男性无症状性病高危人群尿沉渣检测沙眼衣原体

［摘 要］ 目的：研究能否用尿沉渣代替尿道拭子检测沙眼衣原体(Ct)。方法：分别用Wellcozymechlamydia法和PCR法对352例男性无症状的性病高危人群首段尿渣进行Ct检测，两法经尿沉渣、尿道拭子配对研究。结果：以尿道拭子Ct培养为金标准，两种方法的敏感性和特异性分别为50．98％(P<0．05)和100％(P＞0．05)、98．04％(P>0．05)和96．68％(P>0．05)。结论：结Ct的检测，用Wellcozymechlamydia法时，不宜用尿沉渣代替尿道拭子作标本，而用PCR法时，可用尿沉渣代替尿道拭子作标本。

［关键词］ 沙眼衣原体；聚合酶链反应；酶联免疫反应

Detection of Chlamydia Trachomatis in Urine from Asymptomatic Males of STD High Risd Population

Abstract：Objective To study whethet Chlamydia trachomatis (Ct) can be detected in urine specimens．Methods The first void urine sediments from 352 asymptomatic males of STD high risk population were measured by Wellcozyme chlamydia and PCR．Results Using the urethral swab culture as gold standard，the sensitivity and specificity of Wellcozyme chalamydia were 50．98％(P<0．05)，and those of PCR were 98．04％(P>0．05) and 96．68％(P>0．05)，respectively．Conclusion It is suggested that urine sediments can not be used as the specimens for the detection of Ct by Wellcozyme chalamydia，and urine sediments can be used if Ct is detected by PCR．

Key words：Chlamydia trachomatis;Polymerase chain reaction;Enzyme immunoassay

沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis，Ct)是引起非淋菌性尿道炎的常见病原体之一。临床上Ct实验室诊断一般采取尿道／宫颈拭子作标本。近十余年来，国内外学者用尿液作标本对男性有尿道炎症状患者进行Ct检测取得了较好效果［1，2］，但对男性无症状感染者进行Ct检测，结果报道不一［3，4］。我们用尿道拭子Ct培养作金标准，分别对用Wellcozymechlamydia(WC)法和PCR法检测352例男性无症状的性病高危人群尿道拭子和尿沉渣，并对其敏感性和特异性进行比较，现将结果报道如下。

1 资料方法

1.1 病例 352例男性患者均符合下列条件，即：有非婚性接触史或性伴有性病史；无尿道炎症状和体征；就诊前2周内未用过抗生素。

1.2 取材方法 随机选择部分患者，先取尿道拭子3支，分别插入尿道2 cm、3 cm、4 cm深处。接着取尿液20 ml(晨起或隔3 h以上的首段尿)，另一部分患者则为先采取尿标本，后取尿道拭子。

1.3 尿标本处理 将尿液分装于2支离心管，以3 000 r／min离心20 min，弃掉上清液，将尿沉渣置于4 ℃冰箱保存(≤7 d)。实验时2支离心管各加入pH 7．4磷酸缓冲液或由试剂盒厂家提供的缓冲液，摇均使之形成悬浮液，随机分配用WC和PCR法测定。

1.4 Cr的McCoy细胞培养 参照叶顺章等［5］方法进行。McCoy细胞由广州中山医科大学微生物教研室提供。

1.5 WC法检测Ct抗原 采用英国Murex公司产的检测Ct抗原试剂盒。操作按试剂盒说明进行。

1.6 PCR检测Ct DNA 采用中国军事医学科学院生产的检测Ct试剂盒。引物为CT-A：5＇GGACAAATCGTATCTCGG3＇，CT-B：5＇GAAACCAACTCTACGCTG3＇，操作按试剂说明书进行。

2 结果

无症状的性病高危人群不同标本和方法检测Ct的结果详见表1。

2.1 无症状的性病高危人群尿道拭了／尿沉渣WC法检测Cf结果 用WC法检尿道拭子、尿沉渣中Ct抗原，两种标本检测结果均阳性22例，均阴性305例。尿道拭子阳性、尿沉渣阴性21例。尿道拭子阴性、尿沉渣阳性4例。经配对计数资料χ2检验，χ2=10．29,P<0．01，差异有显著性。

