DAN修复基因MGMT、XRCC1在胃癌中表达的基础研究

【摘要】目的探究DNA修复基因mgmt、xrcc1在胃癌中的表达和意义。方法通过免疫组化检测胃癌组织及正常组织中DNA修复基因MGMT、XRCC1的表达情况，将测定的结果进行分析比较。结果通过对两种组织的免疫组化检测情况进行分析发现，DNA修复基因MGMT在胃癌组织中的表达率为36.67%，明显低于正常组织，而XRCC1的表达率为86.67%，明显高于正常组织，两组的结果差异显著，具有统计学意义（p

【关键词】MGMT；XRCC1；胃癌 文章编号：1004-7484（2013）-12-6946-02

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，占癌症相关性死亡第二位，大约70%的患者就诊时已经有淋巴结转移，中位总生存期约16.7个月。胃癌的发生同其他类型的恶性肿瘤一样是一个多步骤的过程，涉及原癌基因的突变、抑癌基因的失活等因素，细胞对损伤积累到一定的程度便出现了癌变。MGMT是一种修复因烷化剂损伤的DNA的蛋白酶，可以保护细胞避免受到烷基类的毒害作用，以免细胞长期受到损害而导致恶性癌变；XRCC1是一种DNA修复基因，它主要负责参与碱基切除修复，以免DNA损伤保留过多造成恶性癌变[1]。本研究对免疫组化法测定的胃癌组织与正常组织中MGMT、XRCC1的表达情况进行了分析比较，现报告如下。

1资料与方法

1.1研究对象本研究中的60例标本均为我院2010年9月至2011年12月期间经外科手术切除、经病理科核实确诊胃腺癌的标本，组织分化程度不同。其中男性68例，女性32例，年龄在51到71岁之间，平均年龄60.5岁，中位年龄58.5岁。所有患者均未进行放疗或者化疗并且没有发现癌组织的淋巴结转移或远处转移。同期60例癌旁正常组织作对照。

1.2方法所选胃癌组织与正常组织均用10%的甲醛溶液固定，脱水后用石蜡包埋，然后切成厚度为5μm的切片，对这些切片进行常规HE染色和SP免疫组化染色。取已知的阳性切片作对照，PBS代替一抗作为阴性对照。

1.3所用试剂SP试剂盒（福州迈新生物技术开发有限公司生产）；XRCC1鼠单克隆抗体（美国Neomarks公司，工作浓度为1：100）；MGMT鼠单克隆抗体（美国Neomarks公司，工作浓度为1：200）。

1.4结果判定胞核和/或胞浆中出现棕黄色颗粒者为阳性细胞；阳性细胞占切片总数≤30%为阴性，>30%为阳性。

1.5统计学方法所得到的数据均采用SPSS13.0统计软件进行分析处理，采用X2检验对相关数据进行比较分析，p

2结果

显微镜下观察，胃癌组织中出现较多的棕黄色颗粒，而正常胃组织中细胞内一般呈无色，个别为淡黄色。在正常的胃组织中，DNA修复基因MGMT、XRCC1的阳性表达率分别是63.33%、13.33%；在胃癌组织中，DNA修复基因MGMT、XRCC1的阳性表达率分别是36.67%、86.67%，二者具有显著差异，差异具有统计学意义（p

3讨论

早期胃癌一般无明显的临床症状，一经发现多处于中晚期，一般早期胃癌患者因上腹部不适、疼痛等去医院就诊，通常都被误诊为胃炎、胃溃疡等疾病进行治疗，这说明依据临床症状、体征很难判断胃癌的发生，需要更具体形象的检查结果来说明问题。从另一个角度说，胃癌或其他恶性肿瘤的发生都是由于各种损伤的积累最终导致细胞发生癌变。机体的组织、器官都是由细胞构成，因此，找寻疾病的根源应该从构成机体最基本的结构细胞着手进行研究。恶性肿瘤的发生原因无外乎原癌基因的激活、抑癌基因失活、突变等等，这些原因都指向一个方向――基因。细胞中各种机制有序进行，酶反应的发生等都是由基因控制的，基因通过引导蛋白质的合成来表达一系列信息，调控细胞的正常有序的活动。一旦基因发生突变或受到抑制，其所控制的程序或引导合成的产物就会出现差错，最终导致各种恶性病变出现[1]。本研究中针对DNA损伤修复基因MGMT、XRCC1在胃癌组织中的表达进行了分析，结果发现在胃癌组织中前者低表达，后者高表达，都出现了异常的表达率。XRCC1基因位于19q13.2，长度为31.9kb，在其转录起始上游有TATA序列，主要参与碱基切除修复；MGMT位于10q26，长度为170kb，它的启动子缺少TATA序列，但是某些区域富含GC序列，其第4外显子编码的高度保守区含烷基受体，是蛋白酶的活性部位，可以将烷化剂上的甲基与自身结合从而防止细胞受到烷化剂的损伤[2-3]。结合二者各自的功能，可以看出二者的异常表达使细胞的碱基切除修复功能过强而同时对烷化剂的毒害抵抗作用减弱，均会引起细胞的异常，从而成为诱发癌变的危险因素。目前，对二者的研究发现，XRCC1的异常表达存在于多种恶性肿瘤中，对其的研究多聚焦于肿瘤易发性和其多肽性两个方面；而对MGMT的研究发现其甲基化对判断胃癌的预后有重要作用[4-5]。随着科技的发展和医疗检测水平的不断提高，免疫组化技术、基因检测等先进检测技术不断发展并逐渐扩大了应用范围，这使得疾病的诊断与预防有了新的方向。尤其在恶性肿瘤领域，当有轻微临床症状出现时，如果增加对前来就诊患者患病部位组织的基因检测和相关检查，早期发现的可能性则会大大提高。由于症状的发生是通过细胞、组织和器官表现出来的，而这一切异常的源头在于基因发生损伤，因此在疾病诊断与防治领域从基因角度出发具有不可估量的前景。综上所述，MGMT、XRCC1在胃癌组织中的表达可以作为研究胃癌发生和治疗的重要因素，并且这种从基因着手研究恶性肿瘤的思路具有一定的科学性。

参考文献

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