B淋巴细胞刺激因子在直肠癌患者外周血CD19+B细胞上的表达及其意义

(1.青岛大学医学院2006级研究生 山东青岛 266003；2.山东省泰安市中心医院 山东泰安 271000)

［摘 要］ 目的探讨直肠癌患者术前、术后外周血中B淋巴细胞刺激因子（BAFF）的表达特点及其与临床病理特征的关系。方法利用流式细胞仪检测每一例患者外周血，以CELLQuest软件分析获取CD19+B细胞，检测BAFF的阳性表达率。比较40例直肠癌患者与40名正常人外周血CD19+B细胞上BAFF的表达情况；比较直肠癌患者术前、术后外周血CD19+B细胞上BAFF表达阳性率变化。结果直肠癌患者外周血CD19+B细胞上BAFF阳性表达率与正常人比较，正常对照组外周血CD19+B细胞上BAFF阳性表达率比患者组高，差异有统计学意义（P＜0.01）；术前与术后比较，直肠癌患者术后组外周血CD19+B细胞上BAFF阳性表达率比术前组高，差异有统计学意义（P＜0.01）。结论直肠癌的发生与BAFF表达密切相关，BAFF在直肠癌患者术前、术后外周血CD19+B细胞上BAFF表达阳性率变化对直肠癌的治疗选择具有指导价值。

［关键词］直肠癌；B淋巴细胞刺激因子；流式细胞术

［中图分类号］ R735.3+7［文献标识码］ A［文章编号］ 1672-4208(2008)21-0013-02

直肠癌是胃肠道中常见的恶性肿瘤，发病率仅次于胃和食道癌，是大肠癌中最常见的（占65%左右）。绝大多数病人在40岁以上。直肠癌是一种生活方式病。有研究表明，B淋巴细胞刺激因子（BAFF）可抑制多种肿瘤细胞系的生长，其对肿瘤细胞的抑制作用与其诱导细胞毒作用和促进Caspase 23活化有关。近几年来，直肠癌的发病率逐渐升高，在此我们运用流式细胞术方法研究探讨BAFF在直肠癌患者术前、术后外周血中的表达特点及其与临床病理特征的关系。

1 材料与方法

1.1 一般资料 收集山东省泰安市中心医院2007年10月～2008年4月行直肠癌根治术的直肠癌患者术前、术后外周血标本各40例，所有患者术前均未行抗肿瘤治疗。其中，男性22例，女性18例，年龄45～77岁。分化程度：高分化20例，中分化10例，低分化10例。癌转移情况：伴淋巴转移28例，无转移12例。全部病例均行手术、病理证实。正常对照组40例血标本抽自我院健康查体者，经结肠镜取材并经病理证实无肠道疾病。其中男性22例，女性18例，年龄45～75岁。

1.2 检测材料与方法 鼠抗人CD19及BAFF单克隆抗体、溶血素、Falcon管均购自美国BD公司。术前2d及术后7d清晨空腹分别抽取肘静脉血2 ml，置EDTA抗凝无菌试管中，做流式检测BAFF表达情况。流式细胞仪检测结果，以CELLQuest软件获取细胞，设立同型阴性对照，调整电压，设立淋巴细胞门，检测淋巴细胞数量和CD19+B细胞上BAFF阳性表达率。

1.3 统计学处理 以SAS 9.0统计软件对实验结果进行统计学分析。比较直肠癌患者与正常人外周血CD19+B细胞上BAFF的表达情况；比较直肠癌患者术前、术后外周血CD19+B细胞上BAFF的表达阳性率变化。分析直肠癌患者外周血CD19+B细胞上BAFF的表达情况与直肠癌肿瘤的大小、肿瘤分化程度、性别、淋巴结转移的相关性。

2 结果

2.1 患者组与对照组BAFF阳性表达率比较 正常对照组外周血CD19+B细胞上BAFF阳性表达率比直肠癌患者组高，差异有统计学意义（P＜0.01）。术前组与术后组比较，术后组外周血CD19+B细胞上BAFF阳性表达率比术前组高，差异有统计学意义（P＜0.01）。见表1。

