半夏―夏枯草配伍对葫芦巴碱、尿嘧啶、腺苷煎出量的影响

摘要：目的 研究半夏-夏枯草不同比例配伍对葫芦巴碱、尿嘧啶及腺苷煎出量的影响，探索其变化规律及合理配伍。方法 采用高效液相色谱法同时测定半夏和夏枯草不同比例配伍时葫芦巴碱、尿嘧啶及腺苷的煎出量，并通过比较分析不同配伍比例对3种成分煎出量的影响。结果 半夏配伍夏枯草，尿嘧啶及腺苷煎出量增加，葫芦巴碱在两者配伍情况下煎出量减少。结论 半夏-夏枯草不同配伍对葫芦巴碱、尿嘧啶、腺苷煎出量有一定影响，最佳配伍比例值得深入研究。

关键词：半夏；夏枯草；中药配伍；葫芦巴碱；尿嘧啶；腺苷

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.05.022

中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2014）05-0071-03

枯草Prunella vulgaris L.的干燥果穗，可用于治疗头痛眩晕、目赤肿痛等症[1]263。由半夏、夏枯草组成的双夏汤复方为治疗失眠古方，最早见于《重订灵兰要览》，有镇静安眠功效[2]。两者配伍符合阴阳自和的用药理论，采用该药治疗失眠症取得了满意效果，但该药对配伍比例用法却报道不一[3-6]，故需对其最佳配伍进行研究。生物碱为半夏中主要有效成分，现代药理研究表明，葫芦巴碱具有较强的抗肿瘤、降血糖作用[7]；核苷类成分如腺苷、尿嘧啶是生物细胞维持生命活动的基本组成元素，参与DNA代谢过程，具有抗肿瘤、抗病毒、基因治疗等多种生物活性[8]。本研究采用高效液相色谱法（HPLC）对葫芦巴碱、尿嘧啶、腺苷3种化学成分的煎出量进行定量测定，并对其变化规律进行总结，为该药对的最佳配伍研究提供参考。

1 仪器与试药

Agilent 1100 高效液相色谱仪，KQ 5200型数据超声清洗器，AE 240型天平，G16型医用离心机。

葫芦巴碱对照品（批号110883-200502），购于中国食品药品检定研究院，尿嘧啶（批号LDA0M42）、腺苷对照品（批号L220M70）均购于J&K scientific LTD。乙腈为色谱纯，水为纯净水，其他试剂均为分析纯。

夏枯草为唇形科植物夏枯草Prunella vulgaris L.的干燥果穗，批号002256374638。半夏为天南星科植物半夏Pinellia ternata （Thunb.） Breit.的干燥块茎，本研究所用为法半夏，批号310039125308。上述药材均购于安国东方药城中药材有限公司，并由北京市药品检验所常增荣主任药师鉴定为正品。

2 方法与结果

2.1 药材供试品溶液的制备

取法半夏，粉碎，过40目筛，取粉末4 g精密称定，精密加入水50 mL，加热回流0.5 h，补足减失的质量，离心（10 000 r/min）5 min，精密量取上清液5 mL，置50 mL量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，静置10 min，离心（10 000 r/min）5 min，精密量取上清液25 mL，蒸干，加流动相使溶解并定容至10 mL量瓶中，摇匀，0.45 ?m微孔滤膜滤过，即得半夏药材供试品溶液。取夏枯草，同法制备，即得夏枯草药材供试品溶液。

2.2 半夏-夏枯草不同配伍比例供试品溶液的制备

分别取半夏-夏枯草比例为2∶1、1.5∶1、1.2∶1、1∶1、1∶1.5、1∶2的药粉4 g，精密称定，按“2.1”项下方法同法制备。

2.3 混合对照品溶液的制备

取葫芦巴碱、尿嘧啶、腺苷对照品适量，精密称定，加流动相制成含葫芦巴碱0.436 ?g/mL、尿嘧啶5.04 ?g/mL、腺苷2.984 ?g/mL的混合对照品溶液。

2.4 色谱条件

色谱柱：Welch Ultimate AQ-C18（5 ?m，4.6 mm×250 mm）；流速：1.0 mL/min；检测波长：265 nm；柱温：25 ℃；以乙腈（A）-水（B）为流动相，梯度洗脱（0～5～15～25～35 min，A为0.5%～0.7%～0.7%～90%～0.5%）。混合对照品溶液及半夏药材、夏枯草药材供试品溶液色谱图见图1。