六种植物的提取物抑菌活性研究

摘要：采用生长速率法测定醉鱼草、葛藤、鸡血藤、狼毒、洋金花、野麻６种植物的7种样品提取物对小麦赤霉病菌（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ）、棉花黄萎病菌（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ）、小麦纹枯病菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｃｅｒｅａｌｉｓ）、苹果炭疽病菌（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａ ｃｉｎｇｕｌａｔａ）、水稻纹枯病菌（Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ）５种植物病原菌的离体抑菌活性，结果表明，狼毒根提取物对水稻纹枯病菌、小麦纹枯病菌和小麦赤霉病菌有较好的抑制作用，７２ ｈ的抑制率分别为９７．８２％、９４．２９％和８５．９６％；洋金花种子提取物对小麦赤霉病菌的抑制率达到１００％；醉鱼草花序提取物对水稻纹枯病菌的抑制率为６１．２６％。试验结果表明，狼毒、洋金花和醉鱼草等３种植物的抑菌活性值得进一步研究。

关键词：植物提取物；抑菌活性；生长速率法

中图分类号：Ｓ４８２．２９文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）14－2880-02

Study on Antifungal Activity of the Extracts of 6 Plants

ＨU Ｌｉｎ－ｆｅｎｇ，ＨAN Ｈｕｉ－ｊｕａｎ，ＨOU Ｊｉａｎ－ｈｕ

（Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｈｅｎａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｘｉｎｘｉａｎｇ ４５３００３， Ｈｅｎａｎ， Ｃｈｉｎａ ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ 7 ｅｘｔｒａｃｔｓ of 6 plants of Buddleja lindleyana， Pueraria lobata，Millettia dielsiana，Stellera chamaejasme，Datura metel，Boehmeria gracilis，ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ａｇａｉｎｓｔ ５ ｓｐｅｃｉｅｓ ｏｆ ｐｌａｎｔ ｐａｔｈｏｇｅｎs of Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ，Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ，Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｃｅｒｅａｌｉｓ，Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａ ｃｉｎｇｕｌａｔａ，Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ ｂｙ ｍｅａｓｕｒｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅｓ ｏｆ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｒｏｏｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ Ｓｔｅｌｌｅｒａ ｃｈａｍａｅｊａｓｍｅ ｈａd ｇｏｏｄ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｇａｉｎｓｔ Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ，Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｃｅｒｅａｌｉｓ，Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ． Ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒａｔｅs ｗｅｒｅ ９７．８２％，９４．２９％ ａｎｄ ８５．９６％ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｆｔｅｒ ７２ｈ． Ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｓｅｅｄ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ｄａｔｕｒａ ｍｅｔｅｌ ｗａｓ １００％ ａｇａｉｎｓｔ Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ， ａｎｄ ｗｈｉｃｈ ｏｆ Ｂｕｄｄｌｅｊａ ｌｉｎｄｌｅｙａｎａ ｅｘｔｒａｃｔ ｗａｓ ６１．２６％ ａｇａｉｎｓｔ Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ． Ａｌｌ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ Ｓｔｅｌｌｅｒａ ｃｈａｍａｅｊａｓｍｅ， Ｄａｔｕｒａ ｍｅｔｅｌ ａｎｄ Ｂｕｄｄｌｅｊａ ｌｉｎｄｌｅｙａｎａ ｗｅｒｅ ｗｏｒｔｈ ｆｕｒｔｈｅｒ ｒｅｓｅａｒｃｈｉｎｇ ｏｎ ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｐｌａｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ； ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ； ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ ｍｅｔｈｏｄ

普遍使用的化学农药对环境造成了一定的危害，从安全环保的角度来研制开发天然源农药成为一个研究方向。对植物及其抗菌活性物质进行深入的研究，是开发和研制新型杀菌剂的重要研究领域之一［１－４］。为了寻找具有杀菌或抑菌活性的植物活性物质，试验测定了６种植物的7种样品提取物对５种植物病原菌的抑菌活性，现将结果报告如下。

１材料

１．１供试植物

６种植物于２００９年采自河南新乡地区，供试植物样品具体情况见表１。植物样品于室内晾干、粉碎后密封，置于－４０℃冰柜中冷冻保存。

１．２供试菌种

５种植物病原为小麦赤霉病菌（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ）、棉花黄萎病菌（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ）、小麦纹枯病菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｃｅｒｅａｌｉｓ）、苹果炭疽病菌（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａ ｃｉｎｇｕｌａｔａ）、水稻纹枯病菌（Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ），菌种由河南科技学院制药工程生物测定实验室提供，试验前１周转接至平板培养皿中培养备用。

