三种方法检测尿液中白细胞\红细胞结果分析

[摘要] 目的:探讨UF-50全自动尿沉渣分析仪、H-500尿液分析仪与显微镜检查尿中红细胞、白细胞的方法及其影响因素。方法:用三种方法分别对5 459例尿液标本进行检测并对结果进行分析比较。结果:三种方法检测红细胞的阳性率分别为32.6%、44.9%、25.8%,检测白细胞的阳性率分别为39.1%、35.1%、36.9%;UF-50沉渣仪法检测红细胞的假阳性率为20.7%,检测白细胞的假阳性率为5.6%。结论:UF-50分析仪与H-500分析仪检测尿中红细胞、白细胞准确率较高,但存在假阳性或假阴性,须结合显微镜镜检。

[关键词] UF-50全自动尿沉渣分析仪;H-500尿液分析仪;影响因素

[中图分类号] R446.12[文献标识码] B[文章编号] 1673-7210(2010)04(c)-103-02

UF-50全自动尿沉渣分析仪与H-500尿液分析仪使用方便、快速、准确率较高,但在实际工作中发现它们有一定的误差,现报道如下:

1 材料与方法

1.1 材料

收集我院住院患者晨尿20 ml于2 h内送检。2009年1～6月共收集尿液标本5 459例,其中,男3 026例,女2 433例;年龄1 d～108岁。

1.2 仪器与试剂

日本Sysmax公司生产的UF-50全自动尿沉渣分析仪及其配套试剂和质控品;DIRUI生产的H-500尿液分析仪及配套试剂;日本欧林巴斯光学工业株式会社生产的Olympus显微镜,普通离心机和带刻度试管。

1.3 方法

工作前做仪器的每日质控,质控在控时方进行标本的检测。将10 ml尿液标本混匀后先在H-500尿液分析仪上测试,再在UF-50尿沉渣分析仪上测试,最后以相对离心力400 g离心5 min,弃去上清液,留取0.2 ml尿液并混匀尿沉渣,取20 μl涂片,用18 mm×18 mm加盖玻片后镜检,观察细胞成分为10个高倍视野取均值。三种试验均在2 h内完成,超出H-500、UF-50分析仪报警限值和显微镜镜检的正常参考值范围的结果即分别为各自的阳性结果。

1.4 正常参考值

UF-50尿沉渣分析仪报警限值,红细胞:男性0～12个/μl,女性0～24个/μl,白细胞:男性0～12个/μl,女性0～25个/μl。显微镜镜检正常参考值范围:红细胞0～3个/HP,白细胞0～5个/HP。

2 结果

UF-50的检测简称沉渣仪法,H-500的检测简称干化学法,显微镜镜检简称镜检法,三种方法的检测结果见表1。UF-50尿沉渣分析仪检测5 459例尿液标本假阳性结果(以镜检法为“金标准”,与之不符的阳性可视为假阳性)分析见表2。UF-50尿沉渣分析仪检测5 459例尿液标本假阳性结果影响因素分析见表3。

3 讨论

H-500尿液分析仪及其配套使用的H系列尿液分析试纸条检测白细胞的原理是吡咯酚酯在中性粒细胞中酯酶的水解作用下,产生游离酚,游离酚与苯基重氮盐偶联,生成紫色染料,根据试纸条紫色的有无和深浅来定性或定量白细胞的有无和多少,但这受到一定因素的影响:淋巴细胞和单核细胞不含酯酶,不能产生游离酚而呈假阴性;高比重尿、淋巴细胞尿、高葡萄糖尿及室温20℃以下均可造成白细胞结果偏低或呈假阴性[1];另外,某些大剂量的药物,如头孢霉素和庆大霉素可抑制显色反应而致假阴性[2]。检测红细胞的原理是血红蛋白具有过氧化物酶样活性,可使过氧化物分解新生态氧,新生态氧氧化指示剂,使指示剂出现颜色变化,根据试纸条颜色的有无和深浅来定性或定量红细胞的有无和多少。红细胞破碎和溶解及血红蛋白释放入尿中引起阳性反应(镜下看不到完整的红细胞);肌红蛋白也具有过氧化物酶活性而呈假阳性;尿中含有的对热不稳定的酶或细菌(白色念珠菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌)释放的过氧化物酶活性物质或由于细菌代谢繁殖过程中合成的触酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶而产生假阳性结果[3];某些氧化性污染物,例如次氯酸盐会导致假阳性;大量的维生素C可致假阴性,某些药物,如利福平可降低红细胞的反应性而出现假阴性。本研究显示白细胞检测镜检法比干化学法有更高的阳性率,红细胞检测干化学法比镜检法有更高的阳性率,这与有关报道基本一致[4-5]。

UF-50全自动尿沉渣分析仪是使用全自动流式细胞技术和电阻抗原理,通过对前向散射光波形(散射光强度和散射光脉冲宽度)、荧光波形(荧光强度和荧光脉冲宽度)和电阻抗值的大小综合分析,得出细胞的形态、细胞横截面积、染色片段的长度、细胞容积等信息并绘出直方图和散射图。仪器通过分析每个细胞信号波形的特性来对其进行分类[6]。但各检测项目和其相应影响因素在形态、大小、染色性方面有相似之处。因此,该机器还不能严格区分各类成分。本结果表2中反映尿中红细胞假阳性率较高,而白细胞假阳性率较低;表3表明红细胞的假阳性主要由结晶(哑铃形草酸钙结晶居多)、酵母样菌、细菌和(男性尿中)引起。草酸钙结晶、酵母样菌、和成团的细菌与尿中红细胞具有相似的荧光和前向散射光特性,造成仪器误判。本市地处南方,天气炎热而潮湿,尿液久置易生菌,酵母样菌引起的假阳性有相当高的比率,达到37.8%。尿中白细胞假阳性主要由结晶、小圆上皮细胞、细菌和红细胞过多引起,分别达到34.5%、33.6%、22.7%和9.2%,原理和红细胞相似。

综上所述,H-500尿液分析仪与UF-50尿沉渣分析仪作为自动化仪器,与传统手工法相比,具有操作规范化、检测自动化、总体准确性、重复性好,同时检测多个项目、高效快速等优点,但在检测红细胞和白细胞的项目中,由于各自检测原理技术的原因,分别存在一定数量的假阳性和(或)假阴性,必要时应结合手工显微镜镜检以保证尿液分析的检验质量。

[参考文献]

[1]丛玉隆.尿液沉渣标准化的建议[J].中华检验医学杂志,2002,25(4):249-250.

[2]李卫滨,王德春,林宝顺,等.尿液分析仪检测假阴性的问题探讨[J].临床检验杂志,2000,18(1):47.

[3]徐银萍,王胜奎.尿液分析仪与尿沉渣镜检两种方法的比较分析[J].现代检验医学杂志,2006,21(3):71-72.

[4]桂满元.尿红细胞3种检测方法的结果差异及影响因素分析[J].检验医学与临床,2008,5(2):138.

[5]李颖.尿液分析仪不能取代手工检验[J].海南医学,2008,19(2):122.

[6]彭黎明,王兰兰.检验医学自动化及临床应用[M].北京:人民卫生出版社,2003:845-847.

(收稿日期:2010-01-15)