血管内皮生长因子在子宫腺肌症

【摘要】 目的 探讨血管内皮生长因子（vegf）在子宫腺肌症发病机制中的作用。方法 采用免疫组化sp法检测30例子宫腺肌症患者异位和在位内膜及26例正常子宫内膜中vegf的表达。结果 vegf在子宫腺肌症患者异位和在位内膜中的阳性表达均显著高于正常内膜；vegf在在位内膜中的阳性表达显著高于同组的异位内膜表达；vegf在在位内膜分泌期的阳性表达显著高于增殖期。结论 血管内皮生长因子在子宫腺肌症患者中的异常表达对子宫腺肌症的发生发展起着重要作用。

【关键词】 血管内皮生长因子；子宫腺肌症；免疫组化

expression of vegf in adenomyosis

huang yan-li，wang jing，xu dong-fang，et al.department of obstetrics and gynecology，dezhou people’s hospital，dezhou 253014，china

［abstract］ objective to investigate expression of vascular endothelial growth factor（vegf）in adenomyosis and to explore pathogeneses of adenomyosis.methods expression of vegf in ectopic and eutopic endometria of 30 women with adenomyosis and 26 normal women was detected by using immunohistochemical method.results the positive expression of vegf in either eutopic or ectopic endometria of women with adenomyosis was significantly higher than that of normal women；the positive expression of vegf in eutopic endometria was significantly higher than that in ectopic endometria of women in the same group；the expression of vegf in eutopic endometria in secretory stage was significantly higher than that in eutopic endometria in proliferative stage.conclusion the abnormal expression of vegf in adenmyosis plays an important role in development of adenmoyosis.

［key words］ vascular endothelial growth factor;adenomyosis;immunohistochemistry

子宫腺肌症多发生于30～50岁的经产妇，约有15%患者合并子宫内膜异位症。近年，子宫腺肌症的发病有上升和年轻化的趋势，其确切发病机制至今尚不清楚。我们通过检测正常子宫内膜与子宫腺肌症异位与在位内膜组织中血管内皮生长因子（vegf）的表达并进行统计学分析，探讨vegf在子宫腺肌症发生发展中的作用。

1 对象与方法

1.1 研究对象 本研究收集德州市人民医院妇产科2005 年8 月～2007年8 月因子宫腺肌症而行子宫切除术的患者30例作为试验组，年龄27～45岁，平均36.5岁，术后病理检查均证实为子宫腺肌症，增殖期内膜14例，分泌期内膜16例。对照组为正常子宫内膜标本26例，其中增殖期内膜14例，分泌期内膜12例，年龄31～49岁，平均41岁。两组患者无其他内分泌疾病和内外科疾病，术前3个月未用过甾体类激素治疗。

1.2 化学试剂 vegf（浓缩型）为鼠抗人单克隆抗体，编号为sc-7269，美国santa cruz公司的产品（购自北京中山生物技术有限公司）。

1.3 实验方法 采用链霉素—过氧化物酶法（sp法）处理标本。用已知的阳性切片作阳性对照，pbs 代替一抗作阴性对照。

1.4 免疫组化结果判断 vegf 主要定位于上皮细胞、毛细血管内皮细胞的胞浆中，vegf蛋白染色阳性表达为棕黄色，主要存在于细胞浆，胞膜和胞浆同时着色亦为阳性。在高倍镜（×400）下对每张切片随机选择5个视野，计数200个细胞/视野，共计1 000个细胞，以阳性细胞数目的百分比，结合着色强度进行半定量评分。根据阳性细胞百分率及显色深浅分级：（1）阳性细胞百分率：无细胞显色或阳性细胞百分数<5%为0；5%～35%细胞显色为1；36%～65%细胞显色为2；≥66%细胞显色为3。（2）显色深浅:不显色或显色不清为0；浅黄色为1；棕黄色为2；深褐色为3。将二者评分相加除以2，作为该切片的最终评分，将0、0.5～1、1.5～2、2.5～3分分别定为阴性（-）、弱阳性（+）、阳性（++）、强阳性（+++） ［1］。