２试验方法

２．１供试样品提取物的制备

供试植物样品采用溶剂冷浸法提取。向粉碎好的植物样品中加入９０％乙醇，样品质量∶溶剂体积（ｇ／ｍＬ）为１∶５，冷浸３ ｄ后过滤。重复浸提３次，合并３次滤液浓缩得各样品的乙醇提取浸膏。浸膏密封，置于４℃冰箱保存备用。

２．２抑菌活性测定

采用生长速率法［５，６］测定提取物对病原菌的离体抑菌活性。将供试样品浸膏用溶剂（丙酮或水）配制成适当浓度溶液，与培养基混匀制成含药平板，使含药平板终浓度为每毫升含０．１ ｇ植物样品提取物。试验设置对应溶剂（丙酮或水）对照，每处理重复３次。用直径４ ｍｍ打孔器从病菌培养平板边缘打制菌饼，按无菌操作将菌饼倒扣接种于含药平板中央。２５℃±２℃培养箱中培养７２ ｈ后，用十字交叉法测量菌落直径。

２．３数据分析

按以下算式计算菌丝生长抑制率：

菌落生长直径＝菌落直径－菌饼直径（４mｍ）

采用ＳＰＳＳ１３．０进行数据统计分析，数据间多重比较采用Ｄｕｎｃａｎ’ｓ新复极差法。

３结果与分析

采用生长速率法测定7种供试样品提取物对５种病原菌的离体抑菌活性，抑菌效果见表２。结果表明，狼毒根提取物对水稻纹枯病菌、小麦纹枯病菌和小麦赤霉病菌有很好的抑制作用，抑制率分别为９７．８２％，９４．２９％和８５．９６％；洋金花种子提取物能完全抑制小麦赤霉病菌的生长；醉鱼草花序提取物除对水稻纹枯病菌抑制率达到６１．２６％外，对其余供试菌的抑制率均低于５０％。供试样品中葛藤茎、鸡血藤全株和野麻种子提取物抑菌效果较差。

4讨论

试验通过测定６种植物的7种样品提取物对５种植物病菌的抑制作用，从中筛选出具有较好杀菌活性的狼毒根和洋金花种子。狼毒含多种活性成分，在杀虫活性方面已经开展了较为深入的研究［７，８］，但对其抑菌活性的研究还处于起步阶段；洋金花的生物活性物质研究主要集中在其花组织上，通过其种子的抑菌活性试验，发现其乙醇提取物在供试浓度下能够完全抑制小麦赤霉病菌的生长。因此对狼毒和洋金花中的抑菌活性有必要开展深入研究，可采用活性跟踪与植化分离相结合的方法，明确其抑菌活性成分，为其在农用杀菌剂方面的研发提供依据。

参考文献：

［１］ 吴光旭，何庭玉，刘爱媛，等．植物中抗病原真菌的活性物质［Ｊ］．植物学通报，２００４，２１（３）：３６７－３７５．

［２］ 冯俊涛，祝木金， 于平儒， 等． 西北地区植物源杀菌剂初步筛选［Ｊ］． 西北农林科技大学学报（自然科学版），２００２，３０（６）：１２９－１３３．

［３］ 胡林峰，冯俊涛，张兴，等．孜然种子中杀菌活性成分分离及结构鉴定［Ｊ］．农药学学报，２００７，９（４）：３３０－３３４．

［４］ 刘海燕，高微微，樊 瑛，等．细辛挥发油抗植物病原真菌活性初步研究［Ｊ］．植物病理学报，２００７，３７（１）：９５－９８．

［５］ 方中达．植病研究方法［Ｍ］．第三版.北京：中国农业出版社，１９９８．

［６］ 慕立义．植物化学保护研究方法［Ｍ］．北京：中国农业出版社，１９９４．

［７］ 王伟，仝宝胜，师光禄，等．瑞香狼毒粗提物对朱砂叶螨的生物活性［Ｊ］．中国农学通报，２０１０，２６（１１）：３６－３９．

［８］ 张国洲，徐汉虹．瑞香狼毒对菜粉蝶生物活性的研究［Ｊ］．西北农业学报，２００２，１１（３）：６７－７０．

注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文

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