南烛化学成分研究

[摘要] 对药食两用植物南烛的化学成分进行了研究。利用大孔吸附树脂、反相硅胶柱色谱和制备型HPLC等色谱技术从南烛枝叶中分离得到11个糖苷类化合物，运用质谱、核磁等波谱技术鉴定其结构分别为10-O-反式对羟基桂皮酰-6α-羟基-二氢水晶兰苷（10-O-trans-p-coumaroyl-6α-hydroxyl-dihydromonotropein，1），10-O-顺式对羟基桂皮酰-6α-羟基-二氢水晶兰苷（10-O-cis-p-coumaroyl-6α-hydroxyl-dihydromonotropein，2），乌饭树苷（vaccinoside，3），10-O-顺式对羟基桂皮酰-水晶兰苷（10-O-cis-p-coumaroyl monotropein，4），异落叶松脂素-9-O-木糖苷（isolariciresinol-9-O-β-D-xyloside，5），鸢尾苷（tectoridin，6），vicenin-3（7），槲皮素-3-O-鼠李糖苷（quercetin-3-O-α-L-rhamnoside，8），槲皮素-3-O-阿拉伯糖苷（quercetin-3-O-α-L-arabinopyranoside，9），槲皮素-3-O-半乳糖苷（quercetin-3-O-β-D-galactopyranoside，10），槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷（quercetin-3-O-β-D-glucuronide，11）。其中化合物1和2为新化合物，4，6，7为首次从该属植物中分离得到的已知化合物。

[关键词] 南烛；越桔属；化学成分

南烛Vaccinium bracteatum Thunb.，为杜鹃花科Ericaceae越桔属Vaccinium植物，又名乌饭树、米饭树、苞越桔、米饭花等。其果实成熟后酸甜，可食；采摘枝、叶渍汁浸米，煮成“乌饭”，江南一带民间在寒食节（农历四月）有煮食乌饭的习惯；果实入药，名“南烛子”，有强筋益气、固精之效。南烛在我国分布广泛，主产于华东、华中、华南至西南[1]。

作者对南烛枝叶的化学成分进行了研究，从中分离鉴定了11个糖苷类化合物，包括4个环烯醚萜苷，10-O-反式对羟基桂皮酰-6α-羟基-二氢水晶兰苷（10-O-trans-p-coumaroyl-6α-hydroxyl-dihydromonotropein，1），10-O-顺式对羟基桂皮酰-6α-羟基-二氢水晶兰苷（10-O-cis-p-coumaroyl-6α-hydroxyl-dihydromonotropein，2），乌饭树苷（vaccinoside，3），10-O-顺式对羟基桂皮酰-水晶兰苷（10-O-cis-p-coumaroyl monotropein，4）；1个木脂素苷，异落叶松脂素-9-O-木糖苷（isolariciresinol-9-O-β-D-xyloside，5）；1个异黄酮苷，鸢尾苷（tectoridin，6）；和5个黄酮苷，vicenin-3（7），槲皮素-3-O-鼠李糖苷（quercetin-3-O-α-L- rhamnoside，8），槲皮素-3-O-阿拉伯糖苷（quercetin-3-O-α-L-arabinopyranoside，9），槲皮素-3-O-半乳糖苷（quercetin-3-O-β-D-galactopyranoside，10），槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷（quercetin-3-O-β-D-glucuronide，11）。其中化合物1和2为新化合物，4，6，7为首次从该属植物中分离得到的已知化合物。

1 材料

Agilent 1100 Series LC-MSD-Trap-SL型质谱仪；Mercury-400，Inova 500 M以及Bruker AVIIIHD 600型核磁共振仪；高效液相色谱仪，Shimadzu LC-6AD，SPD-6A紫外检测器；YMC-Pack ODS-A制备型反相色谱柱（20 mm×250 mm，5 μm）；硅藻土，国药集团化学试剂有限公司；大孔吸附树脂，D101型，天津南开大学化工厂；聚酰胺，30～60目，常州市长丰化工有限公司；反相硅胶，Rp-C18（40～75 μm），日本Fuji Silysia公司。

南烛药材于2011年8月采自中国广西猫儿山，经中国医学科学院药物研究所马林副研究员鉴定为V. bracteatum，标本现保存于中国医学科学院药物研究所植物标本室。

