两种检测梅毒方法的联合应用在梅毒诊断中的价值

【中图分类号】R759.1 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783（2012）10-0299-01

【摘要】 目的 分别用梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA），比较2种方法在梅毒诊断方面的应用价值。 方法 对疑为梅毒患者血清标本共256例病人进行了TRUST试验，阳性标本再进行TPPA确证试验。结论 梅毒甲苯胺红不加热血清试验和梅毒螺旋体确证试验同时为阳性时，才能判断为阳性。

【关键词】 TRUST试验非特异性反应 TPPA试验特异性反应

近年来我国梅毒的发病率有逐年增加的趋势1-3，已成为我国重点防治的疾病之一2-3。我院目前使用的初筛方法是梅毒甲苯胺红不加热血清试验。因其操作简单，检测速度快，易于观察等特点，广泛应用于就诊病人的疗效观察中。本试验对疑为梅毒患者血清标本共256例病人进行了TRUST试验筛查，针对TRUST试验于TPPA确证试验做了一个比较。具体实验如下

资料与方法

1 梅毒甲苯胺红不加热血清试验

1.1 仪器上海亚荣生化仪器厂生产的MM-Ⅱ型微量振荡器

1.2 试剂TRUST试剂由上海荣盛生物药业有限公司提供3-5

1.3 标本对疑为梅毒患者血清标本共256例病人

1.4 方法

1.4.1 操作步骤血液凝固经离心分离血清，分别吸取50微升梅毒阳性对照和阴性对照均匀辅加在纸卡的两个圆圈中；取待检血清50微升置于纸卡的另一圆圈中；将试剂轻轻摇匀，用专用滴管垂直分别滴加TRUST试剂1滴于上述血清中；按每分钟100转摇动8分钟，肉眼观察结果。

1.4.2 结果判定在圆圈中可见中等或较大的红色凝聚物为阳性；若可见均匀的抗原颗粒而无凝聚物为阴性3。

2梅毒螺旋体明胶凝集试验

2.1 仪器上海亚荣生化仪器厂生产的MM-Ⅱ型微量振荡器

2.2 试剂TPPA试剂由日本富士公司提供2-4

2.3 标本对疑为梅毒患者血清标本共256例病人

2.4 方法

2.4.1 操作步骤 用滴管将血清稀释液滴入微量反应板第1孔中，加入样本稀释液100微升，第2-4孔分别加入25微升稀释液。吸取25微升待检血清加入第1孔中，混匀后吸出25微升再加入第2孔中，以此类推，第4孔混匀后吸出25微升弃去。于第3孔加入预先稀释好的未致敏粒子25微升， 第4孔加入致敏粒子25微升。于微量振荡器上混匀30秒，加盖后于室温（15℃-30℃）静置反应，2小时后观察结果。

2.4.2 结果判定反应图象：粒子成纽扣状凝集，呈现出外周边缘均匀且平滑的圆形判定为（-）；粒子形成小环状，呈现出外周边缘均匀且平滑的圆形判定为（±）；粒子环明显变大，其外周边缘不均匀且杂乱地凝集在周围判定为（+）；产生均一的凝集，凝集粒子在底部整体上呈膜状延展判定为（++）。

结 果

1. 对疑为梅毒患者血清标本共256例，先用TRUST进行初筛，共检出阳性64例，阳性率为26.5%。

2. 对TRUST阳性的64份继续进行TPPA确证试验，阳性61份，阴性3份，64份血清阳性率为87.5%。

讨 论

梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢性、系统性传染病，近年来有蔓延趋势。梅毒通过可以在人群中相互传播，并可以通过母婴传播，危及下一代，亦可通过完整的粘膜而侵入。此外，输血也可致感染。先天梅毒是患有梅毒的孕妇通过胎盘血行而传染给胎儿。一般在妊娠前四个月，由于滋养体的保护作用，梅毒螺旋体不能通过，故妊娠前四个月胎儿不被感染，以后滋养体萎缩，梅毒螺旋体即可通过胎盘进入胎儿体内传染胎儿。所以，及时、准确的诊断是非常重要的。

梅毒早期出现的体液免疫和细胞免疫反应，对梅毒螺旋体的清除起重要作用，而在晚期出现的细胞免疫反应则引起组织损害。病原性螺旋体的体表蛋白抗原可分为属、种和型抗原，这些均具有特异性，称为特异性抗原；病原性螺旋体同时还具有类脂质抗原，无特异性。螺旋体进入人体后可产生很多抗体，这些抗体可以是针对梅毒螺旋体不同成分的。梅毒的免疫反应极其复杂，在梅毒螺旋体感染的不同病期，细胞免疫和体液免疫均部分的涉及，两者的协同作用能保护机体抵抗再感染，同时与梅毒变化不定的临床症状有关。梅毒血清学检测是通过检查血液中是否存在反应素及特异性抗体。TRUST试验是检测抗类脂质反应素的非特异性试验，以称初筛试验。而TPPA试验是直接检测梅毒特异性抗体的试验，以称确证试验。

目前临床对梅毒螺旋体感染的诊断方法越来越多，但临床应用不一。本研究用2种方法对梅毒患者标本进行检测，结果可以显示TRUST试验操作简单、快捷，结果易于观察，但特异性、敏感性差，会出现假阳性反应4，只适用于初筛，单靠其阳性不能判断为梅毒患者。TPPA试验为高度特异性的确证试验，不会出现假阳性。TPPA试验对于梅毒感染者会终生阳性，文献资料2中对100例梅毒患者治疗3个月及6个月复查，TPPA试验仍为阳性，所以TPPA试验不能作为评价疗效或判断复发与再感染的指标。梅毒螺旋体感染人体后，宿主迅速对螺旋体表面的脂质作出免疫应答，在3-4周产生抗类脂质抗原的抗体（反应素）1，此时TRUST可呈阳性，经治疗后血清滴度可下降并转阴，因此这类试验除可作人群的血清筛查，又可作疗效判定、复发或再感染的指征。尽管对早期梅毒的实验室检查需有确证试验作为确诊依据，但TRUST等筛选试验在临床上可以帮助了解患者的病情活动程度，并有利于治疗后的疗效判定，因此十分重要。

实验室检测梅毒螺旋体抗体，若能同时开展TPPA和TRUST两种试验，其两种试验相互取长补短，可以更好地为临床诊断及判断疗效提供更快速准确的依据。对高危人群同时进行TPPA和TRUST试验常规检测有利于梅毒的早期诊断及治疗，可有效地预防和消除潜伏期传染源，以控制梅毒的传播流行2。

参考文献

[1] 李真，王志彬，杨晓菲.梅毒常见诊断方法及其比较.中华现代皮肤科学杂志，2005，36（1）：2.

[2] 李少君，孙成铭.RPR与TPPA联合检测在梅毒诊断和疗效观察中应用价值.中华医学实践杂志，2005，（7）：4.

[3] 国娟，倪蓝，李义德.748例梅毒患者血清学试验结果分析.中华现代临床医学杂志，2004，（10）：2.

[4] 王德文，刘赴平.两种梅毒检测方法在献血者血液筛查中的应用效果评价.中华医药杂志，2004，（6）：4.