清热解毒药配伍桔梗汤对急性肺损伤模型治疗作用的实验观察

摘 要：目的：探讨清热解毒中药配伍桔梗汤对内毒素致急性肺损伤模型大鼠的治疗效果。方法：雄性SD大鼠按随机数字表法分为生理盐水组、ALI模型组、清热解毒药组、清热解毒药+桔梗汤组。股静脉注射内毒素脂多糖（LPS）制备ALI大鼠模型，观察各组大鼠肺系数、肺含水量、肺组织MPO含量及病理形态学变化。结果：与生理盐水组相比，ALI模型组大鼠肺系数、肺含水量、肺组织MPO含量均明显升高（P

关键词：桔梗汤；急性肺损伤；清热解毒；抗炎增效

中图分类号：R285.5文献标识码：A

文章编号：1673-7717(2008)05-0944-03

Experimental Study about Synergistic Action of Platycodon Root Decoction on Antiinflammatory Effect of

Heatclearing and Detoxicating Herbs

ZHENG Fengjie, LI Yuhang,WANG Qingguo, XU Hong, LI Lina, CAI Dayong, LI Pengying

(Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029，China

)

Abstract:Objective:To explore the Synergistic Action of platycodon root Decoction on the Heatclearing and Detoxicating herbs to treat acute lung injury rats induced by lipopolysaccharide. Methods:The male SD rats were randomly divided into four goups: nomal group, ALI group, Heatclearing andDetoxicating herbs group and Heatclearing andDetoxicating herbs added with platycodon root Decoction group. LPS was injected into the femoral vein of rats to prepare ALI models. Macroscopic and histopathological exams were performed and biological indexes including lung wet weight/dry weight, pulmonary coefficient, pulmo water content and MPO activity of lung homogenate. Results:Lung histopathological examination showed the PMNs infiltration, micrangium engorgement, edemaand hemorrhage were more prominent in the in the ALI group than that in the normal group. Lung wet weight/dry weight, pulmonary coefficient, pulmo water content and MPO activity of lung homogenate were significantly increased (P

Keywords:platycodon root Decoction；acute lung injury；Heatclearing and Detoxicating；synergistic effect

急性肺损伤（acute lung injury, ALI）是临床常见疑难病，其发病机理错综复杂，迄今尚未完全阐明，亦无满意的治疗措施[1]。近年来，许多学者结合现代医学对ALI发病机制的研究新进展，采用辨病与辨证相结合，从热毒论治ALI，显示出良好前景[2-3]。本研究通过建立ALI大鼠模型，模拟其临床发病进程，在应用传统清热解毒中药治疗的基础上，配伍经方桔梗汤，观察ALI大鼠肺系数、肺含水量、肺组织髓过氧化物酶（MPO）含量及病理形态学变化，探讨桔梗汤对清热解毒中药的抗炎增效作用，为临床应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1动物

健康SpragueDawley大鼠，雄性、体重（200±10）g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SCXK（京）20020003。

1.2药物与试剂

清热解毒组（由黄芩、栀子等组成），清热解毒药+桔梗汤组（由黄芩、栀子、桔梗、生甘草等组成）。所用中药材均购自北京同仁堂医药药材公司，由北京中医药大学中药教研室鉴定均为正品。生药剂量比例，据文献[4]换算，依照人体单位生药量求得大鼠单位体重生药量，并扩大10倍，制成浓度为1g（生药）/mL的溶液，4℃冰箱保存备用。LPS购自SIGMA公司；MPO检测试剂盒购自南京建成生物有限公司。

1.3主要仪器

精密电子天平(1/10000)、DY89F型电动匀浆机、5417R型低温台式离心机、37℃恒温箱、微量加样器、SAFIRE2型TECAN全波长酶标仪等。

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1.4模型制作及分组 给药

按随机数字表法，将大鼠随机分为4组：生理盐水组（9只），每天灌服等体积生理盐水6天，第7天，股静脉注射等量生理盐水；ALI模型组（27只），每天灌服与其他组相应量的生理盐水，清热解毒组（27只）、清热解毒+祛梗汤组（27只）分别提前灌服相应中药6天，第7天，采用一次性股静脉注射LPS（4.9mg/kg）复制大鼠ALI模型。除生理盐水组外，分别于注射LPS后2、4、6h时相腹主动脉取血处死大鼠，每时相9只。

