白灵菇液体菌种制备及应用

摘 要：运用液体菌种栽培技术，可以缩短白灵菇的制种时间，提高生产效率，本文浅析白灵菇液体菌种的制备及应用，拟对白灵菇的生产栽培提供借鉴意义。

关键词：白灵菇；液体菌种；应用

中图分类号：S646 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20160432020

白灵菇分布于欧亚非内陆荒漠半荒漠地区，生长发育于春末夏初，是一种优良的药食两用的大型肉质伞菌，有“牛肝菌”、“西天白灵芝”等美称。受栽培周期长、只能出一潮菇、生物转化率低等因素的制约，目前我国白灵菇的生产总量不足10万t，相对于世界消费量已达2000万t且日益增长的食用菌市场，白灵菇具有很大的市场开发潜力。

1 白灵菇液体菌种制备

1.1 实验菌株

采用河北大学生命科学学院食药用真菌研究所提供的母种，保持4℃以下低温保存。

1.2 培养基

母种培养基：葡萄糖2.0%，土豆15.0%，麦麸5.0%，琼脂2.0%。将土豆切片和麦麸共煮沸20min，使用4层纱布进行过滤，将葡萄糖和琼脂投入滤液加水溶解，pH自然，0.1MPa，121℃灭菌20min。

液体培养基：豆饼粉1.0%，玉米粉2.0%，葡萄糖2.0%，酵母膏0.2%，KH2P04 0.1%，MgS04・7H2O 0.1%，pH自然，0.1MPa，121℃灭菌20min。

增稠剂：可以分别选用黄原胶、羧甲基纤维素、果胶、琼脂等4种不会被菌丝分解的增稠剂调配液体培养基，经过试验得知，浓度0.1%的黄原胶、浓度0.2%的羧甲基纤维素、浓度0.2%的果胶、浓度0.3%的琼脂效果最好。

麦粒培养基：99%麦粒，l%石灰，1%石膏，KH2P04 0.1%，MgS04・7H2O0.1%。麦粒要求无霉变、无破损、无干瘪，先用l%温热石灰水浸泡12h，煮沸后小火加热30min，直至麦粒熟透而不破皮为止，捞出晾晒表皮无水，按照配方搅拌装入玻璃瓶（注射液瓶），装至瓶肩部，塞好瓶塞，保持0.15Mpa，温度121～126℃，持续2h消毒杀菌。

栽培袋培养基：棉籽皮87%，麸皮10%，石灰1%，石膏1%，KH2P040.5%，MgS04・7H2O0.5%。采用聚丙烯袋或聚乙烯袋，每袋填装干料400g，保持压力0.15Mpa，温度121℃持续消毒杀菌2.5h。

1.3 实验仪器与设备

电子天平；电热恒温培养箱；冰箱；P270型普通摇床；超净工作台；立式压力蒸气消毒器等。

1.4 培育方法

白灵菇母种制作：把母种培养基切成斜面放置在试管中，将活化后的白灵菇菌种接种到试管中的培养基斜面，在电热恒温培养箱中保持25℃，待菌丝长满试管，放入冰箱保持4℃保藏。

一、二级菌种培养：使用250mL三角形摇瓶称量液体培养液100mL，放入lcm2活化24h的母种菌块，设定摇床转速为150转/min，保持恒温25℃，培养96h。完成一级菌种培养。使用250mL三角形摇瓶称量液体培养液200mL，投入一级菌种10mL，设定摇床转速为150转/min，保持恒温25℃，培养72h。完成二级菌种培养。

麦粒培养基的接种与培养：每个麦粒瓶接入10mL液体菌种，菌种接完后，在24℃黑暗的条件下培养，观察萌发时间，菌丝覆盖料面的时间，满袋时间。

栽培袋培养基的接种与培养：每个栽培袋接入15mL液体菌种，菌种接完后，在24℃阴暗的条件下培养，观察萌发时间，菌丝覆盖料面的时间，满袋时间。另外可以在每袋中放入40～50粒麦粒菌种作接种使用。

2 液体菌种与固体菌种生产周期比较

2.1 2种栽培模式的不同流程

传统栽培模式：

母种原种麦粒培养基栽培种栽培袋出菇

液体菌种栽培模式：母种一级液体菌种二级液体菌种栽培袋出菇；母种一级液体菌种二级液体菌种麦粒培养基菌种栽培袋出菇。

2.2 不同栽培模式的生产时间

传统栽培模式：由母种生产原种历时15d，由原种接种麦粒培养基，菌种在麦粒培养基上生长12d制得栽培种，由栽培种接到栽培袋菌料中，菌丝满袋历时35d，菌丝后熟历时30d进入出菇期，全过程需要92d。

液体菌种栽培模式：由母种到一级液体菌种历时4d，由一级液体菌种到二级液体菌种历时4d，由二级液体菌种直接接种栽培袋，直至菌丝满袋历时20d，菌丝后熟历时30d进入出菇期，全过程需要58d；由母种到一级液体菌种历时4d，由一级液体菌种到二级液体菌种历时4d，由二级液体菌种接种麦粒培养基到菌丝满瓶历时8d，由麦粒菌种接种栽培袋到菌丝满袋历时35d，菌丝后熟历时30d进入出菇期，全过程约需80d。

3 结 论

本文探讨了白灵菇液体菌种的2种栽培模式，使用第一种模式，可以充分发挥白灵菇菌丝萌发快、分散性好、生长旺盛的优点，把栽培周期缩短37%；按照第二种模式，可以缩短10d以上。总之，液体菌种技术可以缩短白灵菇的生产周期，帮助种植户节约生产成本，获取更多的利益。

参考文献

[1] 董玉兰，李书生.白灵菇高活力液体菌种摇瓶发酵培养件的优化[J].北方园艺，2014（6）.