HPLC法测定十全大补酒中芍药苷的含量

(娄底市药品检验所，湖南娄底417000)

摘要：目的：建立十全大补酒中芍药苷的含量测定方法。方法：采用反相高效液相色谱法，Diamonsilc。(200mn×4.6mm，5μm)；流动相为乙腈一水一冰醋酸(12:87:1)；检测波长为230nm；流速1.00ml/min；柱温25℃。结果：芍药苷在0.2050～4.1000μg范围内呈良好的线性关系，r=0.9998；平均回收率为99.2％，RSD=0.6％(n=9)。结论：所建立的方法简便、快速、准确，可用于十全大补酒的质量控制。

关键词：十全大补酒；芍药苷；hplc

中图分类号：R917

十全大补酒为卫生部药品标准中药成方制剂第四册收载的品种，由党参、白芍、川芎、黄芪等10味中药组成，用于气血两虚，面色苍白，气短心悸，头晕自汗，体倦乏力，四肢大温，月经量多等症。本品原标准中仅有常规检查项，现采用HPLC法对芍药苷进行定量分析，获得较满意结果。

1．仪器与试药

Waters高效液相色谱仪(Waters 1525 HPLC Pump，Wa－ters 2487 DetcDr．Waters 717Plus Autosamper)；1500恒温箱；Empower色谱工作站。

芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所。批号110736-200422)；十全大补酒(江西心正药业有限责任公司，批号20050402、20061204)；水为I级纯化水；乙腈(HPLC用)：其他试剂为分析纯。

2．方法与结果

2．1色谱条件

Diamonsil C18(200mm×4.6mm，5μm)；流动相为乙腈一水一冰醋酸(12:87:1)；检测波长为230nm；流速1.00 ml/min；柱温25℃。

2．2对照品贮备液的配制

精密称取经P2O2减压干燥24h的芍药苷对照品20.50mg，加50％甲醇溶解并稀释至25.00ml，摇匀，作为对照品贮备液。

2．3供试品溶液的配制

取本品10.00m1，加水10ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取4次(20、20、20、10ml)，合并正丁醇液，蒸干，残渣加50％甲醇溶解至25.100ml。

2．4系统适应性试验

在上述色谱条件下测定，结果表明：理论板数以芍药苷

2．5线性关系的考察

精密量取对照品贮备液0.25、0.50、1.00、2.50、5.00m1，各加50％甲醇稀释至10.00ml；分别取上述溶液10μl，各进5针，在上述色谱条件下测定，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，计算回归方程，得：Y=l468×106X-3.124～104,r=0.998。芍药苷进样量在0.2050～4.1000μg范围内呈良好的线性关系。

2．6精密度试验

精密吸取对照品溶液10μ1，连续进样5次，记录峰面积，RSD=1.4％。

2．7重复性试验

取同一批号(20061204)样品，分别按2.3项下的方法制备，测定其芍药苷平均含量为0.1754mg/ml，RSD=1.18％(n=6)。

2．8稳定性试验

取同一批号(20061204)样品，按2.3项下的方法制备，在0、6、12h各测定1次，记录峰面积，RSD=0.36％。

2．9加样回收试验

精密量取十全大补酒(20061204)5m1，共9份，分别精，密加对照品溶液(0.4067mg/ml)一定量，按2.3项下的方法制备，再按上述色谱条件测定，计算加样回收率。

3．讨论

曾采用参考文献中的提取方法(取本品10.00ml蒸干．等离子发射光谱仪分析测定栽培泰山黄精中微量元素的含量和组成特点，以期从微量元素角度为泰山黄精的药理研究和推广开发提供一定的理论依据。

1．仪器与材料

IRIS IntrepidⅡXSP型电感偶合等离子发射光谱仪(美国热电公司)；梅特勒十万分之一电子天平(瑞士)：可调温控电热板；电热恒温水浴锅；热恒温鼓风干燥箱。

硝酸和高氯酸为国产优级纯；实验用去离子水为美国Millipore公司生产的超纯水机制备；混合标准溶液来自北京有色金属研究总院(100μg/ml，GSB 04-1767-2004)。

实验所用黄精购自泰山黄精人工栽培种选育研究与标残渣加稀乙醇移置50ml容量瓶中，超声30min。冷却，再稀释至刻度)，进行试验，结果表明杂质峰太多，难以分离。故采用正丁醇提取。

在试验过程中，曾采用甲醇一水(20:80)、乙腈一水(18:82)等多种流动相，色谱峰分离均不理想，而未被采用。经试验摸索，确定乙腈一水一冰醋酸(12:87:1)分离效果好，及峰型达到理想的效果，而被采用。