埋线疗法对肥胖大鼠大脑纹状体NO和NOS含量的影响

摘要 目的：观察埋线疗法对肥胖大鼠的减肥效应及对大脑纹状体一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)含量的影响。方法：用高脂饲料喂养制成单纯性肥胖大鼠模型，设立正常组、模型组和埋线组，观察各组大鼠体重及Lee’s指数，检测各组大鼠纹状体NO、NOS的含量。结果：模型组大鼠纹状体NO和NOS含量均显著低于正常组，但埋线疗法能降低肥胖大鼠的体重和Lee’s指数，提高大鼠纹状体NO和NOS含量。结论：纹状体NO和NOS含量异常可能是肥胖发病的因素，埋线疗法对肥胖大鼠纹状体NO和NOS含量的良性调整作用可能是实现减肥效应的中枢作用机制。

关键词 埋线疗法 大鼠 纹状体 一氧化氮 一氧化氮合酶

埋线疗法治疗肥胖症在临床上已获满意疗效，深受广大肥胖患者的欢迎，但是埋线疗法减肥的机理研究鲜有报道。有研究报道，纹状体参与了对下丘脑摄食中枢的调控[1]，本文以实验性肥胖大鼠为模型，观察埋线疗法对肥胖大鼠体重及Lee’s指数的治疗作用及对其纹状体一氧化氮和一氧化氮合酶含量的影响，探讨埋线治疗肥胖症的中枢作用机制。

1 材料

1．1 实验动物：刚断乳的健康Wistar雄性大鼠38只，体重60±5g，由浙江中医药大学实验动物中心提供。

1．2 主要仪器设备和试剂：穴位埋线器(北京任晓艳穴位埋线医学研究中心)；药物羊肠线（北京任晓艳穴位埋线医学研究中心）；BT815A半自动生化分析仪（上海精宏实验设备有限公司）；NO、NOS、考马斯亮蓝检测试剂盒（南京建成生物工程研究所）。

2 方法

2．1 实验性肥胖大鼠模型制备：从38只大鼠中随机选取8只做为正常组，喂普通饲料(由浙江中医药大学实验动物中心提供)。剩余30只大鼠喂高脂饲料，高脂饲料参照钱伯初、陈主初等的方法[2-3]，即每100g普通饲料中加入奶粉、猪油各10g，鸡蛋1只，浓缩鱼肝油0．1ml(含维生素A10000单位，维生素D21000单位)，新鲜黄豆芽250g。喂养30日，体重超过用普通饲料喂养大鼠的平均体重的10%作为肥胖模型组大鼠，共选取16只。

2．2 实验分组：把造模成功的16只肥胖大鼠模型随机分为模型组和埋线组，加上正常组，本次实验共分3组，每组有8只大鼠。

2．3 实验处理：①埋线组：先将羊肠线置于消毒弯盘中，剪成0．6cm长的小段。固定大鼠，参照《实验针灸学》[4]中大鼠穴位定位方法，取天枢（双）、足三里（双）和梁丘（双），用消毒镊子将配制好的药物羊肠线放置于一次性任氏穴位埋线器套管内，然后将埋线器快速平刺刺入穴位，先稍微向后退针，然后将线体弹入穴位。每10天埋线1次，共埋线3次。②模型组及正常组：固定方法和时间同埋线组，但不予治疗。各组大鼠实验期间均采用普通饲料喂养，自由摄食和饮水，每日更换饲料和水。

2．4 检测指标和方法:实验前后观察各组大鼠体重及Lee’s指数［Lee’s指数=体重（g）-3/体长(cm)×103］。实验结束后，禁食过夜，次日断头处死，同时分离脑组织置于液氮中保存备用。检测时，把大鼠大脑置于冰台上，经定位分离出纹状体组织，称重后用生理盐水稀释制成纹状体组织匀浆。分光光度法分别测定NO、NOS和蛋白的含量，测定步骤按照南京建成生物工程研究所提供的试剂盒说明书操作。

