凝血酶原时间及凝血因子在肝病中的应用

[关键词] 肝病 凝血酶原时间 凝血因子

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李琴 贾继东 王宝恩[摘要] 凝血酶原时间（prothrombin time，PT）是反映肝脏合成功能、储备功能、病变严重程度及预后的一个非常重要的指标。目前凝血因子的临床检测已成为现实，它在判断肝病病情方面将提供较PT更早、更准确的信息。

一、PT在肝病中的临床应用

实验室报告PT有4种方式：秒、活动度（prothrombin time activity percentage, PTA）、率（prothrombin time ratio, PTR）、国际标准化比率（international normalized ratio, INR）。4种形式在临床上应用价值不同。

1. PT在肝病中的应用价值：PT主要由肝脏合成的凝血因子I、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的水平决定，它在肝病中的作用尤为重要。急性肝炎PT异常率为10%～15%，慢性肝炎为15%～51%，肝硬化为71%，重型肝炎为90%。在2000年病毒性肝炎诊断标准中，PTA是病毒性肝炎患者临床分期的指标之一。慢性病毒性肝炎患者轻度PTA>70%、中度70%～60%、重度60％～40%；肝硬化代偿期PTA>60%、失代偿期PTA<60%；重型肝炎PTA<40%[1]。Child-Pugh分级中PT延长1～4s计1分、4～6s计2分、>6s计3分，结合其它4项指标（白蛋白、胆红素、腹水、脑病）将肝病患者肝功能储备分为A、B、C级；决定终末期肝病患者病情严重程度及肝移植先后顺序的MELD评分（Model for end-stage liver disease），公式为3.8×loge［胆红素（mg/dl)］+11.2×loge（INR）+9.6×loge［肌酐（mg/dl）］+6.4×（病因：胆汁性或酒精性0；其它1），INR是3项指标之一[2]。我国第七届全国血栓与止血会议制定的肝病DIC诊断标准中包括：PT延长5s以上或活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）延长10s以上，因子Ⅷ: 活性<50%(必备条件)[3]；PT与血小板计数常用于评价进行肝活检与外科手术患者的出血倾向，如血小板<50×109/L、PT延长超过正常4s是肝活检、外科手术包括肝移植的禁忌证[4]。Schepis等[5]报道代偿期肝硬化患者如果PTA<70%、血小板<100×109/L同时门静脉宽度>13mm，则出现食道静脉曲张的机率大，属于高危出血患者，应作胃镜检查及相关治疗。可见PT在肝病患者的诊断与治疗中起着重要作用。

2. PTA与INR在肝病中应用价值的比较：PT受组织凝血活酶来源不同、仪器和操作技术等多种因素的影响，使结果在实验室内部与实验室之间存在很大的差异。实验室报告PT的4种形式中，哪一种方式是评价肝病患者病情的最佳方式？目前存在争议的是PTA与INR。

WHO于80年代早期用INR将PT标准化。因为从人和兔脑的不同提取物所测PTR的Log值之间存在线性相关，因此需要一个校正系统将PTR与WHO标准相连。为此，1份非常敏感的人脑提取物被指定为第一国际参考物（international reference preparation，IRP），通过定义规定：第一份IRP的国际敏感化指数（international sensitivity index，ISI）为1.0，将商业组织凝血活酶的敏感性与IRP相比，得出其ISI值，INR＝PTR1ISI＝PTR01.0（PTR0代表IRP所测的PTR、PTR1代表商业组织凝血活酶测同一份血浆的PTR值），INR值排除了试剂来源不同对结果所带来的差异。

INR/ISI已合理用于监测口服抗凝治疗的患者，目前INR也用于评价终末期肝病患者的病情[6]，但是否适合于肝病患者仍有争议。 Robert等[7]用7种组织凝血活酶检测了27例肝功能衰竭患者及29例口服抗凝药患者的PTs、PTR、PTA与INR。对于肝病患者，只有PTA可以排除组织凝血活酶来源不同所致PT的变化，INR组间差异非常显著。但对接受口服抗凝治疗的患者，只有INR可以排除组织凝血活酶来源不同所致结果的差异；PTA组间差异非常显著。可能与以下因素有关：（1）WHO标定不同组织凝血活酶的ISI时用的是正常人或口服抗凝治疗患者的血浆，而非肝病患者的血浆。（2）肝病与口服抗凝治疗时凝血功能紊乱的机制不同。（3）许多肝病患者INR值非常高，而它超过抗凝范围（4.0）时，标准化的准确性将大大降低。而PTA检测简单，所受影响因素少，只要准确测定正常人与肝病患者的PT即可，因此目前它是评价肝病患者病情或病情变化的最佳表达方式。

