盆景灵芝不同杂交菌株在不同培养基上菌丝生长情况研究初报

摘 要：通过5个不同盆景灵芝菌株在不同培养基上的比较试验，结果表明，菌丝萌发速度和生物学效率差别明显，灵芝3号菌株菌丝生长较快，产量最高，珊瑚灵芝次之。5个菌株中以灵芝3号、珊瑚灵芝菌丝生活力、生长势以及抗杂力等方面具有一定的优势，适合固体菌种袋料栽培。3个培养基中以复壮培养基中菌丝生长旺盛，以加富培养基中菌丝生物量最高。

关键词：盆景灵芝菌株；不同培养基；比较研究

中图分类号：S567.31 文献标识码：A

灵芝又称灵芝草，属担子菌纲多孔菌科（Polyporaceae），灵芝属（Ganodelma）真菌赤芝G.lucidum・karst和G.japonicrn L loyd的总称。灵芝不仅具有特殊的药用功能，而且形态奇特，色彩绚丽，自古至今被誉为吉祥的象征，根据灵芝生长的特点，可以把灵芝制作盆景，以供观赏。

灵芝属中温偏高型食用兼药用真菌之一，菌丝生长范围8～35℃，适宜温度26～28℃，在子实体生长阶段，温度生长范围20～30℃，适宜温度26～28℃。为了探索灵芝不同杂交菌株在不同培养基上菌丝的生长发育情况，为盆景灵芝不同培养基试管制种的推广应用提供理论依据。本研究以5个盆景灵芝杂交菌株在3种不同培养基上进行制种和袋料栽培，现将结果总结如下：

1 试验材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试菌株

灵芝1号、灵芝2号、灵芝3号、宁阳灵芝、珊瑚灵芝，均由山东省寿光市食用菌研究所提供。

1.1.2 试管培养基制备

3种不同试管种培养基配方见表1。

表1 3种不同培养基配方

1.1.3 栽培袋配方

棉籽壳30%、锯末19%、玉米芯19%、麸皮20%、豆壳5%、玉米粉5%、含水量55%～60%。

1.2 试验方法

1.2.1 试管分离

在单位实验室的超净工作台上无菌操作，将不同的盆景灵芝菌株分别接入3种不同的斜面培养基上，试验设3次重复，每5支试管为1个重复，在（25+1）℃的条件下培养，每2d观察1次菌丝生长情况。试管培养基设计如下表2。

表2 试管培养基设计 （单位：支）

1.2.2 接种

栽培袋采用的规格为30cm×10cm×0.045cm，每袋装干料0.5kg，用卧式大型高压锅灭菌，在陕西秦川科技开发公司进行，冷却至30℃，实验室无菌条件下接种。

1.2.3 培养菌丝

接种后置24～28℃条件下培养，每处理5袋。菌丝开始萌发时，用直尺测量菌丝爬袋壁的长度，每2d调查1次菌丝生长情况，调查并淘汰污染袋。

1.2.4 覆土栽培

栽培袋菌丝长满后，在长安区韦曲街办四府村示范园内，采用日光温室覆土栽培，每1.4m一个种植带，畦面宽0.8m，底宽1.0m高0.4m，走道0.4m，株距×行距为0.3×0.3m，每667m2栽植密度为6000袋。

2 生产流程

2.1 引种

5月10日引进新品种：灵芝1号、灵芝2号、灵芝3号、宁阳灵芝、珊瑚灵芝。均由山东省食用菌研究所提供试管纯母钟。

2.2 试管种分离

6月18日制作复壮、加富及完全培养基；6月20日进行纯母种分离，每一个灵芝品种接种45支，每5支作为1个处理，每处理重复3次，同一温度下培养。试验共设15个处理，3次重复。

2.3 栽培袋接种

长满菌丝的试管放在医用冰箱中保存，待全部试管菌丝长满后于7月11日栽培袋接种，1个试管接3袋，剩余菌种继续保存，每个灵芝品种接种45袋，每5袋作为1个处理，每处理重复3次，同一温度下培养。

2.4 覆土栽培

8月15日～9月5日覆土。

棚内进行统一管理，通风控温、浇水保湿，使棚内湿度控制在80%～90%，芝面喷肥氨基酸肥，覆土后20d套筒（高40cm，直径25cm），以棚内二氧化碳浓度大小调节芝柄长短，灵芝进入覆土栽培管理期。