2．5 统计学处理: 采用SPSS11．5软件做统计学处理。计量资料用均数±标准差（x±s）表示，数据统计用单因素方差分析，组间两两比较，方差齐性时用LSD检验，方差不齐时用Dunnett’T3检验。以P

3 结果

3．1 埋线疗法对实验性肥胖大鼠肥胖指标的影响：详见表1。治疗前，模型组、埋线组与正常组比较，体重和Lee’s指数有显著性差异（P

3．2 埋线疗法对实验性肥胖大鼠纹状体NO和NOS的影响：详见表2。模型组和埋线组纹状体NO和NOS水平显著低于正常组（P

4 讨论

神经解剖证实，进入下丘脑的神经纤维之一来自纹状体，说明纹状体对下丘脑的功能具有调整作用。已知多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NA)、5-羟色胺(5-HT)等中枢神经介质参与机体多种生理功能(包括摄食活动)的调节。DA是NA的前体物质，NA在中枢神经系统内广泛分布，DA主要存在于黑质神经元胞体，它的轴突末梢投射到纹状体，当黑质神经元兴奋时，其末梢释放DA，作用于纹状体产生生理效应。5-HT神经元多位于中缝核群内，它的轴突末梢向上投射到前脑的许多结构，其中包括纹状体，产生生理作用。有研究报道，肥胖大鼠纹状体组织中DA和NA水平异常低下，5-HT水平异常升高，三磷酸腺苷酶（ATP酶）活性异常低下，说明纹状体组织中NA、DA、5-HT和ATP酶水平异常可能是导致肥胖的因素之一[5]。

NO是细胞内重要的信号传导信使，NOS降解精氨酸产生NO和瓜氨酸。NOS有三种亚型，神经NOS (nNOS)、内皮细胞NOS(eNOS)及诱导型NOS(iNOS)。NOS只存在于神经元，多集中在大鼠的大脑皮质、海马及纹状体等许多区域中。NO参与多个系统的正常生理功能(神经、免疫、心血管、消化和生殖等系统)和异常病理活动。有研究报道，纹状体中NO可促进DA释放，NO合成的底物L-精氨酸同样可引起DA释放，这种释放可被NOS抑制剂所对抗[6]。

本实验所见，肥胖模型大鼠纹状体NO和NOS含量显著低于正常大鼠水平。肥胖机体纹状体组织合成释放NO和NOS显著减少。由此可知，纹状体NO和NOS含量低下可能是肥胖的致病因素。埋线治疗后，肥胖大鼠体重、Lee’S指数显著下降，纹状体NO和NOS的含量升高。提示埋线疗法对肥胖大鼠纹状体NO和NOS水平的调整作用可能是埋线疗法减肥的作用机制之一。

穴位埋线疗法与针灸疗法相比，具有操作简单、作用时间长、疗效持久的优点。肠线在体内软化、分解、液化和吸收时，对穴位产生的生理、物理及化学刺激长达20天或更长，从而对穴位产生一种缓慢、柔和、持久、良性的“长效针感效应”。

5 参考文献

［1］刘志诚,孙凤岷.针灸治疗单纯性肥胖症临床和机理研究［J］.中国中西医结合杂志,2001,1(4):16-18.

［2］钱伯初.肥胖动物模型的制备原理和方法［J］.中国药理学通报,1993，9(1):75-76.

［3］陈主初,吴端生.实验动物学［M］.长沙：湖南科学技术出版社，2001:483.

［4］李忠仁.实验针灸学［M］.北京:中国中医药出版社,2003： 327.

［5］刘志诚,孙凤岷,朱苗花,等.针刺对肥胖大鼠纹状体作用的研究［J］.针刺研究，2001，26(2):122-126.

［6］邹冈.基础神经药理学［M］.北京：科学出版社,1999：345-359.

收稿日期 2008-04-30

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