二、凝血因子在肝病中的临床应用

通常认为PT延长代表凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的活性低于正常或抗凝物质的存在。肝功能轻度受损，PT仍可正常，它仅在肝实质细胞严重损害时才明显延长。仅以PT判断肝病患者凝血功能异常和肝细胞损伤程度是不够的，如同时测定凝血因子的活性，可能更有价值。

大多数研究认为急性肝炎和慢性肝炎轻度患者，凝血因子Ⅱ活性正常或轻度下降；慢性肝炎中度、重度和肝硬化患者，凝血因子Ⅱ活性水平明显下降，说明它的降低程度与肝细胞损害程度密切相关。有研究认为异常凝血酶原（protein-Ⅱ induced by vitamin K absence，PIVKA-Ⅱ）可用于原发性肝癌的诊断，部分AFP阴性的原发性肝癌患者PIVKA-Ⅱ阳性，还有研究认为小肝癌患者PIVKA-Ⅱ阳性率高于AFP[8]，它还有助于原发性肝癌的病情变化及疗效判断[9]，在临床上应联合检测AFP与PIVKA-Ⅱ。

研究显示凝血因子Ⅴ活性在肝功能失代偿或严重肝病时才减少，故认为它是判断肝病患者预后的良好指标。Izumi等[10]研究显示：对乙酰氨基酚诱导的需肝移植的暴发性肝功能衰竭患者，凝血因子Ⅴ活性<20%时对死亡的阳性预测值为0.49，<10%时为0.57；而其它原因诱导的需肝移植的暴发性肝功能衰竭患者，凝血因子Ⅴ活性<20%时对死亡的阳性预测值为0.85，<10%时为1.00，因此认为凝血因子Ⅴ活性是判断非对乙酰氨基酚诱导的暴发性肝功能衰竭患者预后的最佳预测指标。邹正升等[11]研究认为凝血因子Ⅴ水平比PTA更特异的反映重型肝炎患者的预后，两者联合可能有助于更早更准确诊断重型肝炎，同时指出应加强重型肝炎因子Ⅴ的检测及重视因子Ⅴ在作为肝衰竭患者行肝移植术时的主要筛选指标的研究。凝血因子Ⅴ活性除用于判断预后外，还与血栓的形成密切相关，可作为门静脉血栓形成的预测指标。

凝血因子Ⅶ的半衰期最短（4～6h），血浆含量较低（0.5～2mg/L），故可作为肝病患者蛋白质合成功能减退的早期诊断指标。Rodriguez-Inigo等[12]在慢性肝病患者通过肝活检组织原位杂交的方法检测到凝血因子Ⅶ的表达与肝纤维化的分级呈负相关，可作为预测纤维化程度的指标。凝血因子Ⅶ活性还与预后有着密切的联系，如Violi等研究认为凝血因子Ⅶ活性<34%的肝硬化患者93%在随访10月内死亡，故认为它是肝硬化患者预后好坏的早期预测指标，可更好识别肝移植候选人。肝硬化患者凝血因子Ⅶ活性可明显下降，凝血因子Ⅶ缺乏可导致血小板活性的改变，结合血小板计数减少使出血时间延长，因此对有创诊断与治疗的肝硬化患者，还应该用凝血因子Ⅶ活性进行出血危险度的评估，而不能仅看血小板计数[13]。除诊断之外，重组凝血因子Ⅶ可以有效地纠正肝病患者凝血异常，有利于有创性检查的进行[14]。

