黄疸因素对免疫透射比浊法检测血清白蛋白的影响

[摘要] 目的 探讨免疫透射比浊法中黄疸对检测血清白蛋白结果的影响。 方法 将双份已知白蛋白浓度（低、高值）的血清中分别加入胆红素纯品，制成含不同胆红素浓度梯度的黄疸血清，再用免疫透射比浊法测定其白蛋白含量，比较分析黄疸因素对血清白蛋白检测的影响。 结果 普通黄疸（胆红素浓度低于400 umol/L）对白蛋白检测结果无显著性差异（P>0.05）。 结论 选用免疫透射比浊法检测血清白蛋白对黄疸的抗干扰能力较强。

[关键词]黄疸；免疫透射比浊法；白蛋白；抗干扰

[中图分类号] R446.11 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2013）12-122-02

在临床工作中，人血清中很多因素对生化检测结果存在干扰， 其中标本黄疸是临床生化检验中最常见的一种干扰和影响因素[1]。随着现代医学的快速发展，检验结果的准确性在诊疗中起着重要的作用，多数诊疗的决定是根据实验室检验结果做出的。近来有公司推出血清白蛋白免疫透射比浊法的商品化试剂，该试剂基于抗原抗体结合反应开发出来的，具有特异性强，稳定性好的优点，但其抗干扰能力目前尚无权威性的报告，国内临床普遍担心由于标本因素会给检测结果带来影响，以致现在这种新型免疫透射比浊法的商品化试剂还没有在临床上大规模使用。因此，本实验单就黄疸因素对免疫透射比浊法检测血清白蛋白的影响进行探讨。现报道如下。

1 仪器与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器 日立7180（日本）生化分析仪。

1.1.2 试剂及校准品 采用芬兰Orion Diagnostica公司产品，批号为67748。

1.1.3 质控品 低值、高值采用北京利德曼公司生产的质控液（低值208091G、高值205311E），中值采用北京豪迈公司生产的质控液（6872F）。

1.2 黄疸的血清标本的制备

取含低、高浓度白蛋白双份新鲜血清，白蛋白含量分别为35.50 g/L（低值白蛋白组）及51.08 g/L（高值白蛋白组），将胆红素纯品与上述双份新鲜血清制成含不同胆红素浓度梯度的黄疸血清，黄疸浓度依次为34.5 μmol/L，99.0 μmol/L，189.0 μmol/L，378 μmol/L，756 μmol/L。原低、高值白蛋白血清作为对照组标本。

1.3 原理

免疫透射比浊法是基于液相免疫沉淀反应原理的检测。将抗人白蛋白抗体加入到一定比例的样本和缓冲液中，抗体和样本中的白蛋白产生凝集反应，导致混合物浊度的增加，产生的浊度在340 nm波长处的吸光度与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准品比较，可计算血清白蛋白的浓度。

1.4 测定与分析

将仪器进行日常维护并调试到最佳状态。免疫透射比浊法用SPLINE方法检测，多点定标通过；再用质控品进行白蛋白检测质控，检测均理想在控。分别对两液不同胆红素浓度的血清进行双份白蛋白测定。

1.5 统计学处理

采用SPSS12统计软件进行统计分析，计量资料以（）表示，测定结果进行配对t检验。

2 结果

低值白蛋白组随胆红素浓度升高而所测白蛋白结果却无显著性差异（P1>0.05），同样高值白蛋白组白蛋白结果也不随胆红素浓度变化而呈显著性变化（P2>0.05）。如表1。

3 讨论

ALB由肝实质细胞合成，是血浆中含量最多的蛋白质，占总蛋白的40%～60%。对维持人体生理功能十分重要，不仅作为内源性氨基酸营养源；还具有相当强的酸碱缓冲能力；同时它也是血浆中很重要的载体，许多水溶性差的物质如胆红素、胆汁酸盐、前列腺素、类固醇激素、金属离子、多种药物等等，都是通过与白蛋白的结合被运输；帮助维持血液胶体渗透压；由于白蛋白分子量较小，它在血管外体液中的浓度经常被临床作为各种膜屏障完整性良好的指标。白蛋白也是群体调查时常用的指标，人群调查发现平均血清白蛋白水平低，往往与膳食蛋白摄入量不足有关，是孕妇孕期营养膳食指导提供借鉴的良好指标之一。对妊娠晚期的孕妇进行血清蛋白的监测，防止妊娠中毒症的发生，保证孕妇母子的健康，有一定的临床价值[2]。

因此，准确测定血清中白蛋白含量将给疾病的诊断、疗效观察及预后判断提供重要的参考依据[3]。目前溴甲酚绿（紫）染料结合法测定血清白蛋白仍是临床最广泛使用的方法，但该方法一直存在一定缺陷，根本原因是溴甲酚绿（紫）易与非白蛋白物质结合而影响检测结果[4-5]。免疫透射比浊法测白蛋白是最近外国公司推出的白蛋白检测新方法，国外正在推广使用，目前国内白蛋白这种检测方法的临床应用还并不普及，主要是担心该方法的可靠性。免疫透射比浊法是基于抗原抗体结合反应的原理开发出来的，因此具有较的强特异性[6]，另据芬兰Orion Diagnostica公司提供的资料，该商品试剂的稳定性很好，抗溶血及脂血的干扰能力也较为理想，同时本试验也显示黄疸因素对其影响也十分有限，756 μmol/L以下的胆红素基本对白蛋白的测定无影响，而且不同浓度的胆红素无论对低值白蛋白还是高值白蛋白的测定均无显著性干扰（P1>0.05；P2>0.05）。因此，选用免疫透射比浊法检测白蛋白时，普通黄疸（胆红素值

免疫透射比浊法血清白蛋白检测比较传统的溴甲酚绿（紫）染料结合法的特异性更好，抗干扰能力更强，尤其在抗黄疸因素干扰方面更出色，同时免疫透射比浊法对设备要求不高，操作简便，试剂稳定且成本适中，适合在各级医疗机构实验室开展。

[参考文献]

[1] 丛玉隆，张海鹏.血液学检验分析质量控制的重要因素[J].中华医学检验杂志，1998，1（21）：53.

[2] 金伟平.孕妇血清蛋白变化与妊娠水肿的关系[J].齐齐哈尔医学院学报，2008，4（29）：437.

[3] 冯志伟，冯朔，瞿幸华.忻州地区健康成人血清总蛋白、清蛋白及清蛋白/球蛋白比值的参考范围调查[J].国际检验医学杂志，2012，16（1）：1958-1959.

[4] 姚少羽，孙艳虹，高玲，等.两种方法测定血浆白蛋白的方法学比较[J].实用医学杂志，2004，2（4）：32-33.

[5] 忻鼎广，石娟娟，等.溴甲酚类试剂在测定肾病综合征和血液透析患者血清白蛋白时的偏差[J].检验医学，2006：3（21）：231-233.

[6] 彭凤，应春妹，徐晓萍，等.免疫透射比浊法与免疫散射比浊法检测特定蛋白的比较研究[J].现代检验医学杂志，2011，26（1）：45-47.

（收稿日期：2013-04-17）