EMT在宫颈癌转移复发中的作用

摘要：上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，emt）是指上皮细胞在特定的生理和病理情况下向间充质细胞分化的现象，EMT在胚胎发育、组织损伤修复以及肿瘤细胞侵袭、转移过程中起重要作用。近年发现，上皮间质转化（EMT）与肿瘤细胞侵袭、转移等密切相关。现就EMT与宫颈癌侵袭、转移的相关研究做一综述。

关键词：上皮间质转化；宫颈癌；转移复发

宫颈癌是女性第二大常见恶性肿瘤，发病率仅次于乳腺癌、肺癌，位居第3位[1]，严重危害着女性健康。每年我国宫颈癌发病患者超过13.1万例，80%的患者确诊时已发展为浸润癌，每年超过5万例死于宫颈癌（数据来源中国宫颈癌防治网）。宫颈癌侵袭、转移是严重影响患者生活质量并最终导致死亡的主要原因。肿瘤细胞存在上皮间质转化（epi-thelial-mesenchymal transition，EMT），并且被认为是肿瘤细胞发生浸润转移的第一步。现就EMT调控以及与宫颈癌侵袭、转移的相关研究进展综述如下。

1 EMT概念及调控机制

上皮间质转化（EMT）是指上皮细胞在特定的生理和病理情况下向间充质细胞分化的现象，即由有极性分布、静止的上皮细胞转化为无极性分布、运动活跃的间质样细胞的过程。EMT在胚胎发育、组织损伤修复以及肿瘤细胞侵袭、转移过程中起重要作用。上皮间质转化表现为上皮标记物（如E-cadherin、角蛋白、Ep-CAM等）表达降低；立方上皮细胞的细胞角蛋白结构改变，外形演变为纺锤形纤维细胞形态；间质标记物（如波形蛋白、纤维连接素、N-cad等）表达增加。EMT受一组转录阻碍蛋白（ZEB-1、ZEB-2、Twsit、Snail、Slug）调控，后者作用于E-cad启动子，通过一系列表观遗传学改变，抑制E-cad转录及表达。细胞表面E-cad分子低表达及失表达，引起细胞间黏附减少，同时导致胞浆内游离β-catenin升高，并进入细胞核与转录因子LEF（lymphoid enhancer binding factor，LEF）形成复合体，激活间质细胞相关基因的转录及表达。TGF-β、Notch、Wnt、Hedgehog等信号分子都可以通过相应途径激活转录阻遏蛋白（ZEB-1、ZEB-2、Twist、Snail、Slug）表达，诱导EMT形成。体外试验表明，尼古丁、酒精等可诱导肿瘤细胞发生EMT，异黄酮等则可阻断EMT形成[2]。

2 EMT对其他肿瘤的影响

2.1对大肠癌肝转移的影响 大肠癌目前证实是一个很好的模型，用来研究EMT在一般实体肿瘤中的角色。部分原因是它广为人知地转移至肝脏和其他的致命部位[8]。事实上，最近一项采用了转录分析技术分析报道的研究表明，326例结肠癌患者的微点阵数据与EMT信号的结肠癌基因表达模式有紧密联系[9]。TGF-β和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）能诱导EMT已经被证实。整合素αvβ6表达的增加伴随着EMT。在异种移植的研究中，进一步说明在肿瘤细胞侵犯的周围间质组织中，钙黏素E的缺失与整合素αvβ6表达的增加有密切联系。重要的是，对那些临床患者组织的研究中，研究显示这些数据标志着患者不良的预后。免疫组化研究显示，FLH2（four-and-a-half LIM protein2）在转移的大肠癌组织中的高度表达，进一步证明了TGF-β1诱导的EMT在大肠癌的进展、侵袭及转移的重要性。

2.2 EMT与乳腺癌转移的关系 研究发现，从人类乳腺癌组织中提取的成纤维细胞可以诱导EMT，并增加体外直接共同培养癌细胞模型的迁移能力[10]。乳腺癌细胞系全基因组转录谱的鉴定结果显示，EMT相关标志物的表达与其侵袭转移显著相关[11-12]。研究表明，基底型乳腺癌更易发生EMT。具有更高的侵袭转移能力[13]。从骨髓微转移灶分离的乳腺癌细胞也显示与侵袭转移相关的EMT特征[4]。研究还发现，在原发性乳腺癌中常出现细胞角蛋白缺失，这与EMT在促使癌细胞扩散至周围基质的机制相一致[14]。研究还表明，E-钙黏蛋白的表达下调能够明显增强乳腺癌侵袭转移能力[15]，而给予外源性E-钙黏蛋白尽管并不足以使间质细胞表型逆转，但能够抑制乳腺癌转移[16-17]。

