转移抑制基因Kai1在肺癌中的表达及临床意义

[摘要] 目的：检测转移抑制基因Kai1的蛋白表达，探讨其与肺癌生物学行为的关系。方法：采用免疫组化SP法分别测定53例肺癌及17例正常肺脏新鲜冰冻组织中Kai1蛋白的表达。结果：53例肺癌中19例（36%）Kai1蛋白表达阳性，与正常肺脏（82%）相比，差异有非常显著性（P

[关键词] 肺癌；Kai1；转移

[中图分类号] R734.2[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2009）05（a）-019-02

Expression and clinical significance of metastasis suppressor gene Kai1 in lung cancer

GE Tong, QIN Hao, XU Xiujie, ZHANG Dapeng

(Department of Internal Medicine, the Second Hospital of Harbin City, Harbin150056, China)

[Abstract] Objective: To explore the expression and clinical significance of metastasis suppressor gene Kai1 in lung cancer. Methods: The expression of Kai1 protein in fresh freezing tissues from 53 patients with lung cancer and 17 normalcases were examined by immuno-histochemistry SP method. Results: Among 53 patients with lung cancer, 19 (36%) showed Kai1 expression, and a significant difference was shown in comparison of normal lung tissues (82%) (P

[Key words] Lung cancer; Kai1; Metastasis

肿瘤转移是癌症患者死亡的最主要的原因之一。Kai1基因是近年来发现的一种新的肿瘤转移抑制基因。Dong等[1]于1995年首次从人的染色体11p11.2中分离出该基因，并且证实Kai1在前列腺癌组织中低表达，在正常前列腺组织中高表达。随后几年人们又陆续研究了Kai1基因与其他肿瘤转移的关系，如结肠癌、膀胱癌及宫颈癌等。本研究用免疫组化方法研究53例肺癌组织中Kai1蛋白的表达情况，探讨其与肺癌的发生、发展及生物学行为的关系。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2002年5月～2007年11月我院呼吸科的53例肺癌组织，其中，小细胞肺癌36例，大细胞肺癌17例；高分化癌13例，中分化癌19例，低分化癌21例。并选择肺癌术中切除17例正常肺脏组织的标本作为对照。所有新鲜标本30 min内置于-80℃液氮中保存。

1.2 主要试剂与方法

将组织标本在低温恒冷切片机中切成4 μm厚的切片，丙酮固定5 min，空气干燥后采用SP法进行免疫组化染色。一抗采用美国BD生物公司生产的Kai1单抗，工作浓度为1∶500，DAB显色。PBS替代一抗作为阴性对照。所有组织标本同时切片行HE染色，经病理专家诊断确诊。

1.3 结果判断

染色阳性呈棕黄色，分布于上皮细胞膜及细胞连接处。每张切片随机选择5个视野，计算阳性上皮细胞占上皮细胞总数的百分率，并按阳性细胞百分数所占百分率将染色程度分为：①高表达（++），阳性细胞占40%以上；②中表达（+），阳性细胞数占10%～30%；③低表达（-），阳性细胞数占10%以下。

1.4 统计学方法

采用?字2检验，P

2 结果

2.1 Kai1蛋白在正常肺脏组织和肺癌组织中的表达

Kai1主要表达于上皮细胞膜及细胞连接处，细胞核及胞质几乎无染色，基质有少量阳性染色。在正常肺脏组织中棕黄染色较为连续，着色较深；肺癌组织中染色分布不均，染色间断。在正常肺脏和肺癌组织中的表达率分别为82%和36%，差异有统计学意义。结果见表1、图1、图2。

2.2 Kai1基因的表达与肺癌临床分期的关系

肺癌临床分期越晚，Kai1的表达率越低，经统计学分析差异有显著性，结果见表2。

2.3 Kai1基因的表达与肺癌癌细胞分化程度的关系

癌细胞分化程度越差，Kai1蛋白表达率越低，免疫组化着色浅淡，结果见表3。

3 讨论

Kai1作为肿瘤转移抑制基因自1995年首次由Dong[1]发现以来，已受到学者的广泛关注。现已发现，在人体多种组织中都有Kai1蛋白的表达，在前列腺组织中含量最为丰富，在肺脏组织中也有表达。对于Kai1在肺癌组织中的表达，国内未见相关报道，国外也鲜有报道，故本文对Kai1在肺癌中的表达作一初步探讨。

本实验中，可在正常肺细胞膜及细胞连接处观察到棕黄色染色，与Kai1蛋白定位于细胞膜上的结论基本相符。正常肺组织阳性表达率为82%，且有4例（24%）为强阳性，表现为细胞及细胞连接处有深棕黄染色，且较为连续。在53例肺癌组织中，阳性率仅为36%，且染色较前者浅，不连续，无一例强阳性。两者比较，有显著性差异。

本实验显示，在不同分化程度的肺癌组织中，随着分化程度的降低，Kai1蛋白阳性率降低，有显著性差异，说明Kai1的表达与病理分级呈负相关。随着肿瘤恶性程度的升高，其Kai1蛋白表达明显下降，并且细胞间的Kai1蛋白表达中断，使癌细胞间的粘连降低、松散，肿瘤细胞间同质性黏附下降，导致癌细胞容易脱离组织发生转移。在 Hashida等[2]对结肠癌的实验中也证实了这一点。

作为TM4SF家族的一员，Kai1定位于细胞膜上，其分子结构具有广泛的糖基化位点，参与调节细胞间的黏附[3]。当肝脏组织发生癌变，尤其是其恶性程度增高时，Kai1蛋白表达明显下降，并且细胞间Kai1表达中断，使癌细胞间的粘连降低、松散，导致癌细胞容易脱离组织造成转移[4]。由此可见，Kai1可以作为判断预后的指标之一。本实验中由于标本取自近年，故未做长期随访追踪，对样本的生存率未做统计，是本实验的一个缺憾。

综上所述，Kai1是影响肺癌细胞转移能力的一种相关基因，有可能成为肺癌转移潜能的一种检测指标。

[参考文献]

[1]Dong JT, Lamb PW, Rinker-Scdaeffer CW, et al. Kai1, a metastasis suppressor gene for prostate cancer on human chromosome 11p11.2 [J]. Science,1995,268:884-886.

[2]Hashida H, Takabayashi A, Tokuhare T, et al. Integrin alpha3 expression as a prognostic factor in colon cancer: association with MRP-1/CD9 and KAI1/CD82 [J]. Int J Cancer,2002,97(4):518-525.

[3]Hemler ME, Mannion BA, Berditchevski F, et al. Association of TM4SF proteins with integrins: relevance to cancer [J]. Biochim Biophys Acta,1996,1287:67-71.

[4]Monika S, Peter B, Gerhard B, et al. Downregulation of Kai1 metastasis suppressor protein is associated with a dismal prognosis in epithelial ovarian cancer [J]. Gynecol Oncol,2001,83(1):244-248.

（收稿日期：2009-01-07）