凝血因子Ⅷ不仅由肝细胞产生，而且由窦内皮细胞与库普弗细胞产生,其它组织如肾脏也可产生。当肝细胞合成功能减退时，窦内皮细胞及库普弗细胞仍维持凝血因子Ⅷ的合成；肝脏清除功能减退，内毒素及免疫因素刺激使它的合成与释放增加[15]。范威氏因子（von willebrand factor，vWF）主要由肝外合成，肝硬化患者可能由于内毒素血症，血管内皮细胞功能异常，使其释放增加；vWF分解蛋白酶对其分解减少，也使其血浆水平升高。在大多数病毒性肝炎患者凝血因子Ⅷ活性、vWF 均明显升高。但肝病合并DIC者，由于凝血因子大量消耗，使凝血因子Ⅷ活性水平降低，故我国将凝血因子Ⅷ活性小于正常50%作为诊断肝病合并DIC的必备条件之一[3]。

纤维蛋白原是肝脏合成的一种急性反应蛋白，在多数急性肝

炎患者病程初期它的血浆水平是升高的，慢性肝病患者是正常的，晚期肝硬化与急性肝功能衰竭患者由于血管内凝血消耗与清除增加可能导致低纤维蛋白原血症。凝血因子Ⅻ、Ⅺ、高分子量激肽原、激肽释放酶原都由肝脏合成。肝病时，由于它们合成减少，或者参与凝血、激肽、纤溶系统的激活而被消耗，故血浆水平是降低的。参 考 文 献 [1]中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会. 病毒性肝炎防治方案. 中华肝脏病杂志, 2000, 8: 324-329.[2]Kamath PS, Wiesner RH, Malinchoc M, et al. A model to predict survival in patients with end- stage liver disease. Hepatology, 2001,33: 464-470.[3]第七届全国血栓与止血学术会议制定的几项诊断参考标准. 中华血液学杂志, 2000, 21: 165-168.[4]Ishikawa M, Yogita S, Miyake H, et al. Clarification of risk factors for hepatectomy in patients with hepatocellular carcinoma. Hepatogastroenterology, 2002, 49: 1625-1631.[5]Schepis F, Camma C, Niceforo D, et al. Which patients with cirrhosis should undergo endoscopic screening for esophageal varices detection? Hepatology, 2001, 33: 333-338.[6]Botta F, Giannini E, Romagnoli P, et al. MELD scoring system is useful for predicting prognosis in patients with liver cirrhosis and is correlated with residual liver function: a European study. Gut, 2003, 52: 134-139.[7]Robert A, Chazouilleres O. Prothrombin time in liver failure: time, ratio, activity percentage, or international normalized ratio? Hepatology, 1996, 24: 1392-1394.[8]Cui R, Wang B, Ding H, et al. Usefulness of determining a protein induced by vitamin K absence in detection of hepatocellular carcinoma. Chin Med J (Engl), 2002, 115: 42-45.[9]Naraki T, Kohno N, Saito H, et al. gamma-Carboxyglutamic acid content of hepatocellular carcinoma-associated des-gamma-carboxy prothrombin. Biochim Biophys Acta, 2002, 1586: 287-298. [10]Izumi S, Langley PG, Wendon J, et al. Coagulation factor V levels as a prognostic indicator in fulminant hepatic failure. Hepatology,1996, 23: 1507-1511.[11]邹正升, 刘志国, 陈菊梅, 等. 凝血因子Ⅴ在重型肝炎患者中的检测及其临床意义. 中华实验和临床病毒学杂志, 2003, 17: 274-276.[12]Rodriguez-Inigo E, Bartolome J, Quiroga JA, et al. Expression of factor VII in the liver of patients with liver disease: correlations with the disease severity and impairment in the hemostasis. Blood Coagul Fibrinolysis, 2001, 12: 193-199.[13]Manzano ML, Arocena C, Tomas JF, et al. Measurement of the procoagulant activity of factor VII in patients with liver cirrhosis and normal prothrombin activity: evaluation of the bleeding risk. Blood Coagul Fibrinolysis, 2000, 11(Suppl 1): S95-99.[14]Shami VM, Caldwell SH, Hespenheide EE, et al. Recombinant activated factor VII for coagulopathy in fulminant hepatic failure compared with conventional therapy. Liver Transpl, 2003, 9: 138-143.[15]Hollestelle MJ, Thinnes T, Crain K, et al. Tissue distribution of factor VIII gene expression in vivo-a closer look. Thromb Haemost, 2001, 86: 855-861. 作者单位：100050 北京，首都医科大学附属北京友谊医院肝病研究中心李琴 女，30岁，在读博士。