2.3 EMT及其转录因子在口腔鳞癌中的作用 体内口腔鳞癌细胞往往通过淋巴系统向远处转移。在口腔鳞癌细胞系43A（原发肿瘤细胞系）和43B（复发肿瘤细胞系）研究EMT的发生机发现，43A表达典型的上皮细胞表型，主要表现在E-cadherin和laminin-332（laminin-5）的表达。此外，还有Vimentin filaments和N-cadherin表达；反而，已经历EMT转变的复发肿瘤细胞43B表达特征。在2种口腔鳞癌细胞系中，Snail、Slug及Twist都可以单独直接抑制E-cadherin表达，并高表达诱导产生的EMT，使上皮细胞表现纤维原细胞表型并获得转移性[18]。

3 EMT与宫颈癌侵袭、转移

EMT在宫颈癌细胞的侵袭、转移中起重要作用。Lee等[3]发现宫颈癌细胞发生EMT时，细胞呈长形，细胞表面E-cad表达下调，波形蛋白表达上调，癌细胞扩散、侵袭能力增强，并认为，在EMT过程中Snai1上调起重要作用。通过转染技术，使宫颈癌细胞高表达Snai1，可以诱导宫颈癌上皮细胞发生间质转化，E-cad表达显著下降，同时发现癌细胞对划痕愈合及侵袭能力显著提高[4]。后来研究发现Notch1和RhoC激活同样可以导致宫颈癌细胞发生EMT[5]。

研究表明，E-cad分子表达的改变与肿瘤的侵袭及转移密切相关。1997年就有学者发现，在宫颈癌转移瘤中E-cad及a/β-catenin mRNA的表达显著低于原发瘤。Yaldizl等[6]通过分析24例侵袭型宫颈癌，发现超过50%（13例）的宫颈癌组织E-cad表达减少，而在E-cad表达减少的宫颈癌患者中11例存在着淋巴结的转移（11/13），提示E-cad低表达与宫颈癌淋巴结转移密切相关。Dursun等[7]发现宫颈癌细胞E-cad表达与宫旁侵袭的发生显著相关（P=0.024），E-cad低表达导致总体生存率下降。应用COX回归分析发现，剔除干扰因素后E-cad低表达与总体生存率、疾病复发率明显相关（生存率相关性，P=0.004，RR=6.08，95%CI 1.75～21.1；复发率相关性，P=0.027，RR=1.75，95%CI 1.06～2.88）。E-cad低表达可以作为预测宫颈癌患者预后的指标，而E-cad低表达是上皮癌发生间质性转化的特征性改变。可见EMT不仅在宫颈癌中是普遍存在的现象，而且与宫颈癌侵袭转移密切相关，从而与患者的预后密切相关。

4问题与展望

宫颈癌的侵袭、转移是影响宫颈癌预后的主要因素。早期宫颈癌无论手术还是放疗都可以取得非常好的疗效，然而一旦发生局部侵袭，患者不仅并发症增加，生存率也显著降低，严重影响患者的生活质量；若存在远处转移则丧失了根治的机会，患者的生存率更低。如果能抑制肿瘤细胞侵袭，减少转移的机会，就会改善患者预后，提高患者的生存率及生活质量。同时，一些研究者发现肿瘤的远处转移与EMT的逆转移方向有关，这种现象称作间质细胞上皮转移。比如，在大肠癌中，发现肝转移与miR-200C表达的增加和特征性EMT的增加密切相关[19]。MET在癌症转移中的确切作用存在争议，因为在一些癌症的数据中表明MET起到反肿瘤转移的作用[20]。

总之，哪些分子标志物可以作为肿瘤治疗的靶点？EMT是肿瘤细胞侵袭转移的重要过程，但EMT与钙调蛋白结合蛋白的表达及磷酸化的关系尚不清楚。随着对宫颈癌侵袭、转移过程认识的深入，将有可能寻找到可以抑制甚至阻断宫颈癌侵袭、转移的靶点，为探索宫颈癌新的治疗模式提供理论依据。

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