9月15日～11月5日为采收期。

3 结果与分析

3.1 不同品种同一培养基菌丝生长量及生物量的测定

将5个不同的菌株接入不同配方的固体斜面培养基上，每试管装12mL培养液，每5个试管为1个处理，每个处理重复3次，培养期间，每2d调查1次菌丝生长量，培养结束后，测定不同灵芝菌株之间菌丝体的生物重量，其结果见表3～表5。

5种灵芝杂交菌株在复壮培养基上的生长情况见表3。

表3 5种灵芝杂交菌株在复壮培养基上菌丝爬壁情况及生物量调查

以日期为横坐标，生长量为竖坐标，作曲线图如图1：

从表3可见，在复壮培养基上，5个灵芝菌株的菌丝生长以灵芝3号最快，而且干重最高。结果说明这个菌株非常适合复壮培养基中生长，其次是灵芝1号生长较快，干重较高，而其他3个菌株生长较慢，干重较低，说明该菌株对复壮培养基低度适应。

5种灵芝菌株杂交在完全培养基上的生长情况见表4。

表4 5种灵芝杂交菌株在完全培养基上菌丝爬壁情况及生物量调查

以日期为横坐标，生长量为竖坐标，作曲线图如图2：

从表4可见，5个灵芝菌株的菌丝生长仍以灵芝3号最快，而且干重最高，结果说明这个菌株也非常适合完全培养基中生长，其次是灵芝1号生长较快，干重较高，而其他3个菌株生长慢，干重较低，说明该菌株对完全培养基适应较低。

5种灵芝杂交菌株在加富培养基上生长情况见表5。

表5 5种灵芝杂交菌株在加富培养基上菌丝爬壁情况生长及生物量调查表

以日期为横坐标，生长量为竖坐标，作曲线图如图3：

图3 加富培养基上菌丝生长曲线图

从表5可见，灵芝3号生长最快，但生物量较小，排名第4；灵芝2号生长较快，生物干重排名第3；珊瑚灵芝生长较慢，但生物量最高。

3.2 灵芝同一杂交菌株在不同培养基上菌丝生长量及生物量的测定

灵芝1号在不同培养基上的生长情况见表6。

表6 灵芝1号在不同培养基上菌丝爬壁情况及生物量调查表

以日期为横坐标，生长量为竖坐标，作曲线图如图 4：

图4 灵芝1号在不同培养基上生长曲线图

从表6可以看出，3个培养基中灵芝1号以复壮培养基菌丝生长最快，13d满管，以完全培养基菌丝生长量最多，加富培养基中菌丝生长最差。

灵芝2号不同培养基的生长情况见表7。

表7 灵芝2号在不同培养基上菌丝爬壁情况及生物量调查表

以日期为横坐标，生长量为竖坐标，作曲线图如图5：

图5 灵芝2号在不同培养基上生长曲线图

从表7可以看出，灵芝2号菌丝在复壮培养基上生长最快，但生物量最少，在加富培养基上生长最慢，但生物量最多。

灵芝3号不同培养基生长情况见表8。

表8 灵芝3号在不同培养基上菌丝爬壁情况及生物量调查表

以日期为横坐标，生长量为竖坐标，作曲线图如图6：

图6 灵芝3号在不同培养基上生长曲线图

宁阳灵芝不同培养基的生长情况从表8可见，灵芝3号在复壮、完全、加富3种培养基上生长都快，但以复壮培养基上生物量最多，完全次之，加富最低。

从表9可见，宁阳灵芝在3种培养基中以复壮最高，以加富培养基生物量最高，说明宁阳灵芝适合于加富培养基。

表9 宁阳灵芝在不同培养基上菌丝爬壁情况及生物量调查表

以日期为横坐标，生长量为竖坐标，作曲线图如图7：

图7 宁阳灵芝在不同培养基上生长曲线图

珊瑚灵芝不同培养基上的生长情况见表10。

表10 珊瑚灵芝在不同培养基上菌丝爬壁情况及生物量调查表

以日期为横坐标，生长量为竖坐标，作曲线图如图8：

图8 珊瑚灵芝在不同培养基上生长曲线图

从表10可见，珊瑚灵芝在复壮培养基上生长量最快，在加富培养基上生物量最高。

3.3 不同品种在不同培养基上菌丝生物性状观察（所有的试管种没有污染情况）

从表11可以看出：复壮培养基上生长的菌丝洁白，紧密、旺盛；完全培养基上生长菌丝的菌丝较洁白、较紧密、较旺盛；而加富培养基生长的菌丝洁白度由洁白―灰暗，紧密度从稀疏―紧密，菌丝较旺。

