喉癌组织中淋巴管生成与患者临床病理特征及预后的关系研究

【前言】喉癌组织中淋巴管生成与患者临床病理特征及预后的关系研究由文秘帮小编整理而成，但愿对你的学习工作带来帮助。1.1 一般资料 选择以2010年6月～2012年1月41例在郑州大学第一附属医院住院就诊的喉癌患者为研究对象，所有患者手术时取其喉癌组织标本，术后病理科送检，41例患者中高分化鳞癌14例，中分化鳞癌19例，低分化鳞癌8例。所有患者术前未行任何放疗及化疗，其中男35例，女6...

[摘要] 目的 对喉癌组织中淋巴管生成与患者临床病理特征及预后的关系进行分析研究。 方法 以D2-40作为淋巴管内皮标志物，采用免疫组化双标记法对81例患者的喉癌组织D2-40进行染色检测淋巴管内皮细胞的增殖活性，统计分析喉癌微淋巴管与喉癌患者临床病理特征及预后的关系。 结果 D2-40在喉癌组织中的淋巴管密度明显高于喉状瘤和喉鳞状上皮不典型增生组织中淋巴管密度，差异有统计学意义（P < 0.05），而喉癌组织中淋巴管密度与转移的淋巴结组织中淋巴管密度比较，差异无统计学意义（P > 0.05）。D2-40标记的淋巴管密度与喉癌患者的年龄、性别及临床分型无明显相关性（P > 0.05），而与喉癌患者的组织分化程度、临床分期及淋巴结转移明显相关比较（P < 0.05）。喉癌患者的年龄、性别、分化程度、淋巴结转移及远处转移与患者的预后无关，而喉癌患者的临床分期、临床分型及淋巴管密度与患者的预后密切相关。 结论 淋巴管密度与喉癌患者的生存预后密切相关，在临床治疗上对淋巴管密度高的患者进行早期预防治疗，可以有效的提高患者的生存质量和时间。

[关键词] 喉癌；淋巴管生成；临床病理特征；预后

[中图分类号] R735.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）07（a）-0068-03

喉癌是较为常见的恶性肿瘤之一，以鳞癌最为常见，喉癌患者最常见的转移方式是淋巴管转移，判断喉癌患者预后最可靠的指标是有无淋巴管转移，其中D2-40是最新研究者发现的淋巴管特异性标志物之一，为了更深层次的研究喉癌患者淋巴管生成与患者临床病理特征及预后的关系，为临床抗淋巴结转移治疗提供相应的理论基础，本研究采用免疫组化双标法检测了喉癌组织中D2-40的表达，分析淋巴管生成与喉癌临床病理特征的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择以2010年6月～2012年1月41例在郑州大学第一附属医院住院就诊的喉癌患者为研究对象，所有患者手术时取其喉癌组织标本，术后病理科送检，41例患者中高分化鳞癌14例，中分化鳞癌19例，低分化鳞癌8例。所有患者术前未行任何放疗及化疗，其中男35例，女6例，选择21例成年人喉状瘤、鳞状上皮不典型增生组织和转移的淋巴结标本作为对照组。

1.2 染色方法

采用4%甲醛固定，采用常规石蜡进行病理切片，将组织切片置于第一缸二甲苯中于60℃烤箱中加热20 min，再置于第二缸二甲苯中20 min进行脱蜡水化，按照SP试剂盒的说明书步骤进行染色，采用山羊血清进行封闭，滴加一抗4℃冰箱过夜，37℃水浴箱复温30 min，滴加生物素二抗，37℃孵育30 min，微波抗原修复，二氨基联苯胺（DAB）硅色。苏木精浅染，中性树脂封片，光镜观察。

1.3 结果判定

以细胞浆或细胞膜染成暗紫色为染色阳性，以阳性着色的单个内皮细胞或细胞簇记为一个淋巴管，先在40倍下选择肿瘤内和癌周及癌旁正常组织阳性脉管最丰富的区域，分别在200倍和400倍视野下计数淋巴管密度，同时计数阳性的微淋巴管，每例计数5个视野，计数微淋巴管的增殖活性。

1.4 统计学方法

采用统计软件SPSS 15.0对实验数据进行分析，计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，采用方差分析，比较采用t检验。计数资料以率表示，采用χ2检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 D2-40在不同喉组织中的表达密度比较

从表1中可以看出D2-40在喉癌组织中的淋巴管密度明显高于喉状瘤和喉鳞状上皮不典型增生组织中淋巴管密度，差异有统计学意义（t = 5.2690，P = 0.000 0；t = 4.8657，P = 0.000 0），而喉癌组织中淋巴管密度与转移的淋巴结组织中淋巴管密度相比，差异无统计学意义（t = 0.6549，P = 0.5199）。

2.2 喉癌组织中淋巴管密度与临床病理特征的相关性研究

从表2中可以看出D2-40标记的淋巴管密度与喉癌患者的年龄、性别及临床分型无明显相关性（P > 0.05），而与喉癌患者的组织分化程度、临床分期及淋巴结转移明显相关（P < 0.05）。

