不同试剂检测血清免疫球蛋白结果的可比性及偏倚分析

摘要：目的 探讨不同试剂检测血清免疫球蛋白结果的可比性及偏倚分析。方法 设中生北控公司液体双剂型血清免疫球蛋白试剂（X）为对照组，北京万泰公司59661型血清免疫球蛋白试剂（Y）为实验组，两组试剂在东芝a1200生化分析仪上测定免疫球蛋白IgG、IgM、IgA，用线性回归统计法分析实验组和对照组检测结果进行方法间的对比试验，判断不同试剂的临床可接受性。结果 IgG、IgM、IgA项目检测结果的偏差是在可以接受范围之内的，这说明中生北控液体双剂型gl诊断试剂和北京万泰59661型gl诊断试剂测定的结果基本相同。结论 本次研究以NC-CLS，EP9-A2相关文件为依据，在检测试验中结合实际情况，使用北京万泰59661型gl诊断试剂和中生北控液体双剂型gl诊断试剂对病人新鲜血清检测3个免疫球蛋白，最后结果行比对及偏倚评估，为多种不同免疫球蛋白检测试剂可靠性临床应用提供科学依据。

关键词：试剂；血清免疫球蛋白；偏倚评估

血清免疫球蛋白的英文简称是gl，其是由浆细胞分泌合成的球蛋白，具有抗体样结构和抗体活，在发生感染时合成可增至平时7倍多；所以人体的gl变化可以用来作为检测人体免疫状态的可靠指标.随着生物医学的发展，中国已有许多试剂厂家制造出不同关于检测免疫球蛋白的试剂，但是其检测效果各有不同，如何分析比较各试剂检验血清免疫球蛋白结果一直人们探讨的问题.本文依EP9-A（美国临床和美国实验室标准协会指南文件）[1]标准对免疫球蛋白进行两种试剂检测，最后再比较和偏倚评估，现作以下报告。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集来我院就诊和住院的患者无黄疸、无溶血的新鲜血清。

1.2 仪器仪器与试剂 采用东芝a1200等生化分析仪。两组试剂为中生北控生物科技股份有限公司的液体双剂型免疫球蛋白诊断试剂和北京万泰生物药业有限公司的59661型血清免疫球蛋白试剂。中生北控液体双剂型gl诊断试剂批号：IgG为109005 ；IgA为109010；IgM为109015.万泰59661型gl诊断试剂批号：IgG为T-IgG；IgA为T-IgA；IgM为T-IgM.两种试剂都用免疫比浊法做测定。

1.3方法 对照组是用中生北控液体双剂型gl诊断试剂（X），实验组是用北京万泰59661型gl诊断试剂（Y），实施方法间的对比试验。各选取10名患者血清在不同浓度值作为标本，经2种试剂液分别校准后用RANDOX进行特殊蛋白质控品，最后实施检测，具体如下：10份血清每份各分为2份，用2种试剂分别在东芝a1200生化分析仪对IgG、IgA、IgM进行测定2次。每次测定在2h完成，第2次方法是和第1次测定次序相反，间隔大于2h，连续测定5d，取均值对两份测定值进行比较。

1.4统计 按EP9-A2标准对2种检测试剂测定结果进行分析。数据用Excel2010录入，SPSS15.0统计分析。

2 结果

2.1试剂检测均值结果 中生北控gl诊断试剂对IgG、IgM、IgA检测均值结果分别为12.701、1.602、2.520g/L.北京万泰gl诊断试剂对IgG、IgM、IgA检测均值结果分别为13.149、1.490、2.798g/L。

2.2 重复性检查 计算X和Y各两次测定差值；2次Y测定差值和2次X测定差值的平均值；2次Y测定差值的平均值。最后得到2次X测定IgG、IgM、IgA对应标准化值为0.00790、0.0251、0.0305；2次Y测定IgG、IgM、IgA对应标准化值为0.00541、0.0271、0.0179。方法Y和X测定值以4和4作为控制限，观测其两组标准化值都在控制限之内，表明了两组测定方法重复性都较好，相关性实验的要求符合。

2.3离群值检查 计算Y和X之间的相对偏差、绝对偏差，再计算出IgG、IgA、IgM相关绝对偏差平均值和相对偏差平均值分别为0.769和0.069； 0.331和0.146；0.141和0.092。X和Y之间的相对偏差和绝对偏差都在范围之间，表明离群值无存在。

2.4线性回归和散点图分析 经SPSS15.0统计导入数据，分析散点图和线性回归。统计得关系为IgG：Y=0.20+1.023X，r=0.991；IgA：Y=0.189+1.038 X，r=0.987；IgM：Y=-0.178+0.938 X，r=0.987。从结果和相关散点图可以知道，两组试剂免疫球蛋白测定值线性关系良好。

2.5可接受性能评价和计算标准误差 测定两种试剂结果相关系数值大于0.981，回归统计的截距和斜率都可靠，分析可接受性偏倚和系统误差可以用回归统计方法进行计算。据IgG、IgM、IgA回归直线方程，计算两组试剂测定相对偏差，评估试剂在临床上可接受性程度。经RANDOX特殊蛋白质处理控品的两种试剂实施检测累计得出标准差作为可否为临床接受偏倚判断。结果表明，两组试剂都具有临床接受偏倚。

3 讨论

生物试剂相关产业飞速发展，其中临床医学诊断试剂实验不可缺少的项目就是多种诊断试剂检测同一项目的结果要进行偏倚评估和可比性检验，这保障了不同种试剂测定结果间的互认。但中国相关实验室系统及生产检验试剂技术并不完善，多数按照自己实际情况选择试剂、仪器、质控和操作进行检测。如何寻求检测结果可比性和溯源性，是个现实问题。本文2种试剂对IgG、IgM、IgA测定方法比对及偏倚评估是严格按EP9-A2通过实现。笔者经试验发现，IgG、IgM、IgA项目检测结果的偏差是在可以接受范围之内的，这说明中生北控gl诊断试剂和北京万泰gl诊断试剂测定的结果基本相同。

本次研究以NC-CLS，EP9-A2相关文件为依据，在检测试验中结合实际情况，使用万泰检测试剂和执诚诊断试剂对病人新鲜血清检测3个免疫球蛋白，最后结果行比对及偏倚评估，为多种不同免疫球蛋白检测试剂可靠性临床应用提供科学依据。

参考文献：

[1]The National Conmmittee for Clinical Laboratory Stand-ards.Method Comparison and Bias Estimation Using Pa-tient Samale；Approved guidelinesecond edition[S].NC-CLS，EP9-A2，2002.