一种简单快速的己烯雌酚定性检测方法研究

摘 要 己烯雌酚是一类严重危害人体健康的兽药，简单快速的检测方法研究具有重要意义。从浓度、温度、酸碱性等方面研究己烯雌酚使高锰酸钾褪色的最佳反应条件。结果表明：己烯雌酚使高锰酸钾褪色的最佳条件是中性条件下，温度在40 ℃以上，己烯雌酚的最低检测限为0.1 ppm。这是一种适合于快速筛选的定性检测方法。

关键词 己烯雌酚；快速检测；褪色反应

中图分类号：G642.423 文献标识码：B 文章编号：1671-489X(2012)06-0126-03

Simple and Rapid Qualitative Detection Method for Diethylstilbestrol//Luo Banxin1, Chen Changyun2

Abstract To study the optimum reaction conditions of diethylstilbestrol qualitative color reaction. Because diethylstilbestrol molecule contains double-bond and it can react with potassium permanganate, we discuss the optimum reaction conditions of diethylstilbestrol with potassium permanganate’s color reaction from concentration, temperature, acid and alkaline three aspects. The optimal condition of diethylstilbestrol with potassium permanganate’s color reaction is neutral condition, temperature above 40 ℃, and the lowest detectable limit of diethylstilbestrol is 0.1 ppm.

Key words diethylstilbestrol; rapid detection; color-fading reaction

Author’s address

1 No.13 High Middle School of Nanjing, Nanjing, China 210008

2 School of Biochemical & Environmental Engineering, Nanjing Xiaozhuang University, Nanjing, China

211171

食品安全是一个国家涉及国民健康、社会稳定、经济利益和国际贸易、国家形象甚至国际外交的重大战略问题。我国的食品安全问题十分严重，频频出现的食品安全事件不仅成了老百姓日常生活中挥之不去的阴影，严重危害人们的身体健康和社会稳定，同时也极大地损害了我国农产品的国际声誉和贸易，经济损失难以估量。

己烯雌酚（diethylstilbestrol，DES）是二苯乙烯类人工合成雌激素，能促进蛋白质的合成代谢，在养殖业中被用来提高动物日增重和饲料效率，促进禽畜生长。毒理研究表明，这是一类具有很强作用的雌激素，长期食用将会对人体产生染色体畸变，诱发肿瘤；并且能扰乱激素平衡，损害肝脏和肾脏，导致性早熟、胎儿畸形等严重毒害后果，被世界许多国家禁用[1-5]。我国农业部在2002年颁发的《食品动物禁用的兽药及其它化合物清单》[农业部第193号公告]中将己烯雌酚及其衍生物列为食品动物中禁用的兽药；同年我国质检总局、外经贸部联合的《中国动物及动物源食品中残留物监控计划》将己烯雌酚等二苯乙烯类雌激素列为禁用兽药之首。

但受利益驱动，非法使用现象仍然严重，造成的食物中毒和贸易摩擦时有发生，因此对这类兽药的残留检测引起国内外的高度重视。目前这类兽药的检测主要是依赖于专门检测机构的大型仪器，方法主要有液相色谱法、气质联用法和液质联用法等。但是这些方法还存在明显的不足：色谱法仪器昂贵、检测成本高，不适用于基层检验检疫工作；操作复杂、检测时间长，不利于大批量样品的快速测定；等等[6-7]。因此，现场快速的初筛技术是当前急需。

1 实验部分

1.1 实验材料

己烯雌酚，标准品，Sigma-Aldrich公司，以乙醇为溶剂配成浓度为1 g/L的溶液备用；高锰酸钾，分析纯，上海成捷化学有限公司；其他试剂均为分析纯，实验用水均为3次蒸馏水。

1.2 溶剂的影响

由于己烯雌酚不溶于水，易溶于乙醇，所以己烯雌酚的标准液用乙醇来做溶剂配制。向2支试管中分别加入高锰酸钾（1×10-4 mol/L）0.25 ml，然后分别加入无水乙醇、蒸馏水0.75 ml，加热一段时间，观察研究用水和乙醇稀释己烯雌酚的标准液对高锰酸钾褪色反应的影响[8-10]。

1.3 温度的影响

依次测定常温至100 ℃下各浓度己烯雌酚使高锰酸钾褪色的时间，进而判断该反应的最适温度。向5支试管中都加入高锰酸钾（1×10-4 mol/L）0.25 ml，然后分别加入0.1 g/L、0.01 g/L、1 mg/L、0.1 mg/L的己烯雌酚和蒸馏水0.75 ml（空白试验），依次在100 ℃至常温条件下测定变色时间，选择最佳温度。

1.4 酸碱性的影响

分别对酸性、碱性和未加酸碱条件下反应现象和反应时间进行对比，寻找出可以最快、最明显观察出现象的条件。在50 ℃下，向5支试管中都加入高锰酸钾（1×10-4 mol/L）0.25 ml，然后分别加入0.1 g/L、0.01 g/L、1 mg/L、0.1mg/L的己烯雌酚和蒸馏水0.75 ml（空白试验），最后向上述5支试管中加入2滴1 mol/L的氢氧化钠，摇匀观察。另在50 ℃下，向5支试管中都加入高锰酸钾（1×10-4 mol/L）0.25 ml，然后分别加入0.1 g/L、0.01 g/L、1 mg/L、0.1 mg/L的己烯雌酚和蒸馏水0.75 ml（空白试验），最后向上述5支试管中加入2滴0.4 mol/L的硫酸溶液，摇匀观察。

2 结果与讨论

表1列出不同浓度的己烯雌酚在中性环境下不同温度时使高锰酸钾褪色的反应时间。从表中数据可以看出，不同己烯雌酚的浓度对该褪色反应有很大差别，浓度大于0.10 g/L时，在整个实验温度区间内立即变色。对于浓度0.01 g/L的己烯雌酚样品，变色速度从30秒到2分半钟不等，也能很快褪色；当浓度降低到1.00 mg/L时，40 ℃以上都能很快变色，并且随着温度的升高变色速度加快，但是在常温下10分钟之内不会变色，褪色速度明显减慢。己烯雌酚浓度进一步降低到0.10 mg/L时，90 ℃以上才能保证褪色反应的快速进行。

从表2可以看出，不同浓度的己烯雌酚在碱性环境下，都会从浅紫红色立即变为淡绿色，这是由于在碱性条件下，高锰酸钾被还原成锰酸钾的原因，并且空白与含有己烯雌酚的标准品没有差别，干扰强烈，不适合于己烯雌酚的检测；而在酸性环境下，变色明显，但是变化规律不是随着浓度的变化而单调变化，与中性条件相比，规律性不好。

3 小结

从浓度、温度、酸碱条件三方面依次讨论己烯雌酚使高锰酸钾褪色最适条件的选择。综上所述，中性条件是己烯雌酚使高锰酸钾褪色的最佳条件，温度在40 ℃以上，己烯雌酚的最低检测限为0.1 ppm。这是一种简单快速的检测方法。

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