花叶艳山姜试管苗生产技术研究

摘要 以花叶艳山姜种子为试材，用MS与不同激素配比的培养基，建立花叶艳山姜组培快繁体系。试验结果表明：外植体表面消毒以70%酒精预处理10 s，再用1 g/L的升汞浸泡5 min，消毒效果佳；种子接种在MS基本培养基上，12 d后萌芽；丛生芽在MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 0.1 mg/L的培养基上，增殖速度快，增殖倍数达4.3倍；芽苗在MS+NAA1.0 mg/L+1.0 mg/L活性炭的培养基上，生根效果较好，根系粗壮，生根率为94.5%；组培苗移栽在河沙∶腐质土∶椰糠（1∶1∶1）的混合基质中，成活率达92%，且植株生长良好。

关键词 花叶艳山姜；试管苗；种子；组培快繁

中图分类号 S682.36 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）19-0186-02

花叶艳山姜（Alpinia zerumbet cv.vaniegata），又称花叶良姜、彩叶姜、斑纹月桃等，是姜科山姜属的草本观叶植物。它叶姿挺拔潇洒，叶色香丽清晰；夏季花开时，花姿雅致，花香诱人，具有很高的观赏价值。它常以中小盆种植，摆放在客厅、办公室及厅堂过道等较明亮处，别具风趣。它给人生机盎然的感觉，适宜用在园林景观中。随着各式花园、别墅的日益增多，花叶艳山姜已成了在各种园林景观中经常见到的品种。近年在珠三角地区非常畅销这种花卉，由于它繁殖主要靠分株法，且生长期较长，所以滞后于市场的需要，常出现供不应求的情况。采用组培快繁方法，能在短时间内繁育大量种苗，但相关花叶艳山姜组培快繁的报道较少[1-3]。因此，花叶艳山姜试管苗生产技术研究在生产中具有重要的推广价值。

1 材料与方法

1.1 供试材料

供试材料为花叶艳山姜的种子。

1.2 试验方法

1.2.1 外植体的消毒。在超净工作台上，用干净的纱布将成熟种子包住，置于70%的酒精中消毒10 s，用无菌水清洗1次，然后用1 g/L的升汞浸泡5 min，无菌水冲洗5次，接种于诱导培养基上。

1.2.2 芽的增殖培养。切取顶芽为芽增殖材料，接种到不同浓度激素组合的培养基上进行芽的增殖诱导，每袋1 个芽，每个处理接种10 袋。30 d后观察并记录芽增殖情况。

1.2.3 生根培养。将已抽出的2～3 片叶、生长状况相对一致的无根苗接种于生根培养基并进行生根培养，每瓶为8株无根苗，每个处理接种为20瓶。培养30 d后，观察并记录生根情况。

1.2.4 试管苗的炼苗与移栽。生根培养30 d 后，植株根系长度1～3 cm时，放置于荫棚内炼苗15 d即可移栽。小苗从培养瓶取出后，用清水洗净附着在根上的培养基，移栽在不同比例的河沙、椰糠、腐质土混合基质中，淋足定根水，加盖薄膜保水保湿，置于遮荫率75%的荫棚内培养。30 d后统计植株成活率。

1.2.5 培养条件。培养基是MS基本培养根据不同试验目的来添加植物激素，附加30 g/L的食用白糖、8 g/L的卡拉胶，pH值5.8，培养温度为（26±2）℃，光照强度为1 500 lx，光照时间为10 h/d。

2 结果与分析

2.1 无菌苗的获得

将种子接种于诱导培养基（MS基本培养基），12 d后种子开始萌动（图1），切取小苗上端约1.0 cm长转入增殖培养基中，25 d左右可分化出3～4个丛芽，萌发出的新芽用解剖刀切分转入相同的培养基中进行增殖培养。

2.2 丛生芽的继代增殖

切取单个顶芽接种于4种不同增殖培养基上诱导芽增殖（表1），6-BA浓度在一定范围内（0～1.5 mg/L）芽的平均增殖倍数随6-BA浓度的增加而增高，芽体的生长状况欠佳，淡绿、细弱；当6-BA浓度为2.0 mg/L时，芽的平均增殖倍数最高，为4.3倍，芽体的生长状况浓绿、健壮（图2）；当6-BA浓度为3.0 mg/L时，芽的增殖倍数反而降低，芽体的生长状况较差，淡绿、较弱。结果表明，一定浓度的6-BA对芽的增殖起促进作用，高浓度6-BA对芽的增殖起抑制作用。因此，6-BA浓度以2.0 mg/L为最佳，故培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 0.1 mg/L为芽增殖最佳培养基。