2 提取与分离

干燥南烛药材30 kg，粉碎后用95%乙醇加热回流提取3次，每次3 h，提取液减压浓缩得到浸膏。浸膏加乙醇溶解，用3.7 kg硅藻土拌样，置于索氏提取器中，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和甲醇加热回流提取，浓缩提取液分别得到石油醚浸膏（368 g），二氯甲烷浸膏（162 g），乙酸乙酯浸膏（116 g）和甲醇浸膏（1 850 g）。取甲醇浸膏150 g，经大孔吸附树脂D101柱色谱，依次以水，30%，60%，95%乙醇洗脱，分别得到4个部分D1～D4。D2（70 g）经聚酰胺柱色谱，依次以水，30%，60%，95%乙醇洗脱，得到4个部分D2a，D2b（9.8 g），D2c（8.6 g），D2d。部分D2c（4.3 g）经中压反相柱色谱，以MeOH-H2O梯度洗脱，得到5个组分D2c1～D2c5；D2c3经制备型HPLC分离得到化合物1（2 mg），2（1 mg），3（6 mg），4（5 mg）。部分D2b（4.5 g）经中压反相硅胶柱色谱，以甲醇-水梯度洗脱，得到6个组分D2b1～D2b6；D2b3经制备型HPLC分离得到化合物5（15 mg）；D2b4经制备型HPLC分离得到化合物6（8 mg），7（7 mg）。D4（5 g）经中压反相硅胶柱色谱，以甲醇-水梯度洗脱，得到4个组分D4a～D4d；D4b经制备型HPLC分离得到化合物8（36 mg），9（23 mg）；D4c经制备型HPLC分离得到化合物10（15 mg），11（9 mg）。

3 结构鉴定

化合物1 白色粉末。HR-ESI-MS m/z 555.172 2[M+H]+（C25H31O14计算值：555.170 8），确定其分子式为C25H30O14，分子不饱和度为11。

化合物1的1H-NMR（DMSO，600 MHz）显示出1组对位取代苯环质子特征信号δH 7.57（2H，d，J=8.4 Hz）和δH 6.79（2H，d，J=8.4 Hz）；1组反式双键质子信号δH 7.60（1H，d，J=16.2 Hz）和6.40（1H，d，J=16.2 Hz）；1个三取代双键质子信号δH 7.36（1H，s）；δH 4.50为糖端基质子信号。13C-NMR（DMSO，150 MHz）显示1组对位取代苯环碳信号，δC 125.2，130.4，115.8，159.8；2对双键碳信号，δC 114.2和144.9，δC 152.4和107.4；2个羰基碳信号，δC 168.3，166.9；6个糖碳信号，δC 98.6，73.0，76.8，70.0，77.2，61.1；2个亚甲基碳信号，δC 44.0，72.0（连氧）；4个次甲基碳信号，δC 93.2，73.6，44.3，40.0；以及1个连氧季碳信号，δC 78.1。

化合物1的HMBC图谱信息见图1，其显示反式双键质子δH 7.60，6.40分别与苯环碳δC 125.2，130.4，以及羰基碳δC 166.9存在偶合关系，表明反式双键与苯环和羰基相连，即分子中存在反式对羟基桂皮酰基结构片段，占去6个不饱和度。除去6个糖碳信号和糖的1个不饱和度，其余10个碳应包括1个羰基，1个双键，2个环。1H-1H COSY相关图谱可以得出C（1）H-C（9）H-C（5）H-C（6）H-C（7）H2结构片段；结合HMBC图谱中，双键质子δH 7.36与羰基δC 168.3，δC 40.0（C-5），δC 93.2（C-1）之间，δH 1.70与δC 78.1（C-8）之间，δH 4.17，4.05与δC 44.3（C-6）之间存在偶合关系，从而确定分子中环烯醚萜结构片段。根据δH 4.17，4.05与δC 166.9（C-1″）之间，以及糖端基质子信号δH 4.50与δC 93.2（C-1′）之间存在远程偶合关系，确定了反式对羟基桂皮酰基和糖的连接位置。此外，化合物1的数据与文献[2]报道的已知化合物10-O-反式对羟基桂皮酰-二氢水晶兰苷数据相对照基本一致，只有C-6由次甲基代替了亚甲基，且因羟基取代明显向低场位移ΔδC 42.0。在NOE实验中，δH 4.05～4.17（H2-10）与δH 2.70（H-5）和δH 2.50（H-9）相关，显示8-OH为α取代，构型与已知化合物10-O-反式对羟基桂皮酰-二氢水晶兰苷一致；δH 4.32（H-6）与δH 2.70（H-5）和δH 2.50（H-9）相关，显示6-OH亦为α取代，由此确定了化合物1的结构为10-O-反式对羟基桂皮酰-6α-羟基-二氢水晶兰苷。化合物1的HMBC和1H-1H COSY信息见图1，1H和13C-NMR数据见表1。

