硫酸沙丁胺醇口腔崩解片的制备及质量评价

[摘要] 目的:优选硫酸沙丁胺醇口崩片直压工艺,并测定其含量。方法:采用因子设计优选口崩片直压工艺,以直压甘露醇(pearlitol 200 DC)(X1)、交联聚维酮(PVPP)(X2)、微粉硅胶(silicon dioxide)(X3)、硬脂酸镁(MS)(X4)为自变量,以直压粉末的休止角(angle of repose)(Y1)、片子硬度(Hardness)(Y2)以及崩解时限(Disintegration)(Y3)为变量建立方程,最终确定直压工艺;采用反相高效液相色谱法测定样品含量。结果:X1、X3显著影响Y1,方程为Y1=35.837 5-0.031 25X1+0.4X3-0.042 5X1X3;X4显著影响Y2,方程为Y2=5.738 75-0.541 25 X4;X2、X4显著影响Y3,方程为Y3=75-1.975X2+20.375X4,通过等值线确定最佳处方,并且最佳处方的理论预测值在真实值波动范围内;硫酸沙丁胺醇在4~200 μg/ml范围内线性良好,回收率为99.6%,RSD值为0.62%(n=9)。结论:硫酸沙丁胺醇直压工艺简便可行,建立的反相高效液相色谱法可用于硫酸沙丁胺醇口崩片的含量测定。

[关键词] 硫酸沙丁胺醇;因子设计;反相高效液相色谱法;含量测定

[中图分类号] R944.4 [文献标识码]C [文章编号]1674-4721(2010)03(b)-113-03

Preparation and evaluation of salbutamol sulfate oral melt tablets

WANG Cuixin,HUA Qianli, LIU Fuli*, ZHAO Xuegang,YANG Liying

(Aoxing Pharma Co.Ltd, Shijiazhuang050070, China)

[Abstract] Objective:The purpose of the present study was to develop an optimized direct compression technique of salbutamol sulfate oral melt tablets and to establish an RP-HPLC method of determination for salbutamol sulfate. Methods:A 24 factorial design was employed in formulation with quantity of direct compression mannitol(pearlitol 200 DC)(X1), crospovidone(PVPP) (X2), colloidal silicon dioxide (X3) and content of magnesium stearate(X4) as independent variables. Three dependent variables were considered: angle of repose(Y1), tablet hardness(Y2), tablet disintegration(Y3). The main effect and interaction terms were quantitatively evaluated using a mathematical model; Active pharmaceutical ingredient(API) of salbutamol sulfate oral melt tablets was determinated by RP-HPLC. Results:The results indicate that X1 and X3 significantly affected Y1; X4 significantly affected Y2; X2 and X4 significantly affected Y3; Regression analysis and numerical optimization were performed to identify the best formulation; The predicted values agreed well with the experimental values; the linearity was obtained over the range of 4-200 μg/ml, the average recovery was 99.6% ,RSD was 0.62%(n=9).Conclusion:The results demonstrate the feasibility of the optimized direct compression technique taking salbutamol sulfate as a model drug and the method set up by RP-HPLC can determinate API of Salbutamol Sulfate oral melt tablets .

[Key words] Salbutamol sulfate;Factorial design;RP-HPLC;Determination

沙丁胺醇是一类缓解哮喘症状的药物,哮喘主要是由于免疫或者非免疫刺激后,引起组胺、5-HT、LTC4、LTD4、TXA2、PGE等炎症介质释放,引起上皮细胞损伤,血管渗出增多,黏膜水肿,平滑肌痉挛,气道阻力增高而导致阻塞性呼吸困难。沙丁胺醇选择性作用于β2受体,引起支气管扩张,缓解患者的症状[1]。口服沙丁胺醇普通片通常30 min后起效,容易延误最佳治疗时机;另外,患者发病时不方便服用普通沙丁胺醇片,为避免上述现象发生,笔者制备了沙丁胺醇口崩片,患者无需用水送服,药片在口腔内迅速崩解,起效迅速,大大提高了患者用药依从性。同时,为控制药品质量,笔者采用反相高效液相方法对硫酸沙丁胺醇进行含量测定。

