血清sCD40L和YKL-40水平与2型糖尿病大血管并发症的关系及其临床意义

糖尿病的慢性并发症遍及全身各重要器官，包括大血管病变和微血管病变，其中大血管病主要包括心、脑血管及周围血管疾病，是引起患者致残致死的主要原因之一，在糖尿病死亡原因中，动脉粥样硬化约占80%。新近研究发现，CD40与CD40L是一对互补跨膜糖蛋白，是新的炎症标志物，CD40L可通过与血管内皮细胞、平滑肌细胞、巨噬细胞表达的CD40相互作用，产生一系列的生物学效应,促进动脉粥样硬化形成或并发症的产生[1]。Rathcke CN等[2]研究报道YKL- 40是一种涉及血管内皮功能的炎症糖蛋白，YKL-40可通过趋化诱导和刺激血管内皮细胞迁移，YKL-40通过促进新生小血管的形成，诱导血管内皮细胞表型的改变，可促进血管内皮细胞重塑、增殖、趋化、黏附、迁移，YKL- 40蛋白的表达被认为在动脉粥样硬化斑块形成过程中有重要作用。本文通过测定2型糖尿病大血管并发症患者血清sCD40L和YKL-40的浓度变化，了解其在糖尿病大血管病变发生发展中的作用，为糖尿病大血管病变的早期诊断和病情监测提供实验依据。

1 材料与方法

1.1对象

100例2型糖尿病大血管并发症患者为2010年1月至2011年2月在我院的住院患者100例，男56例，女44例，年龄33-74(58.5±11.4)岁，平均病程6.7±5.4年，其中合并冠心病者34例，合并脑梗死者31例，合并下肢血管病变35例。糖尿病血管并发症诊断标准：①脑梗死：以CT或MRI诊断，所有脑梗死患者均为非急性期；②冠心病：有典型心绞痛或心梗病史，并(或)经心电图、活动平板试验证实；③下肢血管病变：以血管彩超发现动脉粥

样硬化斑块为依据，有内膜不厚但回声增强，动脉内膜厚度≥1mm。100例无大血管并发症的2型糖尿病患者为同一时期本院收治的患者，男60例，女40例，年龄37-73(54.8±10.8)岁。均排除急性创伤或感染、微血管病变和眼底血管瘤、出血、渗出、增生等糖尿病视网膜病以及糖尿病肾病等其他疾病。对照组均为同期来门诊健康体检者100例，其中男54人，46人，年龄35-72(55.3±10.5)岁，该人群不嗜烟酒，无糖尿病、高脂血症、高血压、心脑血管疾病、肝肾疾病、甲状腺疾病、血液系统疾病、恶性肿瘤等，且性别、年龄、BMI与病例组相匹配。

1.2方法

所有受检对象清晨空腹抽取静脉血5ml，离心5min，3000转/rain，血清分离后放-20℃冰箱保存备用。采用ELISA测定血清中可溶性CXCL16和YKL-40，sCXCL16 ELISA试剂盒购自美国R&D公司，MetraTMYKL-40 ELISA试剂盒购自Quidel 公司，按试剂盒说明书要求操作。

1.3统计学分析

采用的spss16.0软件分析,数据采用均数±标准差()表示,P

2 结果

2.1 对照组和2型糖尿病患者血清sCD40L和YKL-40水平的比较

2型糖尿病大血管并发症组血清sCD40L和YKL-40浓度明显高于无大血管并发症组和对照组(P

表1 对照组和2型糖尿病患者血清sCD40L和YKL-40水平的比较()

组别

n

sCD40L(ng/ml)

YKL-40(ng/ml)

2型糖尿病

大血管并发组

100

4.27±1.35**■ ■

205.46±43.14**■ ■

无大血管并发组

100

1.96±0.51*

85.74±24.86*

对照组

100

1.13±0.42

47.38±7.55

注：与对照组比较, *P

2.2 2型糖尿病大血管并发患者各亚组血清sCD40L和YKL-40水平的比较

2型糖尿病大血管并发组各亚组之间血清sCD40L和YKL-40水平比较差异无显著性(P>0.05)；见表2。

表2 各亚组血清sCD40L和YKL-40水平的比较()

组别

n

sCD40L(ng/ml)

YKL-40(ng/ml)

