自体骨髓干细胞移植治疗脑卒中20例临床研究

摘 要 目的：观察20例脑卒中患者经自体骨髓干细胞移植后，其神经功能缺损积分、日常生活能力状态变化及中医证候各项积分值改变情况。方法：2009年10月～2010年11月收治符合脑卒中纳入标准患者20例，通过腰穿蛛网膜下腔移植方式将分离后的自体骨髓干细胞［细胞计数为（2.8～1.2）×1010/L］移植脑内。结果：通过对自体骨髓干细胞移植治疗脑卒中患者的临床观察，发现治疗后患者的神经功能缺损积分、日常生活能力状态及中医证候各项积分值尤其是言语蹇涩、头晕耳鸣、面红目赤、腰膝酸软均有不同程度的改善。结论：通过腰穿蛛网膜下腔移植方式移植自体骨髓干细胞治疗脑卒中安全、方便、易为患者接受，并利于颅内多发和广泛病变的治疗。

关键词 自体骨髓干细胞 脑卒中

随着世界与我国人口老龄化的发展，我国脑血管疾病居三大死亡疾病（脑血管病、心脏病、癌症）首位，其中脑卒中占80%，存活者约50%～70%遗留不同程度瘫痪和失语等后遗症，严重威胁人类健康和生存，且缺乏有效的治疗方法。近年来随着干细胞研究的深入，发现骨髓干细胞是一组具有多向分化潜能和自我更新能力的细胞群，在生长和修复过程中起重要作用，为临床医学提供了一个发展新疗法的机会。

资料与方法

一般资料：2009年10月～2010年11月收治符合脑卒中诊断标准患者20例，标准参考1995年中华医学会第四次全国脑血管病学术会议修订的《各类脑血管疾病诊断要点》［1］、中医辨证分型标准参考《中风病诊断与疗效评定标准（试行）》［2］。其中男12例，女8例，平均56.00±4.53岁，病程12.77±3.36天。入选病例均在经控制颅压、脑细胞保护、基础支持治疗后，生命体征平稳，但仍遗留有较严重的神经功能缺损。设计采用自身前后对照方法。

骨髓干细胞采集及分离：取患者两侧髂后上棘为穿刺点，局部麻醉消毒，在无菌条件下，以18号骨髓穿刺针穿刺，抽取骨髓200ml，以7500U肝素抗凝，然后在本院干细胞实验室采用密度离心法进行骨髓干细胞的体外分离及纯化，得到细胞计数为（2.8～1.2）×1010/L，通过腰穿蛛网膜下腔移植方式移植脑内。

疗效评定标准：参照中华医学会第四次全国脑血管病学术会议通过的《脑卒中患者临床神经功能缺损程度评分标准》进行综合评价［3］。临床疗效判定均按尼莫地平法计算，即（治疗前积分-治疗后积分）/治疗前积分×100%。

统计学方法：所得数据采用SPSS13.0统计分析软件处理，数据以X±S表示。P＜0.05为差异有显著性。

结 果

神经功能缺损积分及日常生活能力状态变化比较：治疗后患者神经功能缺损积分以及日常生活能力状态分级较治疗前明显降低（P＜0.01）。结果见表1。

中医证候各项积分值比较：治疗后患者中医症状的各项积分值（除便秘外）均有改善，与治疗前相比，差异有统计学意义（P＜0.01）。结果见表2。

术后护理

术后由于患者的免疫功能受到一定程度的损害，极易发生感染等并发症，影响移植的疗效。为此，及时开导患者，保持积极的心态配合治疗，加强个人防护、卧床休息、减少活动，保持情绪稳定。

饮食上少量多餐，进食高热量、高蛋白、高维生素、易消化的饮食，忌辛辣刺激性食物。保证充足的水分，定期检查电解质的变化，及时予以纠正，以防发生电解质失衡。并加强临床观察，注意患者体温、心率、心律、血压等变化，早预防早发现早处理。

