125I粒子植入小鼠肝脏对肝纤维化血清指标的影响

[摘要] 目的:观察不同剂量125I粒子植入小鼠肝脏后对肝纤维化血清指标的影响。方法:50只昆明小鼠随机分为正常对照组（A组）和不同剂量125I粒子（125I粒子放射性活度依次为0、18.5、37.0和74.0 MBq）植入组（依次为B、C、D、E组）共5组（n10），30 d处死，采用ELISA法测定血清Ⅲ型前胶原（PC Ⅲ）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、透明质酸（HA）和层粘连蛋白（LN）浓度。结果:E组PC Ⅲ、Ⅳ-C、HA和LN测定结果依次为（57.96±11.22）、（30.69±9.86）、（170.96±49.21）和（75.58±13.47） ng・ml-1，与A组比较P＜0.05，其他各组的测定结果无明显统计学差异。结论:小鼠肝脏植入125I粒子放射性活度≤37 MBq时，对肝纤维化指标无明显影响，125I粒子放射性活度达74 MBq时会引发各项肝纤维化指标的升高。

［关键词］ 125I粒子； 小鼠； 肝纤维化

［中图分类号］ R730.55; R-33 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1671-7562（2011）01-0035-03

doi:10.3969/j.issn.1671-7562.2011.01.省略

Effect of liver fibrosis on serum markers after 125I seed

implanted into mouse liver

HUANG Wei

（Department of Nuclear Medicine, Xiaogan Central Hospital, Xiaogan 432100, China）

［Abstract］ Objective: To observed the effect of liver fibrosis on serum markers after 125I seed implanted into mouse liver of different doses. Methods: 50 mice were randomly divided into control and 4 experimental groups of different doses of particles in（n10）. 125I particle radioactivity order of 0, 18.5, 37.0 and 74.0 MBq, mice were sacrificed on day 30.Serum type Ⅲ procollagen（PC Ⅲ）, Ⅳ collagen（Ⅳ-C）, hyaluronic acid（HA） and laminin（LN） were detected by ELISA. Results: Serum type Ⅲ procollagen（PC Ⅲ）, Ⅳ collagen（Ⅳ-C）, hyaluronic acid（HA） and laminin（LN） in group E were respectively（57.96±11.22）, （30.69±9.86）, （170.96±49.21） and （75.58±13.47） ng・ml-1, significantly different from that in the control group P＜0.05, but not from those in other experimental groups. Conclusions： A dose equal to or less than 37 MBq imposes no significant effect on liver fibrosis, however 74 MBq will increase the values of the indicators for fibrosis.

［Key words］ 125 I seed； mice； liver fibrosis

放射性125I粒子组织间植入已经在多种肿瘤的治疗中显示了有效的肿瘤局部控制率。在国外，放射性粒子植入治疗已成为早期前列腺癌的首选治疗方法；在国内，放射性粒子植入对恶性实体瘤的临床应用也较为广泛。但是对放射性粒子的基础研究相对薄弱，其临床应用的安全性尚存不少疑问。本实验通过在小鼠肝脏植入计划设定数的放射性125I粒子，观察小鼠肝脏放射性损伤后血清肝纤维化指标的变化情况，为放射性125I粒子临床使用的安全性研究提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

昆明种小鼠50 只，体重20～22 g，雌雄各半，由中国科学院昆明动物研究所提供。

1.2 主要实验器械及试剂

125I放射性粒子由北京原子高科核技术应用股份有限公司提供，外形为圆柱形钛合金封装体，长度为4.5 mm，直径为0.8 mm，有放射性活度分别为4.6、9.25和18.5 MBq・枚-1 3种规格。不同活度125I粒子均衰变获得。125Te冷粒子，由125I粒子衰变后获得，其外形、体积、质量均与125I放射性粒子相同，但无放射性活度。Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、IV 型胶原（Ⅳ-C）、透明质酸（HA）、层粘蛋白（LN）肝纤维化ELISA试剂盒由上海森雄科技实业有限公司提供。手术器械包括穿刺包、专用穿刺针等。

