不同检验方法对慢性肝病的检验结果分析

[摘要] 目的 分析不同检验方法对慢性肝病的检验结果。方法 对我院2011年2月至2011年11月间收治的85例HBsAg、HBeAb双阳性慢性肝病患者进行PCR定量检测、血清HA检测、HBsAg-ELISA检测。结果 PCR定量检测、血清HA检测、HBsAg-ELISA检测的检出率分别为95.29%、70.59%和49.41%，PCR定量检测的检出率明显高于血清HA检测及HBsAg-ELISA法，差异具有统计学意义(P

[关键词] 慢性肝病； PCR定量检测； 血清HA检测； HBsAg-ELISA检测

[中图分类号] R575 [文献标识码] B [文章编号] 1005-0515（2012）-02-205-01

在我国，慢性肝病的发病率居传染性疾病的首位，严重危害了人民群众的身体健康。而对临床治疗慢性肝病以及进行预后评估而言，实验室诊断结果发挥了至关重要的作用。通过实验室检测结果可以直接判断HBV病毒的复制程度、监测抗病毒治疗的效果。为了准确判断乙肝患者的病毒感染复制情况，降低临床漏诊率，本文对我院2011年2月至2011年11月收治的85例HBsAg、HBeAb双阳性慢性肝病患者进行三种不同检测方法的检测结果比较，以寻找最佳的检测方法，现将结果报告如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择我院2011年2月至2011年11月收治的85例HBsAg、HBeAb双阳性慢性肝病患者，其中，男性51例，女性34例，年龄21-67岁，平均年龄38.2岁。慢性肝病的诊断符合《病毒性肝炎防治方案》。入择患者均为HBV单独感染患者，且排除了免疫耐受状态下的HBV感染者。

1.2 方法 PCR定量检测为实时荧光定量检测，具体操作过程包括模板提取、反应体系配置、PCR扩增以及结果分析过程。核酸模板提取过程为，首先分别取100μl检测样本、阳性对照及阴性对照，各加入试剂A100μl，在震荡仪上混匀10s，后使用离心机，选择8000g/min的离心力将样本离心15min，弃去样本上清。继而，加入试剂B25μl，在震荡仪上混匀10s，置于100℃水浴锅内加热10min，后使用离心机，选择8000g/min的离心力将样本离心3min。所得样本备用，样本必须在1h内使用。反应体系配置过程为，首先根据待检样本的数量准备试剂，取36μl HBV-cccDNA反应液、6μl MgCl2+、6μl荧光探针、4μl Taq酶加入同一离心管中，在震荡仪上混匀10s，将离心管低速离心后进行分装，按每管体积为26μl。然后将带测样本与校准品分别取4μl加入反应管中，混匀后放入荧光定量PCR仪进行PCR反应。PCR检测程序为50℃1min，95℃5min进行预变性，循环条件为93℃30s，60℃60s循环次数设置为40次。最后进行结果判断，D值小于38即判断为阳性。HBeAg-ELISA检测方法采用全自动酶标仪测定方法。血清HA测定采用上海海研所实际盒，按说明书进行检测。将血清HA≥120μg/L即为异常值。

1.3 统计学方法 运用统计学软件对数据进行处理，计数资料采用卡方检验，P

2 结果 对我院2011年2月至2011年11月间收治的85例HBsAg、HBeAb双阳性慢性肝病患者进行PCR定量检测、血清HA检测、HBsAg-ELISA检测的检出率分别为95.29%、70.59%和49.41%。PCR定量检测的检出率明显高于血清HA检测及HBsAg-ELISA法，差异具有统计学意义(P

表1 三种检验方法检测慢性肝病结果比较

*与血清HA检测、HBsAg-ELISA检测相比，P

3 讨论 在我国，慢性肝病的发病率居传染性疾病的首位，严重危害了人民群众的身体健康。因此，尽早发现HBV病毒携带者并且预防HBV病毒在人群中传播是一项非常重要的工作。临床研究显示HBeAg与HA关系十分密切，HBeAg阳性与HA异常成正比关系。但在临床检验过程中，其在慢性肝病中的检出率却往往不高。而临床检验常采用的HBeAg-ELISA检测可以检出低浓度的HBeAg阳性患者[1]。对乙型肝炎患者而言，隐性以及低浓度HBeAg的乙肝病毒感染的检出是防止漏检率发生的关键[2]。

近年来，医学人员运用分子生物学诊断技术对肝脏疾病进行诊断。PCR技术，即聚合酶链反应技术，是体外扩增特定DN段的一种快速的检测方法，常与凝胶电泳联合使用。目前，PCR技术的应用范围十分广泛，具有快速、准确的优点。PCR的基本原理为依靠加热变性使双链DNA形成单链，作为反映体系中的DNA模板；然后降低温度，使引物与模板上DNA互补序列退火。继而再次升高温度，使DNA延伸合成。依次重复变性-退火-延伸的过程，每次循环后，目标DNA即扩增一倍。PCR结束后可采用凝胶电泳、比色等方法对PCR产物进行测定。本文研究结果显示，对我院85例HBsAg、HBeAb双阳性慢性肝病患者进行PCR定量检测、血清HA检测、HBsAg-ELISA检测的检出率分别为95.29%、70.59%和49.41%。PCR定量检测的检出率明显高于血清HA检测及HBsAg-ELISA法，差异具有统计学意义(P

参考文献

[1] 陈靖,朱月永.血清胆碱酯酶和总胆酸与慢性乙型肝炎患者肝脏病理损害的关系探讨[J].实用肝脏病杂志,2008,11(2):87.

[2] 刘晓华.总胆汁酸检测在病毒性肝炎中的意义[J].齐齐哈尔医学院学报,2008,9(7):825.