化合物2 为白色粉末。HR-ESI-MS m/z 555.172 2[M+H]+（C25H31O14计算值：555.170 8），确定其分子式为C25H30O14，分子不饱和度为11，与化合物1一致。化合物2的1H和13C-NMR数据与化合物1十分相近，只有对羟基桂皮酰基的双键质子信号差异明显，J=13.2 Hz，为顺式双键质子信号的特征，因此确定化合物2的结构为10-O-顺式对羟基桂皮酰-6α-羟基-二氢水晶兰苷。此外，化合物2的数据与文献[2]报道的已知化合物10-O-顺式对羟基桂皮酰-二氢水晶兰苷数据相对照基本一致，只有C-6明显向低场位移ΔδC 43.9，并且HMBC，1H-1H COSY，NOESY相关信息均与化合物1一致，支持以上结论。化合物2的1H和13C-NMR数据见表1。

化合物3 白色粉末。1H-NMR（DMSO，600 MHz）δ：7.57（3H，m，H-3″，5″，9″），7.25（1H，s，H-3），6.78（2H，d，J=8.4 Hz，H-6″，8″），6.40（1H，d，J=16.2 Hz，H-2″），6.10（1H，m，H-6），5.67（1H，d，J=4.8 Hz，H-1），5.62（1H，d，J=5.4 Hz，H-7），4.46（1H，d，J=5.4 Hz，H-1′），4.25（1H，d，J=11.4 Hz，H-10），4.07（1H，d，J=11.4 Hz，H-10），3.36（1H，m，H-5），2.55（1H，m，H-9）；13C-NMR（DMSO，150 MHz）δ：92.1（C-1），150.3（C-3），108.9（C-4），36.7（C-5），136.1（C-6），132.7（C-7），82.0（C-8），44.4（C-9），68.4（C-10），168.0（C-11），98.1（C-1′），73.0（C-2′），76.8（C-3′），70.0（C-4′），77.3（C-5′），61.1（C-6′），166.7（C-1″），114.0（C-2″），145.3（C-3″），125.1（C-4″），130.6（C-5″，9″），115.8（C-6″，8″），160.0（C-7″）。以上数据与文献[3]对照一致，鉴定该化合物为乌饭树苷。

化合物4 白色粉末。1H-NMR（DMSO，600 MHz）δ：7.68（2H，d，J=8.4 Hz，H-5″，9″），7.25（1H，s，H-3），6.75（2H，d，J=8.4 Hz，H-6″，8″），6.87（1H，d，J=13.2 Hz，H-3″），5.88（1H，d，J=13.2 Hz，H-2″），6.10（1H，m，H-6），5.67（1H，d，J=4.8 Hz，H-1），5.58（1H，d，J=5.4 Hz，H-7），4.45（1H，d，J=5.4 Hz，H-1′），4.10（2H，m，H-10），3.36（1H，m，H-5），2.55（1H，m，H-9）；13C-NMR（DMSO，150 MHz）δ：92.1（C-1），150.3（C-3），108.9（C-4），36.7（C-5），136.1（C-6），132.5（C-7），82.0（C-8），44.4（C-9），69.0（C-10），168.0（C-11），98.1（C-1′），73.0（C-2′），76.8（C-3′），70.0（C-4′），77.3（C-5′），61.1（C-6′），165.9（C-1″），115.3（C-2″），144.0（C-3″），125.5（C-4″），132.9（C-5″，9″），115.0（C-6″，8″），159.0（C-7″）。以上数据与文献[4]对照一致，鉴定该化合物为10-O-顺式对羟基桂皮酰-水晶兰苷（10-O-cis-p-coumaroyl monotropein）。

