两种肺炎支原体特异性抗体IgM检测方法的比较

【摘要】目的 比较两种肺炎支原体特异性抗体IgM检测方法的临床诊断效果及应用价值。方法 将采集的疑似MP感染患者血清标本540份，分别进行酶联免疫法（ELISA）与免疫胶体金法（GIA）肺炎支原体特异性抗体IgM平行检测，具体检测方法、结果判断，均严格按照相应试剂盒说明书执行。结果 通过对两种血清学检测方法结果的比较，酶联免疫法（ELISA）在真阳性（TP）、假阳性（FP）、真阴性（TN）、假阴性（FN）等方面与免疫胶体金法（GIA）比较差异有统计学意义（P

【关键词】肺炎支原体；特异性抗体IgM；酶联免疫法（ELISA）；免疫胶体金法（GIA）

肺炎支原体（mycoplasma pneumoniae，MP）是一种能在无生命培养基上自行生长繁殖，介于病毒和细菌之间最小的不易染色的无细胞壁原核微生物[1]。通过飞沫以气溶胶微粒的形式传播，可引起肺炎支原体肺炎（MPP）。MPP约占各类肺炎总数的20%以上， 5～20岁年龄段的发病率较高，且一年四季均可发病。近年来，其感染发生率呈上升趋势。由于肺炎支原体感染的临床症状不明显，X射线征象缺乏特异性，临床常采用实验室血清学方法检查予以确诊。为了确保临床对肺炎支原体感染检测的及时准确，选用一种高灵敏、高特异性、快速、经济的方法显得尤为重要[2]。本文采用酶联免疫法（ELISA）与免疫胶体金法（GIA）对我院2011年10月至2012年8月540份疑似MP感染患者血清标本同时进行平行检测，并依据检测结果对两种方法的诊断效果及临床应用价值进行分析评估，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 实验仪器 科华ST-360全自动酶标仪，瑞美RW-1600自动洗板机。

1.2 标本来源 选自2011年10月至2012年9月乌兰察布市中心医院检验科采集的门诊及住院疑似MP感染患者血清标本540份。血清采集后，即置-20℃保存。

1.3 试剂 酶联免疫法（ELISA）采用上海沪尚生物科技有限公司生产的酶联免疫法测定抗肺炎支原体（IgM）试剂盒；免疫胶体金法（GIA）采用福建三明博峰生物科技有限公司生产的肺炎支原体IgM抗体检测试剂盒。

1.4 实验方法 ①先将采集的540份血清标本用被动颗粒凝集法（PPA）（采用利弗奥（香港）医药有限公司生产的赛乐迪亚MYCOII肺炎支原体抗体诊断试剂盒）结合CRP测定、血象分析及肺部X线检查进行定性检测。②将采集的疑似MP感染患者血清标本540份，分别进行酶联免疫法（ELISA）；及免疫胶体金法（GIA）肺炎支原体特异性抗体IgM平行检测，具体检测方法、结果判断，均严格按照相应试剂盒说明书执行。

1.5 统计学方法 采用SPSS13.0软件， 计数资料用χ2检验，以P

2 结果

2.1 血清属性测定结果 经上述综合检测分析，测定疑似MP感染患者血清标本540份，其中，MP阳性174份，阴性366份，将此次综合检测结果作为比对的参照标准。

2.2 两种血清学检测方法结果的比较 酶联免疫法（ELISA）在真阳性（TP）、假阳性（FP）、真阴性（TN）、假阴性（FN）等方面与免疫胶体金法（GIA）比较差异有统计学意义（P

2.3 两种血清学检测方法评价指标的比较 评价指标包括：假阳性率（FPR）、假阴性率（FNR）、敏感度（Sen）、特异度（Spe）、阳性似然比（+LR）、阴性似然比（-LR）、阳性预测值（PPV）、阴性预测值（NPV）、约登指数（Youden index）及总符合率（Coincidence rate）等10项，经对比检测结果表明，酶联免疫法（ELISA）在各项指标对比中优于免疫胶体金法（GIA）。见表2。

3 讨论

肺炎支原体（MP）是引起支原体肺炎的病原体，是介于细菌和病毒之间的具有厌氧性并能独立生存最小微生物。无细胞壁，含有DNA及RNA，通过飞沫以气溶胶微粒的形式传播。肺炎支原体侵入呼吸道后其表面膜上的P1蛋白质粘附于呼吸道上皮细胞表面，并伸出微管插入细胞内吸取营养、损伤细胞黏膜，继而释放出核酸酶、过氧化氢等代谢产物引起上皮细胞的溶解、肿胀直至坏死，而引起肺炎支原体肺炎（MPP）[3]。由于MP感染的临床表现及X线征象均缺乏特异性，只能通过实验室对病原体分离与培养、血清学检验及PCR技术等诊断方法进行确诊。实验室MP的分离培养的方法虽然可以作为临床确诊的依据，但标本分离操作复杂，并需要较长时间培养且阳性检出率低，不易作为临床快速诊断的方法[4]。PCR诊断技术检测的敏感度（Sen）、特异度（Spe）均高于其他方法，但费用相对较高，不适于基层医院开展。目前，MP的诊断主要依靠血清学检测IgM方法，而MP-IgM是机体被肺炎支原体感染后最早出现的抗体，选择一种能快速、高效检测MP-IgM的方法，有利于早期诊断[5]。本文采用酶联免疫法（ELISA）与免疫胶体金法（GIA）2种目前实验室检测MP-IgM常用的方法，对540份疑似MP感染患者血清标本同时进行平行检测，结果显示，2种方法都具有高敏感度、高特异度且操作简便，均可用于临床早期快速诊断MP，通过对2种检测方法10项评价指标的比较，ELISA法优于GIA法，2种方法联合应用可为临床提供更客观、更准确的检测结果，提高MP诊断符合率，以减少假阴性（漏诊率）和假阳性（误诊率）的危害。

参 考 文 献

[1] 杨雪梅，陈永权，顾德林.252例支原体肺炎血清抗体检测报道.临床肺科杂志，2009，14（12）：1580-1581.

[2] 俞善春，张宏侠，尹敢，等.三种血清学实验方法对肺炎支原体抗体检测的比较.国际检验医学杂志，2012，33（1）：85-86.

[3] 孔东辉，王辉，李荣利，等.两种肺炎支原体测定方法在临床诊断中的应用.检验医学与临床，2011，8（22）：2813-2814.

[4] 吴晓，郑颖，赵志钢，等.被动凝集法检测肺炎支原体抗体的实验室研究.中国卫生检验杂志，2009，19（12）：2886-2888.

[5] 熊伟，邹丽芬，赵心宇. 儿科呼吸道疾病中肺炎支原体感染的结果分析.中国微生态学杂志，2009，21（12）：1123-1124.