讨 论

脑卒中主要是脑动脉系统病变引起脑局部循环障碍导致以肢体功能损害为主要表现的各种功能障碍，并可出现各种复杂的临床综合征［4］。其治疗的关键在于挽救缺血半暗带区濒临死亡的神经元和促进损伤后神经功能的恢复。而来源于骨髓的干细胞相对容易分离培养、体外可大量扩增、遗传背景相对稳定、体内植入反应弱，易于接受外源基因的导入和表达，直接取材于患者本人，传代扩增并定向分化为靶细胞后再回输给患者本人，安全性高，没有异体排斥反应，并且避免了胚胎干细胞研究的伦理学争论，而被认为是一种较为理想的组织工程和基因载体细胞。因此，作为一种新型种子细胞，骨髓干细胞在神经系统疾病的细胞治疗和基因治疗中有潜在的广泛应用前景。

骨髓干细胞对脑损伤的修复作用在大量的动物实验中已经得到肯定，并已证实移植的神经干细胞可以定向迁移到损伤灶及其周围区域，促进损伤灶的修复［5］，重建损伤的神经环路。此外，神经干细胞还具有低免疫原型和良好的组织相容性等特点［6～7］。神经干细胞的以上特性为移植治疗脑卒中后遗症提供了可能。

张怡然等［8］应用神经干细胞移植治疗1例临床神经功能缺损程度评分为34分的大面积脑梗死患者。移植术后2个月患者能下床活动，扶杖行走，神经功能缺损程度评分为18分。黄月［9］、刘永海［10］等研究认为神经干细胞能提高Bcl-2和降低Bax蛋白表达，明显改善脑缺血大鼠的神经功能。王金伟等［11］将大鼠骨髓源性神经干细胞移植入蛛网膜下隙出血大鼠枕大池。结果发现，移植治疗的大鼠神经功能较对照组明显改善。Bang［12］等把30例大脑中动脉栓塞合并严重神经功能缺陷的患者随机分为两组，神经干细胞移植组患者在移植后6～12个月中Barthel指数和Rankin评分持续稳定地好转。Mezey等［14］研究认为，骨髓来源的干细胞能够迁移到受损的脑组织区域并分化生成不同的脑组织，从而促进神经恢复［13～15］。外源性的细胞移植能促进损伤脑组织血管再生，以减轻脑组织缺氧缺血损伤程度［16］。神经干细胞移植后可填充因损伤造成的空洞，分化出的神经元能与宿主细胞之间可以形成突触样结构，修复损伤区域受损的神经环路［17］。

通过对自体骨髓干细胞脑脊液途径移植治疗脑卒中患者的临床观察，发现治疗后患者的神经功能缺损积分、日常生活能力状态及中医证候各项积分值尤其是言语蹇涩、头晕耳鸣、面红目赤、腰膝酸软均有不同程度的改善，而这些治疗效果是患者接受传统的康复治疗手段所没有实现的，且与脑实质移植相比较，脑脊液途径移植更为安全、方便、易为患者接受，并利于颅内多发和广泛病变的治疗［18］。

随着神经干细胞移植治疗脑卒中的深入研究，为患者神经功能缺损修复带来进一步的希望。但伤后何时进行移植能够达到最佳效果尚无定论［19］。且尚缺乏适合临床应用的标准化技术方案、统一的功能评价指标、疗效分析及安全性评价。

参考文献

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2 国家中医药管理局脑病急症协助组.中风病诊断与疗效评定标准（试行）［J］.北京中医药大学学报,1996,19（1）:50-60.

3 全国第四届脑血管病学术会议脑卒中患者临床神经功能缺损程度评分标准（1995）［S］.中华神经科杂志,1996,29（6）:381-383.

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7 安沂华,翟晶,历俊华,等.离体培养神经干细胞的超微结构学研究［J］.中国康复理论与实践,2004,1:11-12.8 张怡然,郭摈荣,陈维亮,等.神经干细胞移植治疗大面积脑梗死1例［J］.实用医学杂志,2006,23（8）:984.

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10 刘永海,宋玉成,赵莲花,等.探讨脑缺血大鼠骨髓基质细胞移植后减少神经细胞凋亡的作用［J］.中国器官移植杂志,2005,26（12）:7l6-7l8.

11 王金伟,姚维成,王景峰,等.大鼠蛛网膜下隙出血后骨髓源性神经干细胞移植对脑组织的修复作用［J］.齐鲁医学杂志,2007,22（4）:341-342.

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表1 患者神经功能缺损积分和日常生活能力状态变化比较（X±S）

注：与治疗前相比，P＜0.01

表2 中医证候积分变化比较（X±S）

注：与治疗前相比，P＜0.05，P＜0.01