表11 不同品种在不同培养基上菌丝生长性状观察表

3.4 灵芝不同品种不同培养基试管种接入栽培袋后的情况

在相同的温湿度培养下，栽培袋菌丝生长情况及污染情况调查见表12、图9、表13。

表12 灵芝不同品种不同培养基栽培袋菌丝生长情况

图9 栽培袋菌丝培养室温湿度记载表

表13 灵芝不同品种不同培养基栽培袋菌丝生长期间污染情况

从表12、图9、表13可以看出：除了灵芝3号30d长满外，其他品种生长无显著差异，均在42d长满，平均日生长量接近，说明无论用什么培养基制种，试管种菌丝的生长情况对栽培袋菌发菌的时间无影响，但对栽培袋菌丝的质量（旺盛）有影响，表现在完全做培养基的污染率较高为12.0%，复壮和加富做培养基的污染率较低为9.3%，这也正好验证了试管种复壮菌丝生长旺盛，加富的生物量高，而完全的都处于二者之间。

从品种来看：灵芝1号的污染率最高达20.0%，灵芝2号、灵芝3号的污染率较低，为6.7%；宁阳灵芝和珊瑚灵芝介于中间分别为15.6%和11.1%。

3.5 产量及生物转化率调查

从表14、表15可以看出：就不同品种而言，灵芝3号单包出芝最高为396.9g，生物转化率为79.4%；其次为珊瑚灵芝，单包出芝374.9g，生物转化率75.0%；灵芝1号单包出芝最低为286.7g，生物转化率为57.3%，灵芝2号、宁阳灵芝的产量和转化率介于中间。就不同培养基而言，复壮：单包出芝375.7g，转化率为75.1%；完全：单包出芝326.7g，转化率为65.3%；加富：单包出芝347.9g，转化率为69.6%。

表14 2012年冬前产量调查表

表15 生物转化率调查表

3.6 菌株子实体性状考察

灵芝收获后，在实验室内考察各品种的芝片的大小、性状、色泽等特征特性。见表16。

表16 子实体性状调查表

从表16可见，芝片较大的是灵芝3号，性状美丽的属于珊瑚芝。

3.7 灵芝盆景制作

灵芝采收后，放在干燥箱内及时烘干，经过人工喷漆雕琢，制成盆景。

3.8 试验综述

3.8.1 菌丝体在试管培养基上的表现

不同品种在不同培养基上菌丝生长的色泽、致密度、速度及生物量有着明显的差异。灵芝3号表现出特有的特性，生长快、菌丝洁白，致密、生长旺盛，在复壮培养基上生物量达最高10.89mg/1000mL；同一品种在不同培养基上菌丝生长的情况也表现出各自差异。

3.8.2 菌丝体在栽培袋上的表现

菌丝在培养袋上的生长除灵芝3号生长特别快以外，均表现出无显著差异，但菌丝的质量（旺势）差别较大，表现在抗污染方面，复壮的菌丝较抗污染；不同品种不同培养基单包出菇和生物转化率有着不同的表现。

3.8.3 菌丝体在产量和生物转化率上的表现

灵芝3号单包出芝最高为396.9g，生物转化率为79.4%；其次为珊瑚灵芝，单包出芝374.9g，生物转化率75.0%；灵芝1号单包出芝最低为286.7g，生物转化率为57.3%，灵芝2号、宁阳灵芝的产量和转化率介于中间。复壮：单包出芝375.7g，转化率为75.1%；完全：单包出芝326.7g，转化率为65.3%；加富：单包出芝347.9g，转化率为69.6%。

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作者简介：卢巧英（1962-），女，任职于长安区农业技术推广中心，高级农艺师，主要从事食用菌的试验示范研究工作。