男性不育患者抗抗体检测及临床应用

世界卫生组织（WHO）在不育夫妇标准检查与诊断手册中，将免疫学病因列为男性不育诊断分类之一，男性不育患者抗抗体（AsAb）临床检测阳性率10%～30%。2009年对183例分析显示有凝集、不活动或畸形率高的不育患者，进行抗抗体检测，结果报告如下。

资料与方法

2010年门诊收治183例不育患者，分析显示凝集、不活动或畸形率＞30%，年龄23～35岁，病史2～7年。

方法：①法采集被检者全份标本，置37℃水浴箱完全液化，500×g离心10分钟，备用。②蒸馏水按20:1的比例将浓缩洗涤液稀释备用，同时配制含5%小牛血清的样品稀释液。③按待检标本取相应的抗原包被微孔板，同时取3个微孔板分别作为空白对照、阴性对照、阳性对照。除阴、阳性对照孔外，每孔加样品稀释液50μl，待检精浆50μl。阴、阳性对照孔分别加阴、阳性对照液100μl混匀。用封膜覆盖反应板，置37℃温育40分钟。④用配好的洗涤液洗板4次，每次300μl/孔，每次3分钟，拍干。⑤每孔加酶结合物2滴，充分混匀后，用封膜覆盖，置37℃温育30分钟。⑥甩净孔内液体加洗涤液洗板，洗涤方法同步骤4。⑦每孔加显色剂A、B各50μl，混匀后室温下避光反应10分钟。⑧每孔加终止液50μl，终止反应。⑨结果判定：以空白对照孔调零，测450nm吸光度值。P/N（待测样本OD值/阴性对照OD值）≥2.1为阳性。

统计学处理：将所得实验数据采用SPSS11.5统计软件进行统计分析。组间比较采用t检验，方差不齐时采用t检验。结果以P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

183例检测样本中，AsAb阳性77例，阳性率42.1%。近年报道［1～3］，不育患者AsAb阳性率10.2%～32.6%，检测结果高于报道，其差异有统计学意义（P＜0.01）。

讨 论

作为一种独特的抗原与机体免疫系统接触后，可引起自身或同种免疫反应而产生抗抗体，人类抗原分固有抗原和附着抗原，固有抗原为发生过程中产生的，而附着抗原为进入附睾或精浆时，一些蛋白质吸附在膜上形成的，这两类抗原都能诱发机体产生抗抗体。正常情况下，由于血睾屏障的存在，机体免疫系统并不会对产生免疫反应，但如果生殖系统有炎症、外伤、手术等损伤了这一屏障，可导致或其可溶性抗原漏出并被局部吞噬细胞吞噬，进而致敏淋巴细胞发生免疫反应，从而产生抗抗体。

对于育龄期妇夫而言，一旦抗抗体在体内出现，就可能引起不育。抗抗体影响生育的主要途径有以下几个方面：①抗抗体，尤其是IgM抗体可以与结合，导致的凝集，凝集的活动受到影响，不能与卵子结合；②抗抗体可以与的尾部发生反应，影响的运动；③抗抗体的Fc段与宫颈黏液糖蛋白结合，干扰穿过排卵期宫颈黏液；④在多核中性粒细胞和巨噬细胞的表面存在抗抗体的Fc段受体，它们结合后可以激活补体系统，从而破坏的膜结构和导致的活动丧失：⑤抗抗体与头部结合后可以干扰精卵结合，阻止穿透卵细胞。

临床上如何判断患者是否需要进行抗抗体检测，戴继灿对体检测的指征总结如下［4］：①分析显示出现凝集现象、不活动或者形态异常增加；②怀疑梗阻引起计数下降或无时，抗抗体检测有助于诊断；③不明原因的不育；④后6～12小时内宫颈黏液中出现不动或摇摆运动的；⑤输精管结扎后复通的患者；⑥配偶因为生育问题打算进行侵入性检查；⑦准备进行体外授精选择治疗方案前。我中心正是选择性的进行抗抗体检测，因而阳性率较高。

对于抗抗体阳性患者，治疗可选择类固醇激素药物，如强的松或甲基强的松，其机理为抑制新的抗体产生和促进已经产生的抗体退变，治疗的成功率存在个体差异，主要与抗体降解速度和类固醇激素的代谢速度有关。一般而言，类固醇激素使用2周后，抗体可降低到最低水平，但也有研究者认为类固醇激素可以降低顶体酶的活性，影响精卵结合能力，这些潜在的不良反应也为药物治疗带来隐患。除药物治疗外，还可以选择辅助生殖技术进行治疗：①宫腔内人工授精（IUI）:通过IUI进行治疗，可以使更多的避开宫颈黏液对运动的干扰到达子宫，治疗的成功率与抗抗体的滴度有关；②体外授精（IVF）、IVF可以使完全避开女性生殖道内免疫因素的干扰，在体外直接与结合，IVF治疗成功率高于IUI，它适合女方血清或宫颈黏液中存在抗抗体，或与抗抗体结合比例

尽管抗抗体影响生育，但是它并不能完全消除自然生育的可能性，有部分抗抗体阳性的患者仍然可以自然受孕。在临床上，尽可能掌握抗抗体的检测指征，对症处理，以提高不育症患者的治愈率。

参考文献

1 王启凤,谢晓东,江平.不孕不育患者抗抗体分析.中国优生与遗传杂志,2006,14（6）:110-118.

2 郑艳芬,邓辉.不孕不育患者免疫性抗体检测结果分析.实用医技杂志,2006,13（7）:1102.

3 马为群.910例不孕症患者抗抗体检测的结果分析.浙江中医药大学学报,2006,30（5）:504-505.

4 载继灿.抗抗体检测指征以及临床处理.中国男科学杂志,2004,23（3）:62.