济实验室质量控制与细菌盲样检验

【中图分类号】R115【文献标识码】A【文章编号】1672－3783(2012)05－0279－02

【关键词】质量控制细菌盲样检验

2011年11月份，济南市疾病控制中心质量管理科，对各区县疾病控制中心微生物检验室进行实验室质量控制考核。现将实验室内质量控制与细菌盲样检验情况报告如下。

一：实验室内质量控制内容

1.1仪器监测控制：培养箱要求调至（36℃±1℃），普通冰箱（4±3）℃，冻室（-5±1）℃。每天工作开始和结束时，分别记录温度变化。海尔生物安全柜，每周进行一次消毒灭菌检查。

1.2培养基的质量控制：对所有自己及成品培养基都做了无菌实验后，在用已知阳性及阴性菌株进行对照实验，均达到各培养基的标准要求。

1.3 试剂和染色液的质量控制：实验所用的各种试剂和染色液都标明了试剂名称.配制日期.失效日期.和配制者，并用已知阳性及阴性菌株进行检查。诊断血清每次使用前，观察透明度和色泽有无浑浊.絮状沉淀，并注意有效期和效价，每季度用标准菌株实验敏感性及特异性。

二：考核中细菌盲样的检验

2.1 材料：盲样：为模拟食品中毒事故的样品检测，病人均有呕吐.腹泻等症状，采集食用米饭.肉类等食物监测，初步怀疑沙门氏菌.金黄色葡萄球菌.蜡样芽孢杆菌等致病菌。每份盲样为淡黄色转运培养物，采用C-B拭子培养物封装。检验标准：GB4789.4-2010食品安全国家标准，食品微生物检验沙门氏菌，GB4789.10-2010食品安全国家标准，金黄色葡萄球菌，／编号JY0024，显微镜.高压锅.420型电热恒温箱。试剂：7.5﹪氯化钠肉汤.肉浸液肉汤.SC.SS .HE.三糖铁培养基.沙门氏菌显色培养基.血平板.营养琼脂平板.MYP. 沙门氏菌和蜡样芽孢杆菌生化管.革兰氏染色液.等。

2.2 方法：将C-B拭子培养物分别接种于各增菌液中，放入培养箱内18-24小时观察结果，同时将培养物进行稀释，取10-4.10-5稀释度接种MYP平板做活菌计数，接种量为0.1ml，每个稀释度都做平行样，培养24小时计数。根据增菌液中的生长情况观察结果，活菌计数10-5稀释度两平板计数分别为42和38个/皿，活菌计数为4.0×107个/ml ，每个平板挑取5个菌落做证实实验。SC管内浑浊生长，肉浸液肉汤中均匀浑浊生长，有菌膜，7.5﹪氯化钠肉汤内澄清，无菌生长。然后根据生长情况分别转种SS. HE平板. 沙门氏菌显色培养基.血平板.营养琼脂平板.MYP. 放入培养箱内18-24小时观察结果。

2.3结果

⑴ 形态鉴定：SS平板上菌落无色透明，菌落中心黑色，HE平板上菌落蓝黑色，沙门氏菌显色培养基菌落紫红色，MYP平板上菌落红色，且周围有粉红色晕，营养琼脂平板菌落圆形突起，表面粗糙，有蜡光，不透明。血平板：灰白色菌落，有透明溶血环。挑取典型菌落涂片染色镜检，一种为革兰氏阴性小杆菌，一种为革兰氏阳性有芽孢杆菌，初步诊断为沙门菌和蜡样芽孢杆菌。

⑵生化实验：挑取典型菌落分别接种沙门氏菌和蜡样芽孢杆菌生化管，沙门氏菌生化管三糖铁斜面k，底层A，H2S（+）.赖氨酸（+）.尿素（-）KCN（-）.靛基质（-）。蜡样芽孢杆菌生化管：动力-硝酸盐（+）.MR-VP（+）.明胶（+）.甘露醇（+）木糖（-）.过氧化酶（+）⑶血清凝集实验：挑取三糖铁管上的菌落做玻片凝集实验：A-F多价（+）.O2（-）.O4（-）O7（+）。根据形态鉴定. 生化实验. 血清凝集实验报告：该盲样中，蜡样芽孢杆菌活菌计数为4.0×107个/ml＞105个/ml，能引起食物中毒，检出蜡样芽孢杆菌。该盲样检出沙门氏菌，未检出金黄色葡萄球菌。该盲样考核经上级专家鉴定，获得满意成绩，证明了我们实验室的检验能力。细菌检验研究的主要对象是活的细菌，受各种因素影响较大，因此开展质量控制工作十分重要。

作者单位：250400平阴县疾病控制中心