健脾益气方对化疗性胃肠功能紊乱大鼠血清GAS\EGF水平的影响

[摘要] 目的 探讨健脾益气方（JPYQ）防治大鼠化疗性胃肠功能紊乱的效果及作用机制。 方法 将48只大鼠按随机原则分为6组：空白对照组、化疗模型组、枸橼酸莫沙必利组（阳性药对照组）、化疗+JPYQ高剂量组（高剂量组）、化疗+JPYQ中剂量组（中剂量组）、化疗+JPYQ低剂量组（低剂量组），每组8只。采用环磷酰胺制备大鼠化疗模型，在实验的第1、3、5天，空白对照组给予生理盐水腹腔注射，其余5组给予环磷酰胺注射液腹腔注射，造模后每组给予相应的药物灌胃。检测各组大鼠血清胃泌素（GAS）与表皮生长因子（EGF）的水平。 结果 与空白对照组比较，化疗模型组大鼠血清EGF水平明显降低，GAS含量则明显升高，差异有统计学意义（P0.05）。 结论 JPYQ防治化疗性胃肠功能紊乱的效果明显，其作用机制主要与影响血清EGF水平相关。

[关键词] 健脾益气方；大鼠；环磷酰胺；表皮生长因子；胃泌素

[中图分类号] R-33[文献标识码] A[文章编号] 1674-4721（2014）06（a）-0016-03

Effect of Jianpi yiqi recipe on serum GAS and EGF concentrationof rats with gastrointestinal dysfunction caused by chemotherapy

LIN Jin-chun ZHANG Wei-hua PENG Shu-ling

Department of Traditional Chinese Medicine,the Second People′s Hospital of Foshan City in Guangdong Province,Foshan 528000,China

[Abstract] Objective To investigate the effect of Jianpi yiqi recipe (JPYQ) on the gastrointestinal functional disorder in rat receiving chemotherapy. Methods Forty-eight rats were equally randomized into 6 groups,and they were blank control group,chemotherapy model group,mosapride citrate group (positive control group),chemotherapy+JPYQ high-dose group (high-dose group),chemotherapy+JPYQ middle-dose group (middle-dose group),chemotherapy+JPYQ low-dose group (low-dose group),each group of 8 animals.Preparation of rat chemotherapy model was used cyclophosphamide,rats in the blank control group were given intraperitoneal injection of normal saline while the rats in the other groups were given intraperitoneal injection of cyclophosphamide on experimental day 1,3 and 5.During the modeling,the rats in the medication groups were given the corresponding medicine according to the experimental design.The levels of serum gastrin(GAS) and epidermal growth factor (EGF)in rats were determined. Results Compared with blank control group,the level of EGF in model group was significantly decreased,while the level of GAS was significantly increased (P0.05). Conclusion There is evident therapeutic effect of Jianpi yiqi recipe on gastrointestinal dysfunction caused by chemotherapy.And it′s mechamism is

[Key words] Jianpi yiqi recipe;Rats;Cyclophosphamide;Epidermal growth factor;Gastrin

化疗在恶性肿瘤的治疗过程中可导致胃肠功能紊乱，严重干扰化疗进程，影响预后[1]，中医学在长期临床实践中积累了宝贵的经验，有着独特的疗效，健脾益气方经多年临床实践，对氟尿嘧啶、环磷酰胺、顺铂等多种化疗药物引起的胃肠功能紊乱有确切疗效，早期实验证实，对环磷酸胺化疗所致的小鼠胃排空及肠推进功能障碍具有显著的改善作用[2]，而胃泌素（gastrin，GAS）和表皮生民因子（epidermal growth factor，EGF）被认为是胃肠黏膜损伤愈合过程中的防御因子，发挥重要的作用[3-4]。本研究旨在探讨健脾益气方（JPYQ）对化疗性胃肠功能紊乱大鼠血清GAS、EGF的影响，进一步研究本方发挥治疗作用的机制，为临床提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 药材及试剂

JPYQ（组成：太子参30 g、白术12 g、云苓15 g、甘草3 g、陈皮5 g、法夏15 g、灵芝20 g、川朴12 g、生黄芪30 g、砂仁5 g）药材由佛山第二人民医院中药房提供。注射用环磷酰胺（0.2 g/瓶）批号：32020857，江苏恒瑞医药股份有限公司，用生理盐水配成4.5 mg/ml溶液。枸橼酸莫沙必利片批号：19990315，江苏恒瑞医药股份有限公司，用蒸馏水配成0.15 mg/ml的溶液。EGF试剂盒（美国进口分装），批号：R20131221；GAS试剂盒（美国进口分装），批号：R20131219。以上4个试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 实验动物

