耐药性比较低。大多数的淋病奈瑟球菌对四环素和环丙沙星的耐药性的比重大分别占563%和499%，其耐药机制值得进一步研究。

近些年来，在对淋病的治疗中，青霉素、四环素和环丙沙星的使用和不规范治疗越来越多，这样淋病奈瑟球菌对这些抗生素的耐药性越来越强，所以已经不能选作治疗淋病的首选药物，但是研究中表明淋病奈瑟球菌对头孢曲松的耐药性的比重为34%，大观霉素的耐药性的比重为00%，可以有效地抑制淋病奈瑟球菌。对淋病的治疗要通过这些抗生素的合理选用和规范治疗，对淋病奈瑟球菌的耐药性机制进行加强， 这样才能有效地抑制淋病奈瑟球菌的耐药性，有效地治疗淋病。因此我们在临床上应当注意对抗菌药物的应用指征进行严格的掌握，对患者进行合适对症的治疗，避免淋病奈瑟球菌菌株的耐药性的出现。

综上所述，在临床上已经不能再使用四环素、青霉素和环丙沙星作为治疗淋病的首选药物，但是可以选择头孢曲松和大观霉素这两种药物作为首选，对淋病进行治疗。

参考文献

[1]崔海燕，李国明. 淋病奈瑟球菌毒力岛基因与耐药性的相关性分析. 中华医院感染学杂志，2010，4（9）：1221-1224.

[2]顾华爱. 淋病患者156例淋病奈瑟球菌耐药性分析. 中国乡村医药，2010，5（7）：54.

[3]肖永红，王进，朱燕，等. Mohnarin 2008年度报告：淋病奈瑟菌、阴道加德纳菌、气单胞菌与副溶血弧菌耐药性分析. 中国抗生素杂志，2010，3（7）：565-568.

[4]乐萍，张媛媛，俞燕红. 198株淋病奈瑟球菌的耐药性分析. 海峡药学，2012，2（4）：216.

[5]董继忠，吴森林，孙爱华. 淋病奈瑟菌临床菌株porB基因分型及其突变与耐药相关性研究. 中国卫生检验杂志，2012，5（8）：1808-1811.

[6]张书清，臧丽丽. 120例淋病患者淋病奈瑟球菌耐药性分析. 中国医药指南，2011，6（12）：270-271.

[7]常改凤，赖玉华，刘志伟，等. 泌尿生殖道分泌物淋病奈瑟菌耐药性分析. 职业与健康，2011，5（15）：1727-1728.

[8]Bala Manju，Kakran Monika，Singh Vikram，et al. Monitoring antimicrobial resistance in Neisseria gonorrhoeae in selected countries of the WHO South-East Asia Region between 2009 and 2012： a retrospective analysis. Sexually transmitted infections，2013，8（9）：1873-1875.

[9]肖春红，袁建芬，喻海忠. DIGFA与FQ-PCR法联合检测淋病奈瑟球菌. 检验医学与临床，2010，2（3）：2613-2614.

[10]赖宇豪. 小儿下呼吸道感染金黄色葡萄球菌的耐药性分析. 临床肺科杂志，2014，4（2）：351-352.

[11]黄夏梦，李苌清，田驰，等. 淋病奈瑟菌对头孢曲松耐药趋势的国内文献综述. 药物流行病学杂志，2014，5（6）：389-393.

[12]金必文，扬丽，丁金龙. 151株淋病奈瑟菌的耐药性分析. 中华医院感染学杂志，2013，4（10）：2504-2506.

[13]鲍彩丽，范倩燕，吴迪，等. 安图医院尿路感染患者中段尿中分离出的粪肠球菌和屎肠球菌的耐药性分析. 检验医学，2014，3（1）：38-41.

[14]Kirkcaldy RobertD，Zaidi Akbar，Hook Edward W，et al. Neisseria gonorrhoeae antimicrobial resistance among men who have sex with men and men who have sex exclusively with women： the Gonococcal Isolate Surveillance Project， 2005-2010. Annals of internal medicine，2013，15（8）：2314-2316.

[15]李士杰.Ⅰ期梅毒合并淋球菌感染一例.中国性科学，2012，21（2）：21-22.

（收稿日期：2014-08-26）