1 试剂与仪器

硫酸沙丁胺醇(常州亚邦医药化工有限公司);直压甘露醇(法国罗盖特);交联聚维酮(美国国际特品公司ISP);直压乳糖(荷兰DMV 公司);硬脂酸镁(湖州展望);微粉硅胶(美国格雷斯公司);硫酸沙丁胺醇口腔崩解片(自制,2 mg/片);硫酸沙丁胺醇对照品(批号:100328-200502,中国药品生物制品检定所);DP30A 单冲压片机(北京国药龙立科技有限公司);Agilent-1200 Series 高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司);TU-1810SPC 紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限公司)。

2 方法与结果

2.1 口崩片的试验设计

采用4因素2水平设计试验方案,根据试验方案进行16组试验,试验方案见表1、2。以直压甘露醇(X1)、交联聚维酮(X2)、微粉硅胶(X3)、硬脂酸镁(X4)为自变量,以直压粉末的休止角(Y1)、片子硬度(Y2)以及崩解时限(Y3)为变量分别建立多元回归方程[2][3]34-35。

2.2 口崩片的制备

根据表1、2,精密称取原辅料(按1 000片称取原辅料,不计微粉硅胶、硬脂酸镁的理论片重为122 mg,不足部分以直压乳糖补足),混合均匀,压制成片。

2.3 口崩片的体外评价及结果处理

2.3.1 粉末的流动性(休止角)按表2处方称取原辅料,混合均匀,参考药剂学教材分别测定从三角漏斗漏下粉末堆集体的半径和高,求得休止角[3]76-77。

2.3.2 硬度的测定按表2处方称取原辅料,混合均匀,压片,每组处方分别取10片,采用硬度计测定硬度,求得硬度平均值。

2.3.3 崩解时限的测定将口崩片置于水平放置的20目筛网上,用滴管精密吸取2 ml 37℃纯化水,于口崩片正上方5 cm处匀速滴加,精密记录口崩片完全崩解的时间[4]。

分别按照2.3.1、2.3.2、2.3.3方法测定16组处方粉末的休止角、片子硬度及崩解时限,结果见表3。

以X1、X2、X3、X4为自变量,以直压粉末的休止角(Y1)、片子硬度(Y2)、崩解时限(Y3)为变量,分别建立多元回归方程:Y1=35.837 5-0.031 25X1+0.4X3-0.042 5X1X3;Y2=5.738 75-0.541 25 X4;Y3=75-1.975X2+20.375X4,确定最佳处方及直压工艺。将试验结果采用Design ease 软件进行数据方差的显著性分析,方差分析结果见表4。

口崩片属于迅速崩解片剂,要求崩解时限控制在1 min之内;为满足口崩片的迅速崩解,通常口崩片的硬度不大,但同时为满足包装以及运输要求,其硬度亦不能太小。本试验最佳优选工艺要求崩解时限小于50 s,硬度大于4.55 kg,采用Design ease 软件进行工艺优选,按照上述自变量及变量要求,优选拟合最佳工艺处方为:硫酸沙丁胺醇2 mg,直压乳糖45 mg,直压甘露醇(X1)50 mg,交联聚维酮(X2)25 mg,微粉硅胶(X3)1.5%,硬脂酸镁(X4)1%(硬脂酸镁对硬度及崩解时限均起反作用,理论上应该不予添加,如不添加,药片与压片机冲模摩擦力大,不易出片,故硬脂酸镁选择试验设计中最低水平1%)。

按最佳工艺处方,称取原辅料(1 000片用量),平行操作3份,混合均匀,分别测定休止角,将3批粉末分别压片(然后测定口崩片的硬度和崩解时限,并与休止角、硬度、崩解时限的理论预测值相比较,结果见表5。

从表5可以看出,理论预测值在真实值波动范围内,说明理论预测能够反映真实情况。

2.4 含量测定方法的建立[5]

参照中国药典2005年版二部硫酸沙丁胺醇缓释片质量标准,经过一系列方法研究,采用高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定本品的含量。

2.4.1 检测波长的选择 取硫酸沙丁胺醇对照品适量,精密称定,用水溶解并定量稀释制成每毫升中含80 μg的溶液, 以水为空白进行紫外扫描,本品在276 nm处有最大吸收。

2.4.2溶液的制备 对照品溶液:取硫酸沙丁胺醇对照品适量,精密称定,用水溶解并定量稀释制成每毫升中含80 μg的溶液,作为对照品溶液,备用。供试品溶液:取硫酸沙丁胺醇口崩片20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于沙丁胺醇8 mg),置100 ml量瓶中,加水适量,振摇使硫酸沙丁胺醇溶解,并加水稀释至刻度,摇匀,滤过,作为供试品溶液,备用。