化合物5 白色粉末。1H-NMR（DMSO，600 MHz）δ：6.79（1H，d，J=1.8 Hz，H-2），6.69（1H，d，J=7.8 Hz，H-5），6.60（1H，s，H-2′），6.48（1H，dd，J=8.4，1.8 Hz，H-6），6.08（1H，s，H-5′），4.02（1H，d，J=10.8 Hz，H-7），3.92（1H，d，J=7.8 Hz，H-1″），3.85（1H，m，H-9′），3.72（3H，s，3-OCH3），3.71（3H，s，3′-OCH3），3.66（1H，m，H-9′），3.57（1H，m，H-9），3.47（1H，m，H-9），2.72（1H，m，H-7′），1.87（1H，m，H-8′），1.70（1H，m，H-8）；13C-NMR（DMSO，150 MHz）δ：136.9（C-1），113.9（C-2），147.1（C-3），144.5（C-4），115.5（C-5），121.1（C-6），45.6（C-7），44.1（C-8），67.2（C-9），127.0（C-1′），111.8（C-2′），145.5（C-3′），144.0（C-4′），116.3（C-5′），132.6（C-6′），32.6（C-7′），37.6（C-8′），62.6（C-9′），104.5（C-1″），73.3（C-2″），76.6（C-3″），69.6（C-4″），65.7（C-5″），55.6（3-OCH3），55.5（3′-OCH3）。以上数据与文献[4]对照一致，鉴定该化合物为异落叶松脂素-9-O-β-D-木糖苷（isolariciresinol-9-O-β-D-xyloside）。

化合物6 白色粉末。HR-ESI-MS m/z 463.125 2[M+H]+。1H-NMR（DMSO，500 MHz）δ：12.92（1H，br s，5-OH），9.62（br s，4′-OH），8.43（1H，s，H-2），7.39（2H，d，J=8.0 Hz，H-2′，6′），6.87（1H，s，H-8），6.82（2H，d，J=8.0 Hz，H-3′，5′），5.08（1H，d，J=7.0 Hz，H-1″），3.76（3H，s，6-OCH3）；13C-NMR（DMSO，125 MHz）δ：154.8（C-2），122.1（C-3），180.8（C-4），152.9（C-5），132.5（C-6），156.7（C-7），94.1（C-8），152.5（C-9），106.6（C-10），121.1（C-1′），130.2（C-2′，6′），115.2（C-3′，5′），157.6（C-4′），100.2（C-1″），73.2（C-2″），77.4（C-3″），69.7（C-4″），76.8（C-5″），60.7（C-6″），60.4（6-OCH3）。以上数据与文献[5]对照一致，鉴定该化合物为鸢尾苷元-7-O-葡萄糖苷，即鸢尾苷（tectoridin）。

化合物7 黄色粉末。HR-ESI-MS m/z 565.155 6[M+H]+。1H-NMR（DMSO，500 MHz）δ：13.72（1H，br s，5-OH），7.92（2H，d，J=8.0 Hz，H-2′，6′），6.92（2H，d，J=8.0 Hz，H-3′，5′），6.74（1H，s，H-3）；13C-NMR（DMSO，125 MHz）δ：164.1（C-2），103.0（C-3），182.4（C-4），155.9（C-5），108.7（C-6），161.6（C-7），105.3（C-8），159.7（C-9），103.0（C-10），74.7（C-1′），71.9（C-2′），79.3（C-3′），70.0（C-4′），81.5（C-5′），60.9（C-6′），75.4（C-1″），71.9（C-2″），78.7（C-3″），71.0（C-4″），70.8（C-5″）。以上数据与文献[6]对照一致，鉴定该化合物为vicenin-3（apigenin-6-C-β-D-glucopyranosyl-8-C-β-D-xylopyranoside）。

化合物8 黄色粉末。1H-NMR（DMSO，400 MHz）δ：12.66（1H，s，5-OH），10.87（1H，s，7-OH），7.30（1H，d，J=2.0 Hz，H-2′），7.25（1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6′），6.86（1H，d，J=8.0 Hz，H-5′），6.39（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.20（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），5.25（1H，br s，H-1″）；13C-NMR（DMSO，100 MHz）δ：156.6（C-2），134.4（C-3），178.0（C-4），161.4（C-5），98.8（C-6），164.6（C-7），93.3（C-8），157.7（C-9），104.1（C-10），121.6（C-1′），115.9（C-2′），145.3（C-3′），148.5（C-4′），115.5（C-5′），120.9（C-6′），102.3（C-1″），70.6（C-2″），70.7（C-3″），71.3（C-4″），70.3（C-5″），17.6（C-6″）。以上数据与文献[7]对照一致，鉴定该化合物为槲皮素-3-O-鼠李糖苷（quercetin-3-O-α-L-rhamnoside）。

