骨髓涂片和骨髓活检在再生障碍性贫血患者诊断中的比较分析

【摘要】 目的：研究骨髓涂片和骨髓活检在再生障碍性贫血患者中的诊断意义。方法：对23例再生障碍性贫血患者的骨髓涂片和骨髓活检资料进行回顾性分析。结果：骨髓活检中的细胞增生程度显著低于骨髓涂片的有核细胞增生程度，骨髓活检对巨核系观察优于骨髓涂片（P

【关键词】 骨髓涂片； 骨髓活检； 再生障碍性贫血； 诊断

中图分类号 R556.5 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2015）22-0080-02

doi：10.14033/ki.cfmr.2015.22.043

再生障碍性贫血（aplastic anemia，AA）是由物理、化学、生物因素或不明原因引起的一种获得性骨髓造血功能衰竭症，主要表现为骨髓造血细胞增生低下、全血细胞减少，以及贫血、感染、出血，抑制细胞免疫治疗有效[1]。目前国际上常用诊断标准为Cammita标准，而国内一般使用的则是基于Cammita标准及Baciglupo超重型AA标准而制定的改良诊断标准。这些标准均是以形态学为诊断基础[2]。故笔者着眼于骨髓涂片及骨髓活检对AA疾病特点进行比较分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

病例检索2011年10月-2014年12月笔者所在医院360例血细胞减少（单系、二系或三系）患者资料，对诊断为AA患者的资料进行分析，AA的诊断标准参照张之南等[3]主编的血液病诊断及疗效标准。收集23例AA患者，其中男13例，女10例，年龄3～60岁，初诊时的临床资料：血细胞计数、网织红细胞计数以及骨髓涂片细胞学检查和骨髓活检结果。

1.2 方法

（1）骨髓涂片检查：用骨穿针于胸骨取材，骨穿针固定于骨面后，拔出针芯，接干燥注射器，取0.2 ml骨髓液涂片，行瑞氏染色后进行观察。（2）骨髓活检检查：用国产B65201骨髓活检针，取材于髂后上棘，环钻法切取骨髓组织2 cm，4%甲醛固定2 h，2%硝酸脱钙，石蜡包埋，3 μm厚切片，常规HE染色，另切取5 μm厚切片，行Gomori网状纤维染色。（3）染色体核型分析：肝素抗凝4 ml骨髓标本，有核细胞计数后按2×106/ml细胞密度接种于含20%胎牛血清的RPMI 1640培养基中，37 ℃培养24 h，加秋水仙碱作用1 h，经低渗、预固定、固定液制成细胞悬液，制片R显带染色，根据《人类细胞遗传学国际命名体制（ISCN 1995）》进行核型描述。

1.3 观察指标

比较23例AA患者骨髓涂片与骨髓活检增生程度。

1.4 统计学处理

采用SPSS 13.0软件对所得数据进行统计分析，计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。P

2 结果

2.1 一般状况

23例AA患者中，贫血4例，感染0例，出血4例，贫血+感染1例，贫血+出血8例，感染+出血1例，贫血+感染+出血3例，无贫血、感染、出血2例。染色体1例未见分裂像，另1例为45，XY，-7，余均正常。

2.2 骨髓涂片细胞学检查、骨髓活检检查

23例患者均行骨髓涂片和活检检查，结果显示23例AA患者骨髓活检的增生程度均为减低或极度减低，而骨髓涂片显示明显活跃2例，活跃6例，减低11例，极度减低4例。骨髓活检中巨核细胞数量，明显低于其在骨髓涂片中的数量。详见表1。

2.3 骨髓涂片与骨髓活检及两者联合诊断符合率

骨髓活检对AA的诊断率明显高于骨髓涂片（P

3 讨论

AA的发病机制尚未完全明了，目前趋向于认同AA是造血干细胞减少所致的造血功能衰竭性疾病；亦就细胞毒性T细胞攻击造血干细胞是AA发病主要原因已达成共识[4]。AA治疗一般首选免疫抑制治疗（IST）和异基因骨髓/造血干细胞移植（HSCT）[5]，但就IST而言，临床效果欠佳，疗效仅为70%左右；有研究发现，疾病诊断误差可能是一部分原因[6]。除常见的MDS、PNH等疾病外，自身抗体介导的IRP、意义未明的特发性血细胞减少症（IGUS）尤值得关注[7]。确诊的IRP的患者无须使用抗胸腺细胞球蛋白（ATG）治疗[8]；而IGUS尚不是一种独立疾病，可能只是其他血液病的一个过渡阶段[9]，故血细胞减少的诊断至关重要。

笔者所研究的23例AA患者的骨髓涂片检查结果中有6例增生程度为活跃、2例为明显活跃，而恰恰这8例，在骨髓活检时增生程度均为减低或极度减低。而2010年版《再生障碍性贫血诊断治疗专家共识》中诊断标准明确指出：骨髓涂片中为多部位（不同平面）骨髓增生减低或明显减低，骨髓活检中（髂骨）全切片增生减低；很显然，结合巨核细胞计数在骨髓涂片及活检中的差异，骨髓活检更能提高AA诊断准确率[10]。一般认为，对确定造血衰竭的性质，骨髓活检的诊断价值高于骨髓涂片细胞学检查[11]。尤其当临床上遇到外周血液稀释、骨髓干抽，此时，单单骨髓涂片往往难以明确诊断[12]，此时，骨髓活检的诊断价值更高。笔者在诊断时充分考虑到人体向心性造血的特点――胸骨处骨髓较髂骨处骨髓增生程度更加准确，所有患者骨髓涂片均取材于胸骨，故比较更加具备说服力。

一般认为，MDS不仅要有骨髓细胞形态学上的病态造血，更要有单克隆造血的证据（如染色体的异常），这也是与AA鉴别的重要一点，但尤其值得注意的是少部分AA患者亦存在细胞遗传学克隆异常，如+8、+6、5q-和7号、13号染色体异常。笔者亦观察到一例AA患者染色体结果为45，XY，-7。刘惠等[10]报道，这些异常克隆可能只是一过性改变，可以自行消失，但仍然宜定期（3～6个月）监测，如出现异常分裂像增多，提示疾病可能发生变化。笔者在积极治疗ATG+CSA1个月后复查染色体结果为45，XY，-7/46，XY；同时行FISH检查P53缺失，为5/300（

AA诊断务必谨慎，避免与MDS、IGUS、IRP等混淆，骨髓活检较骨髓涂片更能有助于AA的诊断在临床上，根据骨髓检查结果，再有目的地选择免疫学、细胞遗传学和分子生物学方法进行深一步的诊断，往往可以取得事半功倍的效果。

参考文献

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（收稿日期：2015-04-19） （编辑：程旭然）