冠心病亚组

34

4.20±1.28

199.72±41.37

脑梗死亚组

31

4.70±1.56

228.47±49.63

下肢血管病变亚组

35

4.01±1.15

190.65±39.74

注：与冠心病亚组比较, ■P

2.3 2型糖尿病大血管并发患者sCXCL16和YKL-40相关性分析

sCXCL16水平和YKL-40水平经正态性检验，均属正态分布，相关性分析结果显示：sCXCL16水平和YKL-40水平呈正相关关系(r=0.648, P

3 讨论

新近研究发现, CD40L属于TNF超家族，是一种Ⅱ型跨膜蛋白, 在动脉粥样硬化斑块内、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、巨噬细胞以及循环中的血小板均可出现CD40L的表达。Nerea等[4]研究发现1型糖尿病患者和2型糖尿病患者血浆sCD40L的水平比正常对照组高，用罗格列酮治疗后可以降低其水平，提示血浆高水平sCD40L可能是1型糖尿病和2型糖尿病患者促炎症反应的标记。CD40- CD40L是一对互补的跨膜糖蛋白，CD40与CD40L相互作用是各种免疫与炎症调节的重要通路, CD40L可促进斑块中的细胞分泌一些动脉粥样硬化斑块形成中起关键作用的成分， CD40- CD40L可能是动脉粥样硬化发病的始动因素[5]。CD40L在糖尿病患者体内的高表达,与其受体相互作用产生一系列生物学效应,可能是糖尿病患者易并发动脉粥样硬化的重要机制之一，可能与糖尿病的血管病变有关。有研究表明，2型糖尿病患者血浆YKL-40较正常葡萄糖耐量者显著升高，YKL-40被确定为2型糖尿病与肥胖无关的标记[6]。YKL-40是一种与急、慢性炎症均有关的炎症因子，在炎症部位的巨噬细胞中有大量表达，现已证实动脉粥样硬化斑块内平滑肌细胞中有YKL-40表达，动脉粥样硬化斑块内巨噬细胞YKL-40 mRNA表达高度上调[7]。本研究旨在进一步探讨血清sCD40L和YKL-40异常与糖尿病大血管并发症的关系，从而为糖尿病大血管并发症炎症反应异常的防治提供新的思路。

本研究结果表明，无大血管并发症的2型糖尿病患者血清sCD40L和YKL- 40高于正常对照组，而有大血管并发症时患者血清sCD40L和YKL-40升高更加显著；2型糖尿病大血管并发组中各亚组与对照组比较，血清sCD40L和YKL-40水平均明显升高，差异有统计学意义(P

综上所述，2型糖尿病可能是细胞因子介导的炎症反应，炎症在其发病机制中起媒介作用，血清sCD40L和YKL-40水平能反映糖尿病患者血管动脉粥样硬化程度，对2型糖尿病患者大血管病变的早期识别有重要的临床参考价值。

【参考文献】

[1]Hassan GS, Merhi Y, Mourad W. CD40 Ligand: A neo-inflammatory molecule in vascular diseases[J].Immunobiology,2011,7(1):12-16.

[2]Rathcke CN,Vestergaard H.YKL-40:an emerging biomarker in cardiovascular disease and diabetes.[J].Cardiovasc Diabetol,2009,23(8):61.

[3]Tasci I, Dogru T, Sonmez A,et al. Soluble CD40 ligand levels in otherwise healthy subjects with impaired fasting glucose[J].Mediators Inflamm,2006(5):32508.

[4] Varo N, Vicent D, Libby P, et al. Elevated plasma levels of the atherogenic mediator soluble CD40 ligand in diabetic patients: a novel target of thiazolidinediones [J].Circulation,2003,107(21):2664-2669.

[5]王静华,陶沂,丁素菊. CD40-CD40L在动脉粥样硬化和血栓形成中的作用[J].国际脑血管杂志,2006,14(11):862-864.

[6] Nielsen AR, Erikstrup C, Johansen JS,et al. Plasma YKL-40: a BMI-independent marker of type 2 diabetes[J]. Diabetes,2008,57(11):3078-3082.

[7] Nishikawa KC, Millis AJ. gp38k (CHI3L1) is a novel adhesion and migration factor for vascular cells. Exp Cell Res, 2003，287(1):79-87

[8]Cipollone. F ,Chiarelli. F ,et al. Enhanced soluble CD40 ligand contributes to endothelial cell dysfunction in vitro and monocyte activetion in patients with diabetes mellitus : effect of improved metabolic control ,Diabetologia 2005 ,48 (6):1216-1224.

[9]Santill F, Davì G, Consoli A, et al.Thromboxane-dependent CD40 ligand release in type 2 diabetes mellitus. J Am Coll Cardiol,2006 ,47(2):391-397.

[10]Reinboldt S, Wenzel F, Rauch BH, et al.metalloproteinase-2(MMP-2)-dependent shedding of soluble CD40 ligand (sCD40L) from activated platelets[J].Platelets,2009, 20(6):441-444.

[11]Brix JM, H?llerl F, Koppensteiner R,et al.YKL-40 in type 2 diabetic patients with different levels of albuminuria[J].Eur J Clin Invest,2011,41(6):589-596.