Livin蛋白在膀胱移行细胞癌组织芯片中的表达及临床意义

【前言】Livin蛋白在膀胱移行细胞癌组织芯片中的表达及临床意义由文秘帮小编整理而成，但愿对你的学习工作带来帮助。Department of Pathology，Integrated Chinese and Western Medicine Hospital of Zhejiang Province，Hangzhou 310003，China [Abstract] Objective To investigate the expression of Livin protein in bladder transitional cell carcinoma（BTCC） tissue microar...

[摘要] 目的 探讨livin蛋白在膀胱移行细胞癌（BTCC）组织芯片中的表达及临床意义。方法 免疫组化S-P法检测70例BTCC组织芯片标本中Livin蛋白的表达，并探讨其与患者的临床病理特征的关系。另选择30例正常的膀胱黏膜组织作对照。结果 BTCC组织中Livin蛋白的阳性率明显高于正常膀胱黏膜组织（χ2=36.51，P＜0.01）。BTCC组织中Livin蛋白的表达与肿瘤数量、转移与否、病理分级及临床分期无明显关系（P＞0.05），与肿瘤的初发和复发密切相关（P＜0.05）。结论 Livin基因参与BTCC的发生、发展和复发过程，可作为BTCC早期诊断和复发风险评估的一项重要指标，有望成为BTCC基因诊断和治疗的新靶点。

[关键词] 膀胱移行细胞癌；组织芯片；免疫组化；Livin；复发

[中图分类号] R737.14 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2011）31-88-02

The Expression of Livin Protein in Bladder Transitional Cell Carcinoma Tissue Microarray and Its Clinical Significance

XIE Wenjun LI Xiaohong FU Tianhong

Department of Pathology，Integrated Chinese and Western Medicine Hospital of Zhejiang Province，Hangzhou 310003，China

[Abstract] Objective To investigate the expression of Livin protein in bladder transitional cell carcinoma（BTCC） tissue microarray and its clinical significance. Methods Immunohistochemical SP method was used to detect the expression of Livin protein in 70 cases of BTCC tissue microarray samples and to explore its relationship with clinical pathological features. Another 30 cases of normal bladder mucosal tissues were chosen as the control group. Results The expression of Livin protein in BTCC tissues was significantly higher than that in the normal bladder mucosa（χ2=36.51，P＜0.01）. There was no significant relationship between the expression of Livin protein in BTCC tissues and the number of tumors，metastasis or not， pathological grade and clinical stage（P＞0.05），while it had a close relation with the initiation and recurrence of tumor（P＜0.05）. Conclusion Livin gene gets involved in the occurrence，development and relapse of BTCC. It can be taken as an important indicator for early diagnosis and recurrence risk assessment of BTCC，and can be expected to become a new gene target for diagnosis and treatment of BTCC.

[Key words] Bladder transitional cell carcinoma；Tissue microarray；Immunohistochemistry；Livin；Recurrence

凋亡抑制是肿瘤发生、发展的重要作用机制，凋亡途径的调节紊乱及相关基因的表达失调，都会导致肿瘤的发生与发展，且几乎所有的化疗药物都诱导细胞凋亡来杀死肿瘤细胞。Livin是近年来新发现的一种凋亡抑制蛋白，特异性表达于人的胚胎组织以及大多数人类实体瘤组织，这种异常的表达与肿瘤的发生、发展、转移甚至预后相关[1]。本研究采用免疫组化S-P法检测Livin蛋白在膀胱移行细胞癌（BTCC）组织芯片中的表达，并探讨其与患者的临床病理特征的关系。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源

选择我院泌尿科2005年1月～2011年8月术后病理证实的BTCC手术标本70例。其中男41例，女29例；年龄37～87岁，平均（54.5±6.7）岁；所有患者术前均未行放、化疗。另选择30例正常的膀胱黏膜标本组织作对照。

1.2 组织芯片制备

用组织陈列仪在模板蜡块（2mm×4mm）打孔，直径2mm，根据病理切片HE染色镜下所见，取典型癌组织区2mm的柱状组织，填入已打孔模板蜡块中并编号，压平后行再次包埋成的组织芯片蜡块。组织芯片蜡块5μm厚连续切片，进行免疫组化染色。

1.3 免疫组化染色

采用免疫组化S-P法，严格按试剂盒说明书进行实验操作。用已知阳性切片作阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。试剂兔抗人Livin多克隆抗体和免疫组化S-P试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司。

1.4 结果判定[2]