SPF级SD大鼠48只，雌雄各半，由南方医科大学实验动物中心提供，实验动物许可证号：SCXK粤2011-0015。实验温度21～24℃，湿度50%～70%，动物自由饮食。

1.3 仪器

752N紫外-可见分光光度计，上海菁华科技仪器有限公司产品；iMARK酶标仪，美国Bio-Rad公司生产；BA 110S万分之一电子天平，Sartorius公司产品；YP10002小动物电子称，上海佑科仪器仪表有限公司；TDL-40B低速大容量离心机，上海安亭科学仪器厂生产；HC-3018R高速离心机，安徽中科科学仪器有限公司产品。

1.4 分组

取SPF级SD大鼠48只，雌雄兼半。适应性喂养3 d后，按随机化原则分为6组：空白对照组、化疗模型组、枸橼酸莫沙必利组（阳性药对照组）、化疗+JPYQ高剂量组（高剂量组）、化疗+JPYQ中剂量组（中剂量组）、化疗+JPYQ低剂量组（低剂量组），每组8只动物。

1.5 JPYQ水煎液的制备

按处方取5倍量药材，除砂仁外其他药材加蒸馏水至药材总重的10倍量，浸泡30 min，武火煎至沸腾，调文火保持沸腾状态40 min后，加入捣碎的砂仁，继续煎煮5 min，滤出药液。药渣加8倍量的蒸馏水，再次煎煮，过滤。合并两次药液，浓缩成含原生药2.0 g/ml，于4℃保存备用。

1.6 造模与给药

在实验的第1、3、5天，空白对照组给予生理盐水腹腔注射，其余5组给予环磷酰胺注射液（45 mg/kg）腹腔注射，1次/d。在第2天开始，对药物组大鼠按下述剂量灌胃给药：枸橼酸莫沙必利1.5 mg/kg、高剂量组20 g/kg、中剂量组10 g/kg、低剂量组5 g/kg，空白组和模型组灌胃等体积的蒸馏水，连续给药10 d。

1.7 大鼠血清GAS与EGF的检测

于末次灌胃给药24 h后，按1.0 g/kg的剂量用乌拉坦麻醉大鼠，自腹主动脉取血约5 ml，静置2 h，以3000 r/min，离心10 min。取血清分别按GAS试剂盒和EGF试剂盒的方法（ELISA法）测定大鼠血清中GAS及EGF的含量。

1.8 统计学处理

本研究所得数据均采用SPSS 13.0统计软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，组间多重比较采用单因素方差分析，方差齐时用LSD方法，以P

2 结果

与空白对照组比较，化疗模型组大鼠血清EGF水平明显降低，GAS含量则明显升高，差异有统计学意义（P0.05）（表1）。

表1 JPYQ 对化疗大鼠血清GAS与EGF水平的影响（x±s，n=8）

与空白对照组比较，*P

3 讨论

胃肠功能紊乱是化疗引起的常见毒副反应，主要表现为食欲不振、恶心呕吐、脘腹胀痛、腹泻或便秘等，甚至可导致水、电解质紊乱，酸碱平衡失调及营养不良，严重影响化疗的进程、疗效及患者的生存质量、预后等[5]。

本实验所采用JPYQ中太子参为君药，起益气健脾、补气生津、双向调节免疫功能，能提高抗应激能力[6-8]。黄芪补中益气而不燥，有扶正抗癌、增强免疫、防治骨髓抑制、清除有毒自由基的作用[9]，能升高白细胞，并能提高单核-吞噬细胞系统的功能，增T细胞、LAK细胞、NK细胞活性及L-2抗癌活性[10]。法夏、厚朴能有效防治化疗所致的呕吐，可能与其能有效的抑制胃肠分泌胃酸，加快胃肠排空，增加黏膜血流，保护胃肠黏膜微血管有关[11]。综合全方能有效治疗化疗药物引起的胃肠功能紊乱。

在正常情况下，胃肠黏膜的完整性较好，所以血中EGF水平较低。而当胃肠黏膜存在炎症和溃疡时，受损的胃肠黏膜通透性增加，加之此时胃腔内EGF增加，便有较多的EGF进入血液循环，血清EGF水平会上升，而GAS具有强大的刺激胃酸分泌效应[12-13]。EGF是一种具有广泛生物学效应单链多肽[14]，具有抑制胃酸、促进肠蠕动和保护胃肠黏膜的功能[15]，其可增加组织DNA、RNA及蛋白质的合成，刺激组织生长和修复[16]。本研究结果显示，与空白对照组比较，化疗模型组大鼠血清EGF水平明显降低，GAS含量则明显升高（P

综上所述，JPYQ防治大鼠化疗性胃肠功能紊乱的效果确切，其作用机制与升高血清EGF有关，其分子水平机制有待进一步研究。

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（收稿日期：2014-04-18本文编辑：林利利）