存活素、血管内皮生长因子-C在结肠癌中的表达及其临床意义

【摘要】 目的 探讨结肠癌组织中存活素（survivin）、血管内皮生长因子-C（VEGF -C）的表达，及其相互关系和临床意义。方法 应用免疫组化法检测35例结肠癌组织和15例癌旁组织中survivin及VEGF-C的表达水平。结果 结肠癌组织中survivin、VEGF-C阳性表达率分别为60．0%、65．7%显著高于癌旁非癌组织的13．3%（P

【关键词】结肠癌;存活素;血管内皮生长因子-C;免疫组化

Expression and Clinical Significance of survivin，VEGF -C in Human Colon Cancer

WANG Xiao-ling,HE Jian-qin,LI Jun-da.Department of Gastroenterology,The Forth People's Hospital of Shenzhen,Shenzhen 518033,China

【Abstract】 Objective To investigate the relationship between the expression of survivin,VEGF-C and the clinicopathologic parameters in colon cancer.And evaluate the clinical significance.Methods 35 colon cancer tissues,15 adjacent noncancerous specimens were obtained.Survivin,VEGF-C protein expression were evaluated by immunohistochemical analysis.Results Survivin and VEGF-C were overexpressed in colon camcer tissues (60．0%,(65．7%) were significantly higher than those in noncancerous tissues(13．3%)(P

【Key words】Colon cancer survivin Vascular endothelial growth factor-C (VEGF-C) immunohistochemistry

存活素(survivin)是新近发现的一种凋亡抑制基因,在多种恶性肿瘤组织中异常高表达,可增强肿瘤细胞的转移潜能。血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)是VEGF家族的新成员，又称为淋巴管生长因子，诱导淋巴上皮增殖和淋巴管增生，在肿瘤的淋巴管播散中起重要作用。本研究应用免疫组化技术，检测结肠癌组织中survivin、VEGF-C的表达，探讨其与结肠癌生物学行为的关系及临床意义。

1 材料和方法

1．1 标本与试剂 收集结肠癌标本35例，癌旁非癌组织15例（距癌灶边缘大于5cm），均未接受放化疗。其中男性25例，女性10例。年龄29岁~72岁，中位年龄52．7岁。标本常规福尔马林固定，石蜡包埋，3~4 μm连续切片分别进行HE染色和免疫组织化学研究。根据1987年国际抗癌联盟公布的PTNM分期标准进行TNM分期。

兔抗人survivin多克隆抗体（Santa Cruz,U.S.A）工作浓度为1∶50，兔抗人VEGF-C多克隆抗体（Zymed,U.S.A）工作浓度为1∶80。SP试剂盒购于北京中山生物技术有限公司。

1．2 免疫组化染色 免疫组化采用SP法，切片脱蜡水化，3% H2O2室温下孵育5min，均采用高压修复，滴加survivin、VEGF-C一抗，均在4℃冰箱过夜，滴加生物素化二抗，滴加辣根过氧化酶标记的链霉亲和素，DAB显色。以PBS代替一抗作为阴性对照.

以胞浆呈现棕黄色为阳性细胞，计算5个高倍视野中阳性细胞所占的比例，结果分为：一(阳性细胞

1．3 统计学方法 临床病理参数之间的比较采用χ2检验。相关分析用Spearman等级相关分析，P

2 结果

2．1 survivin、VEGF-C的表达 在癌旁组织中survivin、VEGF-C仅在少量上皮细胞中表达，阳性率均为13．3%（2/15）。癌组织中survivin、VEGF-C阳性表达率分别为60．0%、65．7%（21/35、23/35），明显高于癌旁非癌组织，差异均有统计学意义（P

2．2 结肠癌组织中survivin、VEGF-C蛋白的表达与临床病理参数的关系 如表1所示：survivin的表达与VEGF-C的表达一致，与浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关。survivin、VEGF-C蛋白的表达率，在浸润深度为T3+T4者显著高于T1+T2者，差异有有统计学意义（P

