葫芦种子干热处理对黄瓜绿斑驳花叶病毒及发芽率的影响

摘 要：以葫芦种子为试验材料，针对黄瓜绿斑驳花叶病毒耐热的特性，设置多个温度梯度对葫芦种子进行干热处理，然后比较种子的发芽率，得出35-50-60℃、35-50-70℃、35-50-72℃处理的发芽率较高；结合发芽率与杀毒效果，选用35-50-72℃作为最佳处理温度，将此温度下处理的种子播种后取幼苗期真叶，ELISA检测不带黄瓜绿斑驳花叶病毒。因此，得出能有效降低黄瓜绿斑驳病毒致病力并且对种子损伤较小的种子干热处理条件为35-50-72℃。

关键词：葫芦；种子；干热处理；黄瓜绿斑驳花叶病毒；发芽率

中图分类号：S642.9；S477+.1 文献标识码：A 文章编号：1001-3547（2013）24-0050-02

黄瓜绿斑驳花叶病毒（cucumber green mottle mosaic virus，CGMMV）是烟草花叶病毒属葫芦科的重要病毒之一[1]，是一种典型的种传病毒，为害十分严重。该病毒所有的株系都极其稳定[2]，典型的CGMMV病毒株系的致死温度为90～100℃；体外保毒期长达119 d [3]。

应用干热处理方法能安全有效地对葫芦科、茄果类、十字花科等作物种子进行消毒 [4]。鉴于不同作物的生物学特性有所差异，对种子进行干热处理时，适宜的温度和时间也不尽相同。已有研究报道，用于杀灭种子带菌的干热处理一般为70～75℃处理3～5 d[5]。本试验以葫芦种子为试验材料，通过不同条件的干热处理后，检测并分析种子带毒情况和发芽率，进而筛选出葫芦种子干热处理的最适条件。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试葫芦品种为夜开花，种子采自农户发病田内植株。

1.2 试验设备

恒温恒湿干热处理器，恒温箱。

1.3 试验方法

试验共设6个处理，3次重复，每次重复种子数为1 000粒。处理条件：第一阶段设置温度35℃，处理24 h；第二阶段设置温度50℃，处理24 h；第三阶段设置温度分别为65，70，72，75，80，85℃，处理72 h。最后冷却24 h。

处理后的试验种子保存1周，然后催芽，1周后统计发芽率。取100粒出芽种子播种，控制适宜温湿度和光照，待葫芦苗长出真叶后，取样，用ELISA检测法检测葫芦真叶病毒情况。

2 结果与分析

由表1可见，不同的处理条件下，葫芦种子发芽率有差异，当干热处理温度为35-50-65℃、35-50-70℃和35-50-72℃时，葫芦种子发芽率较高。之后随着温度的升高，葫芦种子发芽率明显降低，温度越高，发芽率越低。所以，65，70，72℃都可能是较适宜的干热处理温度。但对于病毒本身来说，温度越高，杀毒越有利，种子的带毒性越小。所以，结合发芽率和杀毒条件，72℃为葫芦种子干热处理的最佳条件。

将在35-50-72℃条件下进行干热处理后的种子放置一周，让种子适当的恢复水分之后，进行催芽和播种，取葫芦苗的真叶进行病毒检测。

根据表2结果，葫芦种子病毒检测结果由干热处理前的阳性变为干热处理后的阴性，即处理后未检测到病毒。这证明葫芦真叶不带毒，35-50-72℃条件的干热处理对种子杀毒效果好。

3 讨论与小结

对于黄瓜绿斑驳花叶病毒，干热处理温度越高，杀毒效果越好。有报道称，在干热处理过程中75℃处理72 h可以使病毒完全失活，85℃处理24 h也可以得到同样的效果[6]。但是干热处理的温度条件对种子发芽率的影响较大[7]，处理温度过高会对种子造成较严重的伤害，进而影响发芽率，所以试验设置了65，80，72，75，80，85℃ 6个温度条件。通过试验可知，葫芦种子在65℃、70℃和72℃时受干热处理的损伤程度都较小，发芽率符合要求，即干热处理对种子发芽率的影响较小；结合干热处理对葫芦种子黄瓜绿斑驳花叶病毒的杀毒效果，在72℃时可以有效杀灭病毒。所以，选择35-50-72℃作为葫芦种子干热处理的最适温度条件。

参考文献

[1] 张永江.黄瓜绿斑驳花叶病毒研究进展[J].河南农业科学，2006（8）：9-12.

[2] 冯兰香，谢丙炎，杨宇红，等.检疫性黄瓜绿斑驳花叶病毒的检测和防疫控制[J].中国蔬菜，2007（9）：34-38.

[3] 吴鑫，丁元明，何月秋，等.检疫有害生物――黄瓜绿斑驳花叶病毒[J].现代农业科学，2009，16（2）：87-89.

[4] 宋顺华，郑晓鹰.干热灭菌处理技术――一种防治种传病害的有效方法[J].蔬菜，2008（10）：41.

[5] 李瑞云，杨琳，常华，等.不同温度干热处理对几种蔬菜种子萌发的影响[J].中国蔬菜，2011（16）：61-71.

[6] 蔡明，江冬，张丽英，等.黄瓜绿斑驳花叶病毒种子处理试验研究[J].植物检疫，2011，25（1）：62-63.

[7] Kim S M，Nam S H， Lee J M， et al. Destruction of cucumber green mottle mosaic virus by heat treatment and rapid detection of virus inactivation by RT-PCR[J]. Molecules and Cells， 2003， 16（2）： 338-342.

Effects of Dry Heat Treatments on CGMMV and Germination of Bottle Gourd Seeds

MA Kaihui， WANG Yuhong， YAN Leiyan， YING Quansheng， WANG Ying'er， ZHANG Huafeng

（ Ningbo Academy of Agricultural Sciences， Zhejiang 315040 ）

Abstract： In order to eliminate the heat-resistant cucumber green mottle mosaic virus （CGMMV） on bottle gourd seeds， we set six different dry heat treatments with different temperatures at the third stage and calculated their seed germination rates. The results showed that， the two dry heat treatments 35-50-70℃ and 35-50-72℃ had higher germination rate. Considering on germination rate and anti-virus effects， the 35-50-72℃ treatment was best， and the Elisa detection showed negative results on the euphylla of seedlings after being treated by the temperature combination. Therefore， the dry heat treatment 35-50-72℃ could make the cucumber green mottle mosaic virus inactive effectively and had no significant damage on bottle gourd seeds.

Key words： Bottle gourd； Seeds； Dry heat treatment； CGMMV； Germination rate

基金项目：国家西甜瓜产业技术体系（nycytx-36），宁波市瓜类砧木育种创新团队（2011B82020），宁波市农科院院长基金（2013）

马凯慧（1989-），女，本科，助理农艺师，主要研究方向植物病害，E-mail：

严蕾艳，女，通信作者，博士，助理研究员，主要研究方向为分子植物病理学，电话：0574-87929477，

E-mail：

收稿日期：2013-09-26