化合物9 黄色粉末。1H-NMR（DMSO，400 MHz）δ：12.64（1H，s，5-OH），10.88（1H，s，7-OH），7.65（1H，dd，J=8.4，2.0 Hz，H-6′），7.50（1H，d，J=2.0 Hz，H-2′），6.84（1H，d，J=8.4 Hz，H-5′），6.40（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.20（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），5.27（1H，d，J=4.8 Hz，H-1″）；13C-NMR（DMSO，100 MHz）δ：156.5（C-2），133.6（C-3），177.7（C-4），161.4（C-5），98.7（C-6），164.4（C-7），93.5（C-8），156.5（C-9），104.0（C-10），121.0（C-1′），115.2（C-2′），144.9（C-3′），148.5（C-4′），116.0（C-5′），121.8（C-6′），101.3（C-1″），70.6（C-2″），71.5（C-3″），66.0（C-4″），64.2（C-5″）。以上数据与文献[8]对照一致，鉴定该化合物为槲皮素-3-O-阿拉伯糖苷（quercetin-3-O-α-L-arabinopyranoside）。

化合物10 黄色粉末。1H-NMR（DMSO，400 MHz）δ：12.63（1H，s，5-OH），7.66（1H，dd，J=8.4，1.6 Hz，H-6′），7.51（1H，d，J=1.6 Hz，H-2′），6.82（1H，d，J=8.4 Hz，H-5′），6.39（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.20（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），5.37（1H，d，J=7.2 Hz，H-1″）；13C-NMR（DMSO，100 MHz）δ：156.5（C-2），133.4（C-3），177.9（C-4），161.4（C-5），98.8（C-6），164.6（C-7），93.5（C-8），156.6（C-9），104.0（C-10），121.0（C-1′），115.1（C-2′），144.9（C-3′），148.5（C-4′），116.0（C-5′），121.7（C-6′），102.0（C-1″），71.1（C-2″），73.1（C-3″），68.0（C-4″），75.7（C-5″），60.2（C-6″）。以上数据与文献[7]对照一致，鉴定该化合物为槲皮素-3-O-半乳糖苷（quercetin-3-O-β-D-galactopyranoside）。

化合物11 黄色粉末。1H-NMR（DMSO，400 MHz）δ：7.59（1H，dd，J=8.0，1.6 Hz，H-6′），7.52（1H，d，J=1.6 Hz，H-2′），6.83（1H，d，J=8.0 Hz，H-5′），6.39（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.19（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），5.47（1H，d，J=6.8 Hz，H-1″）；13C-NMR（DMSO，100 MHz）δ：156.7（C-2），133.4（C-3），177.7（C-4），161.4（C-5），98.8（C-6），164.4（C-7），93.5（C-8），156.6（C-9），104.3（C-10），121.6（C-1′），115.3（C-2′），145.1（C-3′），148.7（C-4′），116.3（C-5′），121.7（C-6′），101.4（C-1″），74.1（C-2″），76.1（C-3″），71.3（C-4″），75.8（C-5″），170.2（C-6″）。以上数据与文献[9]对照一致，鉴定该化合物为槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷（quercetin-3-O-β-D-glucuronide）。

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Chemical constituents from Vaccinium bracteatum

QU Jing，CHEN Xia，NIU Chang-shan，YU Shi-shan*

（Institute of Materia Medica，Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College，

State Key Laboratory of Bioactive Substance and Function of Natural Medicines，Beijing 100050，China）

[Abstract] The chemical constituents of Vaccinium bracteatum were studied by means of macroporous resin，ODS column chromatography and preparative HPLC. Eleven compounds were isolated from this plant. By using ESI-MS and NMR，the structures of the eleven compounds were determined as 10-O-trans-p-coumaroyl-6α-hydroxyl-dihydromonotropein （1），10-O-cis-p-coumaroyl -6α-hydroxyl-dihydromonotropein （2），vaccinoside （3），10-O-cis-p-coumaroyl monotropein （4），isolariciresinol-9-O-β-D-xyloside （5），tectoridin （6），vicenin-3 （7），quercetin-3-O-α-L-rhamnoside （8），quercetin-3-O-α-L-arabinopyranoside （9），quercetin-3-O-β-D-galactopyranoside （10），and quercetin-3-O-β-D-glucuronide （11），respectively. Compounds 1 and 2 are new，and compounds 4，6 and 7 are isolated from the genus Vaccinium for the first time.

[Key words] Vaccinium bracteatum； Vaccinium genus； chemical constituents

doi：10.4268/cjcmm20140426