2．3 survivin蛋白表达与VEGF-C蛋白表达的关系 Survivin阳性表达组中VEGF-C阳性表达率为85．7%(18/21)，survivin阴性表达组中VEGF-C阳性表达率为35．7%(5/14)，差异有有统计学意义（P

3 讨论

Survivin是凋亡抑制蛋白( inhibitor of apoptosis protein,IAP)家族的新成员,由Ambrosini等于1997年分离得到。它通过抑制caspase级链反应下游的caspase-3、caspase-7发挥其抗凋亡作用[1]。诸多研究已证实,survivin在成熟分化组织中一般不表达或低表达，在多种恶性肿瘤组织中异常高表达，与恶性肿瘤的发生、发展密切相关[2-3]。有学者对survivin与子宫内膜癌的研究发现，随子宫内膜病变程度的加重，survivin表达逐渐增强，且与子宫内膜癌淋巴结转移情况呈正相关[4]。Ikehara等认为survivin的表达与肿瘤的浸润、转移及治疗和预后密切相关[5]。可见survivin与肿瘤细胞生长失控及肿瘤的发生、发展、转移、预后关系密切。

VEGF-C是VEGF家族的成员之一,目前已在大多数人类恶性肿瘤如前列腺癌、胃癌、乳腺癌、肺癌等组织中检测到。能与表达于淋巴内皮细胞上的特异性受体VEGFR-3结合,刺激淋巴管生成，在肿瘤淋巴管新生及淋巴结转移中起重要作用。VEGF-C也有促进肿瘤细胞生长的作用。Karpanen等研究发现在人乳腺癌MCF-7细胞中,VEGF-C过表达显著促进了肿瘤细胞的增殖，但是不影响肿瘤组织的血管发生；用可溶性VEGFR-3-Ig阻断VEGF-C与VEGFR-3的结合,VEGF-C的促进作用被抑制。因此认为VEGF-C能促进肿瘤细胞的生长，这种促肿瘤生长的作用与肿瘤细胞的淋巴管内生长有关[6]。

研究表明，淋巴结转移组survivin、VEGF-C的表达显著高于淋巴结无转移组。Survivin、VEGF-C的高表达与淋巴结转移相关。另外survivin、VEGF-C的表达与浸润程度及TMN分期相关，由于TNM分期与结肠癌患者的生存率密切相关，并且淋巴结转移是影响预后的独立因素，因此，survivin、VEGF-C表达增高的结肠癌易发生周围组织的浸润，预后较差。并且，研究还发现，survivin与VEGF-C表达呈正相关（P

综上所述，结肠癌组织中存在survivin、VEGF-C的过度表达，且两者表达呈正相关，能刺激淋巴管生成，促进癌细胞进入淋巴管从而导致淋巴结的转移。两者的表达可能有助于预测结肠癌的恶性程度和预后,并为结肠癌的治疗提供新的靶点。

参考文献

［1］ Ambrosini G,Adida C,Altieri DC.A novel anti-apoptosis gene,survivin,expressed in cancer and lymphoma.Nat Med.1997,3(8):917-921.

［2］ Montorsi M,Maggioni M,Falleni M,et al.Survivin gene expression in chronic liver disease and hepatocellular carcinoma.Hepatogastroenterology.2007,54(79):2040-2044.

［3］ Lechler P,Wu X,Bernhardt W,et al.The tumor gene survivin is highly expressed inrenal tubular cells:implications for a pathophysiological role in the kidney.Am J Pathol.2007,171(5):1483-1498.

［4］ Ai Z,Yin L,Zhou X,et al.Inhibition of survivin reduces cell proliferation and induces apoptosis in human endometrial cancer.Cancer.2006,107(4):746-756.

［5］ Ikehara MO.shita F,Kaneda Y,et al.Expression of survivin correlated with vessel invasion is a marker of poor prognosis in small adenocarcinoma of the lung.Oncol Rep,2002,9(4):835-838.

［6］ Karpanen T,Egeblad M,Karkkainen M J,et al.Vascular endothelial growth factor C promotes tumor lymphangiogenesis and intralymphatic tumor growth.Cancer Res,2001,61(5):1786-1790.