表1 直肠癌患者组与对照组BAFF阳性表达率比较

注：*与术后组比较，t=9.84，P＜0.01；**与术前、术后组比较，t=19.2，t=9.55，P＜0.01。

2.2 BAFF表达与直肠癌患者临床病理特征的关系 不同分化程度直肠癌患者外周血CD19+B细胞上BAFF的表达结果见表2。有无淋巴结转移直肠癌患者外周血CD19+B细胞上BAFF的表达结果见表3。肿瘤大小与BAFF表达的关系见表4。表2 不同分化程度直肠癌患者术前BAFF阳性表达率比较

注：*与中分化比较，t=4.93，P＜0.01；**与低分化比较，t=4.11，P＜0.01。

表3 有无淋巴结转移直肠癌患者术前BAFF阳性表达率比较

注：与无淋巴结转移比较，t=1.83，P＞0.05。

表4 肿瘤大小与患者术前BAFF表达的关系

注：*与＞4 cm比较，t=0.52，P＞0.05。

3 讨论

BAFF是1999年发现的肿瘤坏死因子超家族的新成员。BAFF及其受体作为体内重要的免疫调控因子，对于机体免疫应答，特别是体液免疫起着重要的平衡作用，其缺陷或过量表达均能引起机体免疫失衡，从而诱发多种疾病[1-2]。BAFF mRNA主要表达在外周血单个核细胞、巨噬细胞、树突状细胞（DC）和G-CSF与干扰素（IFN）-γ刺激后的嗜中性粒细胞表面及脾、淋巴结、骨髓[3]。研究表明，BA FF缺乏与免疫功能低下有关。在BA FF缺陷小鼠，外周B淋巴细胞显著减少，成熟滤泡型和边缘带脾细胞几乎完全缺失，剩余的B淋巴细胞大多与T1过渡型B细胞类似，即将发育为B细胞的带有T2表型的细胞几乎完全缺失，同时能够再循环的成熟B细胞群消失。由此可见，BAFF缺乏无疑可导致免疫功能(特别是体液免疫功能)低下[4]。

本实验利用流式细胞仪检测40例直肠癌患者术前、术后外周血CD19+B细胞上BAFF表达阳性率，并与正常人对照比较。对实验结果进行综合分析提示，BAFF对于直肠癌发生发展具有重要的作用，直肠癌BAFF的阳性表达与性别、手术时肿瘤大小、淋巴结转移比较，差异无统计学意义，但与直肠癌的分化程度密切相关；BAFF表达随着直肠癌细胞的分化程度的上升而下降，这与夏军强等[5]实验结果一致。BAFF的缺失所致的免疫失衡可能与肿瘤的发生存在密切关联。BAFF检测对于手术方案的选择及术后针对BAFF及其受体选择新的治疗靶点均有指导价值。

参 考 文 献

[1] Shan X, Chen L, Cao M, et al. Effects of human soluble BAFF synthesized in Escheri'chia coli on Clk4' and CD8' f lymphocytes as well as NK cells in mice[J]. Physiol Res,2006,55(3):301-307. [2]Gorelik L, Cutler AH, Thill G, et al. BAH' regulates CDZ 1/35 and CD23 expression independent of its B cell survival function[J]. J Immunol, 2004,172(2):762-766.

[3] Biedler JL. Genetic aspects of multidrug resistance[J].Cancer,1992,70(6suppl):1799-1809.

[4] Flens MJ, Zaman GJR, Valk PVD, et al. Tissue distribution of the multidrug resistance protein[J]. Am J Pathel,1996,148(4):1237-1247.

[5]夏军强,拉莱苏祖克,陈晓,等.BAFF、MRP和PD- L2在结肠癌中的表达及其意义研究[J].河北职工医学院学报,2008,25(2):12-14.

（收稿日期：2008-08-08）