以细胞浆内出现棕黄（褐）色颗粒为阳性细胞。根据细胞着色强度无着色、浅黄色、棕黄色和棕褐色分别计0～3分，光镜下随机选择5个高倍视野，根据阳性细胞的平均百分率进行计分。0%计0分，1%～10%计1分，11%～40%计2分，51%～70%计3分，＞70%计4分。根据细胞着色强度和阳性细胞计分的乘积为最后得分，其中0～1分为（-），＞1分为（+）。

1.5 统计学处理

应用SPSS13.0统计学分析软件，采用χ2检验。

2 结果

70例BTCC组织中Livin蛋白阳性表达为46例（65.7%）；30例正常的膀胱黏膜组织Livin蛋白表达均阴性。BTCC组织中Livin蛋白的阳性率明显高于正常膀胱黏膜组织（χ2=36.51，P＜0.01）。BTCC组织中Livin蛋白的表达与肿瘤数量、转移与否、病理分级及临床分期无明显关系（P＞0.05），与肿瘤的初发和复发密切相关（P＜0.05）。

3 讨论

肿瘤病因与发病机制是一个有多基因共同参与、相互作用的复杂病理过程。Livin基因是新近发现的人类IAP蛋白家族的新成员，在大多数正常的成人组织中不表达，只在人体的胎盘和胚胎组织中高表达。近年来研究发现Livin基因可以通过抑制Caspase-3 及Caspase-9的活性而抑制细胞凋亡，与肿瘤的发生、发展、复发和预后密切相关[3，4]。

近年来国内外的研究发现Livin基因与膀胱癌的发生、发展关系密切。王晓庆等[5]研究发现Livin蛋白在膀胱移行细胞癌组织中高表达，Livin的表达与行癌细胞的病理分级、临床分期、是否转移、肿瘤数量无明显关系，与肿瘤复发关系密切，可作为膀胱移行细胞癌早期诊断和术后复发监测的一项重要指标。李显文等[6]研究发现Livin基因与BTCC的发生、发展和复发有关，可作为BTCC早期诊断、术后复发风险评估的重要指标。本研究结果发现BTCC组织中Livin蛋白的阳性率明显高于正常膀胱黏膜组织（P＜0.01），表明Livin基因与BTCC的发生、发展密切相关，可作为BTCC早期诊断的分子标志物，推测Livin可能通过抑制Caspase-3及Caspase-9的活性而抑制膀胱癌细胞凋亡，从而使已转化的膀胱癌细胞进行异常有丝分裂，导致膀胱上皮细胞发生永生化或发生癌变[7]。同时本研究发现BTCC组织中Livin蛋白的表达与肿瘤数量、转移与否、病理分级及临床分期无明显关系（P＞0.05），而与肿瘤的初发和复发密切相关（P＜0.05）。表明Livin基因的表达可作为监测BTCC早期复发和评估术后复发风险的一个重要指标。

总之，Livin基因参与BTCC的发生、发展和复发过程，可作为BTCC早期诊断和复发风险评估的一项重要指标，有望成为BTCC基因诊断和治疗的新靶点。为探讨膀胱癌的病因、发生机制和评估预后提供有效的参考指标。

[参考文献]

[1] Kasof GM，Gomes BC. Livin，a novel inhibitor of apopt osis prot ein family member[J]. J Biol Chem，2001，276（5）：3238-3246.

[2] 张旭宏，张贞玲，杨笑泉. 凋亡抑制因子Livin和Survivin在大肠癌组织中的表达和意义[J]. 现代肿瘤医学，2008，16（9）：1571-1574.

[3] Vucic D，Stennicke HR，Pisabarro MT，et al. ML-IAP， a novel inhibitor of apoptosis that is preferentially expressed in human melanomas[J]. Curr Biol，2000，10（21）：1359-1366.

[4] Yagihash iA，A sanuma K，Kobayash iD，et al. Detection of autoantibodies to Livin and Surviving in Sera from lung cancer patients[J]. Lung Cancer，2005，48（2）：217-221.

[5] 王晓庆，卢绩，陈岐辉，等. Livin基因在浅表性膀胱癌中的表达及其与肿瘤复发的关系[J]. 中华腔镜泌尿外科杂志（电子版），2010，4（2）：148-151.

[6] 李显文，杨罗艳，王红珊，等. 凋亡抑制蛋白Livin在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义[J]. 临床泌尿外科杂志，2006，21（3）：216-218，220.

[7] Gazzaniga P，Gradilone A，Giuliani L，et al. Expression and prognostic significance of Livin，Survivin and other apoptosis-related genes in the progression o f superficial bladder cancer[J]. Ann Oncol，2003，14（1）：85-90.

（收稿日期：2011-09-02）