山奈酚延缓db/db小鼠肾损伤研究

【摘 要】：目的 观察山奈酚（KPF）干预自发肥胖2型糖尿病小鼠（db/db鼠）早期糖尿病肾病，并探讨相关机制。方法 24只健康雄性10周龄db/db鼠随机分为4组：不同剂量KPF给药组（50、200 mg/kg）、db/db对照组和二甲双胍（0.2 g/kg）阳性对照组，并设db/m对照组。连续灌胃给药10 周，检测小鼠血清肌酐（SCr）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α），24小时尿白蛋白排泄率（UAER）；留取肾组织，作病理形态学检查、实时定量PCR检测肾组织TNF-α、IL-6的mRNA表达、Western blot检测磷酸化核因子κB p65（ p-NF-κBp65）、磷酸化核因子κB抑制蛋白α（p-IκBα）、核因子κB抑制蛋白α激酶（IKKα）蛋白的表达水平。结果 不同剂量KPF干预10周，都能使db/db小鼠24小时UAER、SCr、IL-6、TNF-α水平下降，肾组织IL-6、TNF-α基因表达水平明显降低（P

关键词：山奈酚；糖尿病肾病；抗炎作用

中图分类号：R34 文献标识码：A 文章编号：1009_816x（2017）0？_？_0？

[Abstract] Objective To explore the effects of kaempferol（KPF）on renal tissues and to elucidate its underlying inflammatory molecular mechanism in db/db mice.Methods Twenty-four male db/db mice were randomly divided into four groups：Two groups were orally administered a low or high dose of KPF （50 or 200 mg/kg， respectively）， one control group and one positive control （metformin hydrochloride 0.2 g/kg） group. Six male db/m mice were set as normal control group. After 10 weeks treatment， 24 hour urinary albumin excretion （UAER）、SCr were detected； the gene expression of tumor necrosis factor-α（TNF-α），and interleukin-6（IL-6） were measured by real time PCR； the protein expression of IKKα、phospho-IκBα、phospho-NF-κBp65 were evaluated by Western blotting.Results After 10 weeks of KPF treatment，the urinary albumin excretion and the SCr were reduced，the gene expressions of TNF-α and IL-6 were inhibited.Importantly， the protein expression level of IKKα、phospho-IκBα、phospho-NF-κBp65 in renal tissue was significantly decreased（P

Key words： kaempferol； diabetic kidney disease ； anti-inflammation

糖尿病肾病（diabetic kidney disease，DKD）是糖尿病最常见的微血管并发症之一，其进展为终末期肾病（end-stage renal disease， ESRD）的速度较一般肾脏疾病更为迅速[1]，已成为血液透析治疗的最主要的原因。山奈酚（Kaempferol，KPF），是广泛存在于食物、中草药中的一种类黄酮化合物，已经有多项研究发现它具有防癌、抗癌、抗氧化、抗病毒及调节免疫等功效[2]。近年来多项体外试验及动物研究还表明它有抑制β细胞凋亡、改善胰岛素敏感性、抑制醛糖还原酶的活性、降低炎症反应及氧化应激等作用，在糖尿病及并发症的防治中有很大的应用前景[3～5]。然而，有关KPF防治DKD的动物研究报道很少。先天自发性肥胖2型糖尿病模型小鼠db/db鼠的糖尿病及DKD进程与人类2型糖尿病及肾病的早期表现极为相似，因此本研究选用该小鼠模型作为研究对象，观察KPF对2型糖尿病早期DKD的作用，并初步探讨可能的分子学机制，为筛选治疗DKD的药物提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物：无特定病原体级健康雄性10周龄C57BL/KsJ db/db小鼠24只，对照db/m小鼠6只 （南京大学动物模式所），分别为39～44 g及19～22 g。饲养环境温度21～23℃，分笼标准颗粒饲料喂养，自由摄水，12 h交替照明。动物实验符合国家《实验动物管理条例》和《浙江省实验动物管理实施办法》要求。