Livin基因与宫颈癌前病变及宫颈癌关系的研究

【摘要】 目的 探讨凋亡抑制基因 Livin与宫颈癌前病变及宫颈癌的关系。方法 64例宫颈癌、56例宫颈上皮内瘤变和 32例正常宫颈患者作为研究对象。用免疫组织化学 SABC法进行Livin 基因表达检测， 比较三者之间表达的差异， 探讨Livin 表达与正常宫颈、宫颈上皮内瘤变及宫颈癌患者的病理相关关系。结果 宫颈癌、宫颈上皮内瘤变及正常宫颈组织中 Livin的表达率分别为70.3%（45/64）、57.1%（32/56）、0（0/32）， 三者比较差异有统计学意义（P0.05）。Livin基因表达与宫颈癌的淋巴结转移及宫颈癌的临床分期具有相关性（r=0.56、0.52， P0.05）。结论 Livin 基因在宫颈癌的发生中具有抑制肿瘤细胞凋亡的作用， 可以做为宫颈癌诊断及预后的相关指标。

【关键词】 Livin基因；宫颈上皮内瘤变；宫颈癌

DOI：10.14163/ki.11-5547/r.2016.16.070

Livin是近年来发现的人类凋亡抑制蛋白 （IAP）家族的新成员之一， 认为与肿瘤的发生、进展及预后有密切联系。Livin蛋白能够与 Caspase蛋白结合， 抑制细胞凋亡， 对Livin研究在肿瘤发生、发展及预后有着重要的作用[1]。本研究拟采用免疫组化方法探讨 Livin在宫颈癌组织中及正常宫颈组织中的表达， 并研究其与年龄、组织类型、病理分级、临床分期、淋巴结转移等临床生物学行为及预后之间的关系和其临床意义， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取 2004～2012年本院治疗的 64例宫颈癌患者， 年龄 35～72岁， 平均年龄 （51.7±6.8）岁， 组织学分型为宫颈鳞癌；临床分期：Ⅱa期14例， Ⅱb期8例， Ⅲa期42例；病理分型：溃疡型 8例， 结节型16例， 菜花型 24例， 混合型16例。宫颈上皮内瘤变患者56例， 另选取 32例正常宫颈组织患者作为对照。

1. 2 实验方法 切取活组织检查标本， 用 10%甲醛固定， 石蜡包埋后切片。采用SABC。一抗为兔抗人 Livin多克隆抗体 （武汉博士德公司）， 用 PBS液作为阴性对照。采用免疫组化染色。免疫组化方法参照 SABC试剂盒说明进行， Livin 多克隆抗体按 1∶50 稀释， 主要试剂为 Livin 多克隆兔抗人抗体， SABC试剂盒 （武汉博士德公司）。

1. 3 评价标准 观察宫颈上皮组织或宫颈癌组织切片病变位置染色， 参考 Kawasaki 等[2]报道的方法计算各指标表达程度， 依染色程度将阳性信号分为 3类 ：染色强度弱、染色强度强、染色强度中等。

1. 4 统计学方法 采用 SPSS19.0统计学软件进行统计分析。计数资料以率 （%）表示， 采用 χ2检验；相关性采用 Spearman相关分析。P

2 结果

2. 1 Livin表达情况 Livin的阳性表达为棕黄色阳性反应， 在细胞胞浆及少部分胞核也有不同程度着色。宫颈癌、宫颈上皮内瘤变及正常宫颈组织中 Livin的表达率分别为70.3%（45/64）、57.1%（32/56）、0（0/32）， 三者比较差异有统计学意义（P0.05）。

2. 2 Livin的相关性 Livin基因表达与宫颈癌的淋巴结转移及宫颈癌的临床分期具有相关性（r=0.56、0.52， P0.05）。

3 讨论

Livin是新发现的人类凋亡抑制蛋白， 同其他凋亡抑制蛋白相似， Livin可通过抑制凋亡抑制通路中 Caspase 3、7的活性， 发挥抑制肿瘤细胞凋亡的作用， 在已经发现的一些肿瘤组织如乳腺癌、胃肠癌等肿瘤组织中高表达。凋亡抑制蛋白是细胞凋亡抑制因子家族新成员， 它能够抑制细胞凋亡， 促进肿瘤细胞形成及增长[3]。

本文通过对宫颈癌 Livin基因表达与临床病理的关系研究表明， 宫颈癌的肿瘤病理分型、病理分级与 Livin基因表达程度无明显相关关系（P>0.05）；Livin基因表达与宫颈癌的淋巴结转移及宫颈癌的临床分期具有相关性（P

在淋巴结转移的宫颈癌病例中， 宫颈癌组织中 Livin 高表达， 提示对于宫颈癌组织中 Livin 高表达的病例， 应实施手术、化疗、生物治疗等综合治疗， 最大程度提高肿瘤生存率。凋亡抑制蛋白 Livin在宫颈癌的演近过程中， 抑制细胞凋亡活动增强， 对其进行检测可以做为判定宫颈癌发生及预后的重要指标。目前对 Livin 的研究仍有许多问题尚未阐明， 通过反义阻断或 Si-RNA技术， 降低 Livin 表达， 能否逆转宫颈癌细胞增殖， 促进肿瘤细胞凋亡， 成为宫颈癌治疗的新途径， 有待进一步研究证实。

总之， Livin 基因在宫颈癌的发生中具有抑制肿瘤细胞凋亡的作用， 可以做为宫颈癌诊断及预后的相关指标。

参考文献

[1] Ka H， Hunt JS. Temporal and spatial patterns of expression of inhibitors of apoptosis in human placentas. Am J Pathol， 2003， 163（2）：413-422.

[2] Kawasaki H， Altieri DC， Lu CD， et al. Inhibition of apoptosis by survivin predicts shorter survival rates in colorectal cancer. Cancer Res， 1998， 58（22）：5071-5074.

[3] 吴晓梅， 袁涛. Survivin、Livin、CD44v6在宫颈癌以及癌前病变中的表达及其临床意义. 中国老年学杂志， 2014， 34（3）：660-662.

[收稿日期：2016-01-26]