表1 352例无症状性病高危人群不同标本和方法检测Ct的结果(略)

2.2 无症状的性病高危人群尿道拭子／尿沉渣PCR检测Ct结果 用PCR法检测尿道拭子／尿沉渣CtDNA，两种标本检测结果均阳性有56例，均阴性有290例。尿道拭子阳性、尿沉渣阴性2例。尿道拭子阴性、尿沉渣阳性4例。经配对计数资料χ2检验，χ2=0．17，P>0．05，差异无显著性。

2.3 以尿道拭子Ct培养作金标准，用WC法和PCR法检测尿道拭子／尿沉渣中Ct敏感性和特异性，见表2。

表2 Wellcazyme chlamydia法和PCR检测尿道拭子／尿沉渣中Ct敏感性和特异性比较(略)

3 讨论

在泌尿生殖道Ct感染中无临床症状的病例占相当比例，国外报道约占1／3［6］，国内廖明敏等［7］报道约占1／2，成为Ct的主要传染源。目前临床上检测Ct的方法很多，一般都是采用尿道／宫颈拭子作标本，取男性患者尿道拭子常引起局部疼痛不适，容易损伤尿道黏膜，部分患者难以接受。长期以来，人们一直希望能用尿液检测Ct，早期研究表明用尿标本进行Ct培养的阳性率很低，直到Ct非细胞培养法应用以后，证实能够用尿液作标本检测男性有症状非淋菌性尿道炎Ct抗原或DNA［1，2］，但对是否能同样用于检测男性无症状的性病高危人群，目前尚有争论［3，4］。本组352例男性无症状的性病高危人群，以尿道拭子Ct细胞培养作金标准，用WC法检测尿沉渣Ct的敏感性和特异性分别为50．98％和100％；用PCR法检测尿沉渣Ct的敏感性和特异性分别为98．04％和96．68％。表明用PCR法检测男性无症状的性病高危人群的Ct感染，用尿沉渣作标本具有较高的敏感性和特异性，可以替代尿道拭子，这对大规模人群感染调查具有一意义，而WC法检测男性无症状性病高危人群尿沉渣V的敏感性较低，其原因可能是，此法是一种酶联免疫法，少量的Ct包涵体往往不足以产生抗原抗体反应。对这个问题的解决，是否可以增加尿液标本量或提高离心速度，尚有待进一步研究。

参考文献：

［1］ Quinn TC，Welsh L，Lentz A，et al．Diagnosis by AMPLICORPCR of Chlamydia trachomatis infection in urine samples from women attend?ing sexually transmitted disease clinics［J］．J Clin Microbiol，2001,34：1401.

［2］ 程文海，徐广坤.利用男性非淋菌性尿道炎患者尿沉渣检测沙眼衣原体［J］.临床皮肤科杂志，2001，26：9?11.

［3］ Furrell DJ，Haran MV，Park BW．Comparison of PCR／nucleic acidhybridiza?tion and EIA for the detection of Chlamydia trachomatis in different populations in a regional center［J］．Pathology,1999,28：74?78．

［4］ Leonardi GP，Seitz M,Edstrom R，et al．Evaluation of three immunoassays for detection of Chlamydia trachomatis in urine specimens from asymptomaticmales［J］．J Clin Microbiol,1999,30：2793?2796．

［5］ 叶顺章，张木友.性传播疾病实验室诊断手册［M］.广州：广东科技出版社，1991：46?47．

［6］ Shafter MA，Prager V，Shalwitz J，et al．Prevalence of urethral Chlamydiatrachomatis and Neisseria gonorrhoeae among asymptomatic sexually active ado?lescent boys［J］．J lnfect Dis，1987,156：223?225．

［7］ 廖明敏，顾伟鸣，乐嘉豫，等．性病高危人群沙眼衣原体感染初步调查［J］.中华皮肤科杂志，1999,24：253?254．

［8］ 张学军.皮肤性病学［M］．北京：人民卫生出版社,2004,7：218.