1.3 方法

50只小鼠应用随机数字表法分成5组（n10）：A组为正常对照组；B组为125Te冷粒子对照组，经外科开腹方式将4枚粒子均匀分布植入小鼠肝脏，以明胶海绵敷于植入点止血；C～E组为放射性粒子植入组，经外科开腹方式分别均匀分布植入4枚粒子，总放射性活度依次为18.5、37.0和74.0 MBq，以明胶海绵敷于植入点止血。粒子植入后1个月时用乙醚吸入麻醉后摘眼球取血，处死小鼠，采用ELISA法检测血清肝纤维化指标，取肝组织用10%中尔马林固定，行病理学检查。

1.4 统计学处理

用SPSS 11.0 统计学软件分析数据，两两比较用t检验。

2 结 果

2.1 小鼠一般情况

各组小鼠处死前均存活，精神状态良好。

2.2 125I粒子对小鼠肝纤维化指标的影响

各组小鼠肝纤维化指标测定结果见表1。

表1 各组小鼠肝纤维化指标测定结果（±s，n＝10）

与A组比较，a P>0.05，b P

A组与B组血清各项肝纤维化指标差异无统计学意义，表明圆柱形钛合金封装粒子对肝脏纤维化指标无明显影响；B组与E组血清各项肝纤维化指标差异有统计学意义，125I粒子放射性活度为74 MBq时血清各项肝纤维化指标均升高。

2.3 形态学观察

各实验组在粒子植入周围取肝脏组织于光镜下观察大致正常，惟大剂量组在肝小叶结构正常、肝窦未见扩张充血的同时，汇管区可见少量淋巴细胞及纤维结缔组织向周围伸延分隔肝小叶并伴小胆管增生。

3 讨 论

放射性粒子组织间植入治疗肿瘤属于近距离内放疗的一种，它是将微型放射源植入到肿瘤内或受肿瘤细胞浸润的组织中，发出持续低能量的X射线或γ射线，使肿瘤组织受到最大程度的毁灭性杀伤，正常组织不损伤或仅有微小创伤，从而使肿瘤得到治疗。放射性粒子组织间植入越来越多地应用在恶性肿瘤的治疗中［1-2］，它弥补了普通放疗剂量的限制性，疗效得到进一步证实［3］。

肝纤维化是指肝细胞发生坏死及炎症刺激时，肝内纤维及成纤维结缔组织增生的病理过程，其实质是由于胶原和其他细胞外基质的合成和降解失衡［4］。HA为间质纤维细胞所合成,由体内各组织的间质细胞合成而广泛存在于细胞外基质中,是结缔组织的重要组成。肝纤维化时肝内皮细胞HA受体快速摄取循环中的HA这一功能受阻，血清HA即升高。LN与IV型胶原等结合，构成细胞外基底膜骨架的主要成分，分布于血管壁、淋巴管壁、肝管壁和神经鞘细胞以及平滑肌细胞突中等部位，肝纤维化时肝星状细胞中LN mRNA可增加3倍以上，并大量分泌LN，增加肝组织中LN含量达10倍以上，形成毛细血管化［5］。

放射性粒子对正常组织的损伤作用、程度尚无明确数据。本研究探讨了正常小鼠肝脏植入不同剂量125I粒子对血清中肝纤维化指标的影响，观察发现125I核素外周包裹的圆柱形钛合金封装体对血清肝纤维化指标无影响，125I放射性活度为18.5、37 MBq时，对肝纤维化指标无明显影响，而达74 MBq时肝纤维化指标出现升高,形态学观察发现纤维结缔组织增生，表明适当剂量的125I粒子应用是安全的，粒子活度增高，肝脏纤维化指标会随之发生异常。

［参考文献］

［1］ JIANG Y L, MENG N, WANG J J, et al. CT-guided iodine-125 seed permanent implantation for recurrent head and neck cancers［J］. Radiat Oncol, 2010,5:68-75.

［2］ WANG Z M， LIU Y， LIU F J, et al. Clinical efficacy of CT-guided iodine-125 seed implantation therapy in patients with advanced pancreatic cancer［J］. Eur Radiol, 2010,20（7）:1786-1791.

［3］ 卢鸣剑,张福君,张亮,等.放射性粒子125I对兔股动脉放射性损伤的实验研究［J］.中国微创外科杂志,2007,7（2）:134-135.

［4］ 李武,黄学惠,沈志强,等.三七丹参对四氯化碳致小鼠实验性肝纤维化的影响［J］.中国现代医生,2009,47（3）:42-44.

［5］ 焦奋哲.肝纤维化标志物临床应用评价［J］.实用医技杂志,2006,13（22）:3998-3999.