2.3 生根培养

2.3.1 不同生长素对组培苗生根影响。将已抽出2～3片叶、生长状况相对一致的无根苗，接种于同一浓度（0.5 mg/L）不同生长素配制的生根培养基，进行比较试验。从植株平均生根条数、生根率、根长和表面直观情况比较，同一浓度（0.5 mg/L）的生长素对花叶艳山姜生根培养效果：NAA优于IBA、IAA。则花叶艳山姜生根培养选择生长素NAA为宜（表2）。

2.3.2 不同浓度NAA对组培苗生根影响。将已抽出2～3 片叶、生长状况相对一致的无根苗，接种在添加不同浓度NAA，均含1 mg/L活性炭生根培养基（表3）。结果表明：适宜浓度（0.5、1.0 mg/L）的NAA能促进种苗长根，根系发育良好、较粗壮。高浓度（1.5、2.0 mg/L）NAA对根系发育有抑制倾向，根基部膨大，营养失收，坏死。从平均生根率来看，NAA浓度为1.0 mg/L时，其生根率最高（图3），则花叶艳山姜生根培养基以MS+NAA 1.0 mg/L+活性炭1.0 mg/L为宜。

2.4 组培苗移栽

花叶艳山姜组培苗移栽在4种不同的基质中，21 d揭去覆盖的塑料薄膜，常规管理，移栽30 d后的成活情况见表4。

试验结果表明，花叶艳山姜对移栽基质要求苛刻。不同基质表现不尽相同，其中基质河沙∶腐质土∶椰糠=1∶1∶1表现最好，成活率为92%，其他基质成活率均达不到80%。基质河沙∶腐质土=1∶1混合而成，较易板结，通透性差，不利根系生长，故成活率较低。基质河沙∶腐质土∶椰糠=1∶1∶1的保水、保肥、通透性良好，故植株良好生长。因此，基质河沙∶腐质土∶椰糠=1∶1∶1是花叶艳山姜组培苗移栽理想基质（图4）。

3 结论与讨论

对外植体进行消毒获取无菌材料是组织培养的第一步，花叶艳山姜种子外壳光滑，易于消毒，但种子萌芽率较低，这可能是与艳山姜种子中存在着活性较高的内源抑制物质有关[4]。

6-BA是丛生芽增殖扩繁的关键，适宜的浓度（2.0 mg/L）对丛生芽增殖生长起促进作用，其增殖倍数最高，为4.3倍，且芽体健壮，叶色浓绿。NAA是一种生长素，能够促进生根[5]。适宜的浓度（1.0 mg/L）对山姜组培苗生根效果最好，生根率最高，为94.5%。生根培养用高浓度的NAA会使根基部有膨大现象，这种根系在移栽后无法吸收营养，植株不易成活。

试管苗繁殖的目的是要增加出苗率，其关键是从试管苗移栽后长成商品苗这一环节[6]。国内外市场上有种类多样的花卉栽培基质，但没有统一的产品标准，单一基质的某些缺点，在生产中可采用不同基质的混合得到解决。通过4种混合基质比较试验，小苗在基质河沙∶腐质土∶椰糠=1∶1∶1中成活率最高而且定植快，是花叶艳山姜组培苗移栽理想基质。

4 参考文献

[1] 赵秀芳.花叶艳山姜组培快繁技术的研究[J].中国农学通报，2004，20（6）：34-38.

[2] 胡玉姬，陈升振，羡蕴兰，等.花叶艳山姜的组织培养[J].植物生理学通讯，1990（4）：50-51.

[3] 潘梅，符瑞侃，王景飞，等.花叶艳山姜茎尖离体快繁技术[J].热带生物学报，2012（3）：267-270.

[4] 曾亚军，周仕林.植物激素对艳山姜种子发芽的影响[J].安徽农业科学，2009，37（26）：12485-12486.

[5] 谭文澄，戴策刚.观赏植物组织培养技[M].北京：中国林业出版社，1999.

[6] 冉懋雄.中药组织培养实用技术[M].北京：科学技术文献出版社，2004.