牙髓成牙本质细胞层毛细淋巴管的透射电镜研究

【摘要】 目的 研究牙髓成牙本质细胞层中有无毛细淋巴管及其超微结构特点。方法 取牙根发育完成的健康恒前磨牙15颗,纵向劈开后在2.5%戊二醛中4℃固定1 h,完整地取出牙髓,切成截面积约为1 mm2,长约3 mm的小长条,再在同一固定液中固定2 h,后固定,包埋,半薄切片定位,选取5例牙髓进一步作超薄切片,铀铅染色,用透射电镜观察。结果 在成牙本质细胞层中观察到具有典型毛细淋巴管超微结构特点的结构。结论 在牙根发育完成的年轻恒前磨牙成牙本质细胞层中有毛细淋巴管,其具有与其他组织毛细淋巴管基本相似的超微结构特征。

【关键词】 前磨牙;成牙本质细胞;毛细淋巴管;透射电镜

Studies on the Lymphatic Capiliaries in the Odontoblast Layer ofPulp with Transmission Electron Microscope.

GONG Yan-hong,WANG Zhu-ping,WANG Duo,et al.Department of Stomatology,Qianfoshan Hospital of Shandong Province,Jinan 250014,China

【Abstract】 Objective To study the lymphatic capiliaries in the odontoblast layer of pulp.Methods 15 healthy premolars were employed in the experiments whose roots had developed.They were cleaved longitudinally as soon as they were extracted and put into 2.5%glutaraldehyde soulution for 1 hour at 4℃.The pulps were taken out and cut into little pieces and re-immersed in the same soulution for 2 hours.Then they were postfixed,dehydrated and embedded.And semithin sections were made.5 pulps were chosen to make ultrathin sections and observedby transmission electronmicroscope(TEM).Results In the odontoblast layer,structures which had typical characters of lymphatic capiliaries were found with TEM.Conclusion There are lymphtic capiliaries in the odontoblast layer of pulps which are young and healthy.The characters of lymphtic capiliariy are similar to those of other tissues.

【Key words】 Premolar; Odontablast; Lymphatic capiliary; Transmission electron microscope

牙髓中存在淋巴管已是共识,许多学者用多种观察法对牙髓淋巴管的分布做过研究[1-5],但在成牙本质细胞层中是否有毛细淋巴管目前尚存在争议。为了深入探讨这一问题,本文应用透射电镜对此进行了研究。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 标本收集 选取因正畸而需要拔除恒前磨牙的患者9例,年龄14~22岁,男5例,女4例,取得牙根发育完成的健康恒前磨牙15颗。

1.1.2 试剂与仪器 常规透射电镜观察所用试剂及透射电镜(JEM1200EX型,日本)。

1.2 方法 15颗恒前磨牙拔出后立即纵向劈开,放在2.5%戊二醛中4℃固定1 h,完整地取出牙髓,将其切成截面积约为1 mm2,长约3 mm的小长条,再在同一固定液中4℃固定2 h。1%锇酸后固定1 h,脱水,包埋,半薄切片,甲苯胺蓝染色定位,选用5颗成牙本质层结构良好且在该层细胞中有难以确定是毛细血管还是毛细淋巴管的管状结构的牙髓,进一步作超薄切片,醋酸铀、枸橼酸铅染色,JEM1200EX透射电镜观察。

2 结果

5例牙髓超薄切片后,有3例在成牙本质细胞层观察到毛细淋巴管(图1)。其结构为:由单层内皮细胞构成管壁,管壁厚薄不均,有核区厚,无核区薄;胞核成丘状向管腔外突起;管腔大而不规则;基底膜不连续。内皮细胞之间连接复杂,可见重叠连接,插入连接(图2)。未见开放连接。胞浆内有大量大小不等的囊泡,直径在50~80 mm之间,近胞核区有Weibel-Palade小体(图3)。

3 讨论

成牙本质细胞层是否有毛细淋巴管一直存在争议。普通染色光镜观察法是以往多用的研究牙髓淋巴管分布的方法。光镜下区分毛细血管和毛细淋巴管的标准是:毛细血管管壁厚,管腔小,而毛细淋巴管管壁薄,管腔大。这样的标准缺乏客观性,因而不同的学者用此法研究的结果并不一致[1-3]。透射电镜下,毛细血管与毛细淋巴管结构区分明显:毛细淋巴管由单层内皮细胞构成管壁,管壁厚薄不均,胞核成丘状向管腔外突起;管腔大而不规则;基底膜不连续;内皮细胞间连接复杂。而毛细血管由2~3层内皮细胞构成管壁;管腔小,基底膜连续;内皮细胞间无复杂连接[5,6]。尽管标准客观,以往的学者采用透射电镜对成牙本质细胞层毛细淋巴管进行研究的结果却不同[7],这可能与透射电镜视野小及牙髓成牙本质细胞层取材困难等因素有关。成牙本质细胞层位于牙髓周缘,而牙髓被硬组织包围,成牙本质细胞又有长突起伸入牙本质,取材时该层细胞容易被撕脱,因而要取到完整的,适于透射电镜观察的牙髓十分不易。实验中,我们除了加大了标本采集量,还采用了半薄切片定位法,即首先在光镜下选取成牙本质细胞层结构保存良好的牙髓,然后在其中选出在成牙本质细胞层可以找到可能为毛细淋巴管的结构的切片,进一步制作超薄切片在透射电镜下观察。

我们在实验中观察了15例牙髓,仅在3例中发现在成牙本质细胞层存在少量具有毛细淋巴管典型超微结构特点的结构,证明在牙根发育完成的年轻前磨牙成牙本质细胞层有毛细淋巴管,但不多见。其超微结构特点与亓庆国[8]所作牙髓毛细淋巴管的研究相同。

参考文献

[1] Bernick S.Morphological changes to lymphtic vessels in pulpal inflammation.J.Dent Res,1977,56(7):842-849.

[2] Bernick S.Lymphatic vessels of the human dental pulp.J Dent Res,1977,56 70-77.

[3] Bishop MA,Malhotra M.An investigation of lymphtic vessels in the feline dental pulp.The Am J Anat.1990;187:247-253.

[4] 亓庆国.牙髓淋巴管的分布及超微结构研究.山东医科大学,1998:9-10.

[5] Ottaviani P.Ultrastructure of lymphatic vessels in some functional conditions.Acta Anat,1969,73:322-329.

[6] 刘执玉,李伯勤,张慧琳.猪的皮下毛细淋巴管的超微研究.解剖学杂志,1988,11(4):263-265.

[7] Marchetti C,Piggl P,Callgaro A.Lymphatic vessels in the healthy human dental pulp.Acta Anat,1991,140:329-334.

[8] 亓庆国,汪竹平,王铎,等.牙髓毛细淋巴管的超微结构研究.华西口腔医学杂志,2000,18(4):222-225.