2.3 喉癌患者淋巴管生成、临床病理特征与预后的关系

从表3中可以看出患喉癌患者的年龄、性别、分化程度、淋巴结转移及远处转移与患者的预后无关，而喉癌患者的临床分期、临床分型及淋巴管密度与患者的预后密切相关。

3 讨论

淋巴管在人体生理过程中起着重要的作用，包括平衡体液内环境、脂肪吸收和免疫监视等，淋巴管缺陷可以导致机体各种病理状态的发生，相反，过度生长的淋巴管反而引发机体肿瘤的形成，近年来，众多的研究认为肿瘤淋巴管的形成与肿瘤转移密切相关。淋巴管形成是指在机体正常组织或病理过程中形成的毛细淋巴管，D2-40是最新研究发现的淋巴内皮特异性标志物，是一种分子量为40 KDa的一种小分子量糖蛋白[1]。2002年Kahn等[2]首次将D2-40用于标记淋巴管内皮细胞，认为D2-40可特异识别淋巴管内皮细胞，而与血管内皮细胞无任何反应。另有学者通过研究也证实了这个观点[3-4]。本研究结果表明D2-40在喉癌组织中的淋巴管密度明显高于喉状瘤和喉鳞状上皮不典型增生组织中淋巴管密度比较，差异有统计学意义（P < 0.05），而喉癌组织中淋巴管密度与转移的淋巴结组织中淋巴管密度比较，差异无统计学意义（P > 0.05），以上结果也证实了上述观点。

有学者以D2-40作为淋巴管内皮标志物，研究表明癌组织周围的淋巴管密度和直径相对于癌组织内部显著增高，转移淋巴结中癌组织密度高于无淋巴结转移的组织，进一步证实了肿瘤淋巴结转移与癌组织周围淋巴管密度密切相关[5]。

另外本研究也表明D2-40标记的淋巴管密度与喉癌患者的年龄、性别及临床分型无明显相关性比较，差异有统计学意义（P > 0.05），而与喉癌患者的组织分化程度、临床分期及淋巴结转移明显相关比较，差异有统计学意义（P < 0.05）。说明分化程度越低，分期越高，癌组织周围淋巴管密度越高，也说明了淋巴管生成在肿瘤生长中的作用，在喉癌淋巴转移中起到关键性的作用。有学者实验研究发现肿瘤及癌组织周围淋巴管的数量及密度与癌症发病部位及是否复发或转移无关，而与肿瘤的大小相关[6]。另有学者[7]也发现肿瘤组织内淋巴管密度与淋巴结转移、性别及病灶的数目等因素明显相关，而与肿瘤的复发无明显相关性。本研究通过淋巴管密度与患者预后的研究发现，癌组织淋巴管密度的高低与患者预后有明显的相关性，国内学者[8-11]研究也发现淋巴管密度比正常平均值升高者患者的生存时间明显缩短，淋巴管密度是影响喉癌患者预后的相对独立危险因素。

总之，淋巴管密度与喉癌患者的生存预后密切相关，在临床治疗上对淋巴管密度高的患者进行早期预防治疗，可以有效的提高患者的生存质量和时间。

[参考文献]

[1] Sherman CG，Jani P，Marks A，et al. D2-40 is expressed on the luminal surface of pulmonary airspaces in normal developing andlung but is lost in conditions associated with intra-alveolar infiltrates [J]. Pediatr Dev Pathol，2012，15（4）：259-264.

[2] Kahn HJ，Bailey D，Marks A，et al. Monoclonal Antibody D2-40，a New Marker of Lymphatic Endothelium，Reacts with Kaposi’s Sarcoma and a Subset of Angiosarcomas [J]. Mod Pathol，2002，15（4）：434-440.

[3] Wong SV，Haack H，Crowley D，et al. Tumor-secreted vascular endothelial growth factor-C is necessary for prostate cancer lymphangiogenesis，but lymphangiogenesis is unnecessary for lymph node metastasis [J]. Cancer Res，2005，65（21）：9789-9798.

[4] Franchi A，Gallo O，Massi D，et al.Tumor lymphangiogenesis in head and neck squamous cell carcinoma：a morphometric study with clinical correlations [J]. Cancer，2004，101（5）：973-978.

[5] Tammela T，Alitalo K. Lymphangiogenesis： Molecular mechanisms and future promise [J]. Cell，2010，140（4）：460-476.

[6] Zimmermann P，Dietrich T，Bock F，et al.Tumour-associated lymphangiogensis in conjunctival maligmant melaoma [J]. Br J Ophthalmol，2009，93：1529-1534.

[7] Algars A，Irjala H，Vaittinen S，et al. Type and location of tumor-infiltrating macrophages and lymphatic vessels predict survival of colorectal cancer patients [J]. Int J Cancer，2012，131（4）：864-873.

[8] 邹纪东，傅海燕，徐伟.喉癌组织中淋巴管生成与患者临床病理特征及预后的关系[J].中华肿瘤学杂志，2011，33（6）：461-464.

[9] 孟凡生，高珊，徐勤，等.Caspase-3蛋白在喉鳞癌组织中表达及与喉癌细胞凋亡的对比研究[J].临床和实验医学杂志，2013，12（4）：258-260.

[10] 陈闽琪.早期声门型喉癌术后的嗓音主观评价[J].临床和实验医学杂志，2013，12（4）：271-272.

[11] 孟凡生，高珊，马桂琴，等.喉鳞癌组织中bFGF蛋白的表达及临床意义[J].临床和实验医学杂志，2013，12（1）：32-33.

（收稿日期：2012-12-13 本文编辑：卫 轲）