1.5 统计学方法 应用spss 11.0软件包进行统计学分析，计量资料采用t检验；计数资料采用χ2 检验；采用spearman 软件做等级相关性分析。p<0.05为差异有统计学意义，p<0.01为差异有显著统计学意义。

2 结果

2.1 异位内膜组织与正常内膜组织中vegf的表达 免疫组化研究表明，vegf蛋白阳性表达在子宫腺肌症患者的异位、在位内膜以及正常对照内膜的腺上皮细胞、间质细胞和血管内皮细胞的胞浆内，在上皮细胞的表达强于间质细胞。试验组在位内膜vegf的阳性表达率为83.3%，异位内膜阳性表达率为63.3%，均显著高于正常内膜组vegf的阳性表达率23.1%（p<0.05）；在位内膜中vegf的阳性表达明显高于同组异位内膜（p<0.05）。见表1。 表1 vegf在异位内膜与正常内膜中的表

2.2 血管内皮生长因子的表达与月经周期的关系在正常子宫内膜vegf表达阳性率增殖期为21.4%，分泌期为16.7%，两者比较差异无统计学意义（p>0.05）；子宫腺肌症在位内膜阳性表达率分泌期为93.3%，较增殖期73.3%高（p<0.05）。子宫肌腺症的异位组织对卵巢激素不敏感，大部分均为增殖期改变，故不分期。见表2。表2 血管内皮生长因子的表达与月经周期的关系

3 讨论

子宫腺肌症发病率高，发病年龄年轻化，其临床症状及并发症对女性健康和生育有重大影响，确诊依靠子宫切除术后的病理检查，因此临床诊断困难，常被忽略。目前其病因及发病机制尚不明确，guidi［2］用免疫组化染色发现子宫肌腺症的子宫内膜和肌层的血管生成活性显著升高。hirotaka［3］通过宫腔镜检查发现近50%的子宫肌腺症内膜有异常血管形成。以上研究说明血管生成因素在子宫肌腺症的发病中起了重要的作用。在众多的血管生长因子中，vegf是最有力的血管生长因子，它通过和血管内皮细胞的特异性受体结合，具有强大的促内皮增殖、促血管生长作用，它的生物学功能主要有：通过活化磷脂酶c和刺激第二信使的形成直接促进血管内皮c的有丝分裂，在核酸和蛋白水平诱导纤溶酶原的降解，参与细胞外蛋白水解和基膜的降解，有利于血管内皮细胞的迁移和增生［4］；增加血管通透性，促进包括纤维蛋白原在内的血浆蛋白的渗出，形成纤维素网格，为血管芽延伸生长提供良好基质。本研究结果发现在子宫肌腺症异位内膜及在位内膜组织中vegf的阳性表达均明显高于正常内膜组，并且在位内膜的vegf表达也显著高于异位内膜。提示在子宫腺肌症患者内膜中血管生成活跃，有利于其在宫腔外种植，vegf含量增高促内膜血管生成增多可能是异位内膜成功种植与生长的重要因素，也由此可见vegf在子宫腺肌症的发病机制中起着重要作用。有关的研究证明子宫内膜血管生成始于增殖期，增殖期和分泌早期内膜的螺旋动脉呈持续且缓慢的增殖，在分泌中、晚期，内膜的平滑肌细胞呈加速生长。本研究表明，正常子宫内膜vegf阳性表达增殖期与分泌期两者比较无显著性差异，而子宫腺肌症在位内膜阳性表达分泌期较增殖期显著升高，提示分泌期子宫内膜更易于种植。

【参考文献】

1 pepper ms，ferrara n，orci l，et al.potent synergism between vascular endothelial growth factor and basic fibroblast growth factor in the induction of angiogenesis in vitro.biochem biophys res commun，1992，189（5）：824.

2 guidi aj，abu jawdeh g，tognazzi k，et al.expression of vascular permeability factor（vascular endothelial growth factor）and its endometrial carcinoma.cancer，1996，78：454-460.

3 hirotaka o，tanaka t.stromal vascularization in the endometrium during adenomyosis.microsc res tech，2003，37（9）：539-541.

4 tou m，matsumoto t，bando h.vascular endothelial growth factor：its prognostic，predictive，and therapeutic inplications.lancet oncol，2001，2（11）：667.