2.4.3 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠9.77 g,加水溶解并稀释至1 000 ml,用磷酸调节pH值至(3.10±0.05)-甲醇(85∶15)为流动相,检测波长为276 nm。理论板数按硫酸沙丁胺醇峰计算不低于2 000,在本色谱条件下,硫酸沙丁胺醇对照品和样品的色谱图见图1、2。

2.4.4 线性关系 以水为溶剂,分别配制一系列浓度的硫酸沙丁胺醇对照品混合溶液,各精密量取20 μl,注入液相色谱仪,分别记录硫酸沙丁胺醇色谱峰面积(Y)。将峰面积(Y)与各自浓度(X)做线性回归,经统计,硫酸沙丁胺醇浓度与峰面积线性标准曲线方程为:Y=8.156 3X + 2.829 1(R2=1),表明硫酸沙丁胺醇进样浓度在4~200 μg/ml范围内线性良好。

2.4.5 精密度试验 取本品按上述含量测定方法测定6次,含量测定的RSD值为0.33%。

2.4.6 供试品溶液的稳定性 取供试品溶液,分别放置0、2、4、8、12、24 h后进样,计算硫酸沙丁胺醇峰面积的RSD值,结果为0.54%。

2.4.7 加样回收率试验 精密称取已知测定含量的硫酸沙丁胺醇口崩片(约相当于硫酸沙丁胺醇8 mg)3份,分别置于100 ml量瓶中,再分别加入硫酸沙丁胺醇对照品6.4、8.0、9.6 mg,按2.4.2项下供试品溶液制备方法同法操作。测得硫酸沙丁胺醇低、中、高三种浓度的回收率分别为99.6%、99.8%、99.4%;RSD值分别为0.49%、0.62%、0.63%。9份样品平均回收率为99.6%。

2.4.8 硫酸沙丁胺醇的含量测定结果 取自制三批供试品按上述方法测定含量,结果见表6。

3 讨论

通过试验可以看出,直压甘露醇和微粉硅胶对休止角影响显著,硬脂酸镁对休止角没有显著影响,可能是直压甘露醇的良好流动性以及微粉硅胶的优良助流性掩盖了硬脂酸镁的作用,直压甘露醇和微粉硅胶对休止角的影响趋势随着直压甘露醇用量的增加,休止角显著减小;随着微粉硅胶的用量增加,休止角也逐渐减小,从等值线走向趋势可以看出直压甘露醇对粉末流动性的影响比微粉硅胶的影响显著。

从多元回归方程、方差分析可知,硬脂酸镁对硬度影响显著,随着脂镁用量的增加,口崩片硬度减小,可能是相同压片力下脂镁的增多降低了粉末的可压性,从而引起硬度下降,试验过程中增大压片力,在一定范围内能够增加口崩片硬度,但压片力过大,有时会引起裂片,同时对崩解也产生不利影响;交联聚维酮和硬脂酸镁对口崩片崩解时限影响显著,随着交联聚维酮用量的增加,口崩片崩解时限缩短,脂镁对崩解时限的影响则与交联聚维酮相反,随着脂镁用量的增加,崩解时限延长,可能是由于随着硬脂酸镁用量的增加,粉末的疏水性变强,从而引起崩解时限延长。

本试验采用Design ease 软件设计硫酸沙丁胺醇口崩片的直压工艺,以粉末休止角、片子硬度及崩解时限为考察指标,通过优选确定最佳工艺,并将理论预测值与最佳工艺结果相比较,结果休止角、硬度、崩解时限理论预测值在最佳工艺真实值波动范围内。采用高效液相色谱法测定口崩片中硫酸沙丁胺醇的含量,方法简便,结果准确,重现性好。

[参考文献]

[1]李端.药理学[M].北京:人民卫生出版社,1999:233.

[2]Narendra C, Srinath MS, Babu G. Optimization of bilayer floating tablet containing metoprolol tartrate as a model drug for gastric retention[J]. AAPS PharmSc、iTech,2006,7 (2):1-7.

[3]毕殿洲.药剂学[M]. 北京:人民卫生出版社, 1999.

[4]姚方耀,刘欢,刘衡,等.口腔崩解片体外崩解评价方法探讨[J].中国药学杂志,2007,42(4):276-279.

[5]国家药典委员会. 中华人民共和国药典[M]. 二部. 北京:化学工业出版社, 2005:734-735.

(收稿日期:2010-01-28)