1.5指标检测与方法

1.5.1肺组织病理形态学

用10%水合氯醛4mL/kg予大鼠深度麻醉后，每组取3只，用4%多聚甲醛经左心室灌注固定，取右肺下叶继续固定16~18h，常规石蜡包埋，连续作5μm厚切片，HE染色，中性树脂封片，光镜观察。

1.5.2肺系数 W/D 肺含水量等测定

各时相其余6只大鼠，腹主动脉取血处死，开胸取肺，冰生理盐水冲洗后，用滤纸吸去表面残余液体，称重并记录。取左肺称重后放入烤箱80℃烘烤48h至恒重，计算肺湿重（Wet weight）和干重（Dry weight）。比值即W/D值；肺系数＝肺湿重/体重×100%；肺水含量（百分比）=（肺湿重-肺干重）×100/肺湿重。

1.5.3肺组织匀浆MPO含量检测

取大鼠右肺下叶，用生理盐水制成20%组织匀浆，采用生化法测定MPO含量。采用每克肺组织酶活性单位表示，1个酶单位表示1min内吸光度（OD）增高1的酶量。严格按照说明书操作。

1.6统计学方法

采用SPSS11.5软件包分析统计，所有数据均采用均数±标准差（±s）表示，多组均数采用单因素方差分析，组

间两两比较用LSD检验；P

2 结 果

2.1 肺组织肉眼形态学观察

生理盐水组大鼠肺呈粉红色，表面光滑，切面可见组织

细腻，无渗出、充血。LPS损伤后2h，肺体积稍大；4h体积进一步增大，双肺散在斑点状新鲜出血区；6h胸腔内有粉红色胸水，肺组织呈暗红色。与同时相模型组相比，2、6h时相各中药干预组大鼠大体观未有显著变化，但4h时相胸腔内粉红色胸水明显减少，出血点范围缩小。

2.2肺组织光镜形态学观察

如图1所示：生理盐水组肺泡结构完整，未见异常。ALI模型组肺泡壁增宽，有大量中性粒细胞浸润，毛细血管充血、水肿及出血；清热解毒组肺泡壁亦增宽，中性粒细胞中度浸润伴红细胞渗出；清热解毒药+桔梗汤组：肺泡壁增宽不明显，有少量中性粒细胞浸润，毛细血管未见明显充血、水肿。

2.3肺系数湿重/干重（W/D）及肺含水量（百分比）的测定

结果见表1。与生理盐水组相比，各时相ALI模型组大鼠肺系数、W/D值及肺含水百分比均明显升高（P

2.4肺组织匀浆MPO含量的测定

结果见表2。与生理盐水组相比，各时相模型组大鼠肺组织匀浆MPO含量均明显升高（P

3 讨 论

由感染、创伤等所致的ALI是临床常见病、多发病，该病以弥漫性肺细胞损伤为基础，以肺水肿和肺不张为病理特征，以中性粒细胞（PMNs）在肺内大量“扣押”为局部炎症反应的特征性标志[5-6]。研究证实，PMNs于肺内“扣押”所介导的肺血管内皮细胞、肺泡上皮细胞广泛损伤是肺水肿及肺微血栓形成的关键所在[7]。而MPO作为PMNs的标志物，其水平是反应组织PMNs浸润程度的定量指标[8-10]。

目前，现代医学多采用控制感染、治疗并发症及机械通气治疗ALI，但其病死率仍高达50%左右[11]。近10年来，中医药工作者从“肺热证”、“喘证”等角度阐释了ALI的中医学发病机制并广泛应用清热解毒类方药（如双黄连注射液、鱼腥草注射液及清开灵注射液等）进行防治，明显改善了肺通气换气功能[2,12]。但大剂量使用清热解毒药，往往会导致脾胃虚寒，预后不良。故从中药方剂配伍理论出发，探寻具有增效减毒作用的配伍组合，具有现实意义。桔梗汤出自《伤寒杂病论》，具有宣肺开结、排脓解毒之功效。临床上常与清热解毒类药物配伍治疗咽喉部炎症及肺部疾病如肺脓肿、大叶性肺炎、慢性支气管炎等[13-14]。

本实验结果表明，各时相模型组大鼠肺系数、W/D值、肺含水量及肺组织匀浆MPO含量均明显高于生理盐水组，且随时间延长，有加重趋势；肺组织病理形态学显示：肺泡壁增宽，肺泡结构破坏或消失，弥漫性肺泡充血、水肿，大量PMNs浸润；中药干预后肺组织病变明显减轻，各生物学指标及肺组织MPO水平也相应下降（P

参考文献

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注：“本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。”

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