NSF对慢性肾衰大鼠脂质代谢的影响

摘要：目的 观察nsf对慢性肾衰大鼠脂质代谢相关指标TG、LDL-C、HDL-C和血清M-CSF的影响。方法 采用5/6肾切除手术建立大鼠慢性肾功衰模型。检测血Urea、Crea，血脂TG、LDL-C、HDL-C的变化；免疫组化法检测脂代谢机制相关指标血清M-CSF含量。结果 NSF组与模型组比较：Urea、Crea明显降低 （ P

关键词：慢性肾衰；脂质代谢；巨噬细胞集落刺激因子

慢性肾衰竭（CRF）是各型原发或继发性肾脏疾病进展到终末期的共同表现，最终进展至终末期肾脏病（End stage renal disease，ESRD）。研究显示动脉粥样硬化（AS）性心血管疾病已成为CRF患者最常见的并发症和引起死亡的首要原因；而AS的危险因素中，又以脂代谢异常最为突出[1]。肾衰末期治疗常依靠血液透析或肾脏移植维，给患者带来沉重经济和精神负担。中药地耳草具有保肝、抗菌、增强免疫作用，临床常应用于肝炎治疗[2]，在CRF的肾功改善方面也有临床报道[3]。NSF是地耳草提取的有效成分提取物，本课题组前期研究显示NSF能延缓CRF的发展，改善肾纤维化及相关细胞因子指标。为进一步探讨NSF对CRF的防治机制，研究NSF对CRF时脂质代谢的影响，本实验通过建立5/6肾切除大鼠模型，选取脂质代谢关键效应因子TG、LDL-C和HDL-C，以及血清中脂质代谢相关炎症因子M-CSF指标进行检测；确定其对CRF脂质代谢的改善作用，并探索其可能对CRF脂质代谢及相关并发症的影响。

1资料与方法

1.1实验动物 雄性清洁级SD大鼠72只，体重（210±10）g，成都中医药大学实验动物研究中心提供。常规条件下饲养，自由饮水，普通饮食，适应性喂养7d。

1.2实验用药 NSF由成都南山药业有限公司提供，依照委托单位提供的供试品人临床拟用剂量（1.2g/人・d）为主要依据，按照体表面积换算成大鼠的等效剂量（人的体重按60kg计）。金水宝胶囊，江西济成可信金水宝制品有限公司，批号，20111203，以临床人用量（0.33g/粒，18粒/人・d））经体表面积转换成大鼠等效剂量作为本实验剂量。

1.3主要试剂与仪器 全自动生化分析仪：日立7180型；酶标仪：Thermo Mulliskan Ascant 公司；类标准胎牛血清：中美合资兰州民海生物工程有限公司 批号：20100424；双抗100X：PAA-Strasse1.4061 Pasching .Austria 批号：P01010-1446；免疫组化试剂盒：生产商：北京博奥森生物技术有限公司，批号： FP-0023。

1.4 方法

1.4.1模型制作 大鼠适应性喂养7d，称重，编号，随机分为四组，每组选取18只为假手术组，剩余54只采用5/6肾切除术制作大鼠肾衰模型。参考文献[4]分2次，间隔7d切除5/6肾组织。

1.4.2分组给药 手术操作后的大鼠随机分为三组，每组18只。分别为模型对照组、阳性对照组、NSF组。所有大鼠于2次手术后第31d开始灌胃给予相应药物：假手术组和模型对照组以0.5%CMC-Na溶液灌胃，1ml/100g.bw；阳性对照组：金水宝胶囊5.7mg/kg；NSF组：NSF120 mg/kg。连续给药30d。

1.4.3 标本收集 用完药后禁食12h，次日称重，10%水合氯醛麻醉，腹主动脉取血。留取血清做生化检测及elisa检测。

1.4.4检测指标及方法

1.4.4.1一般情况观察 动态观察造模期间大鼠存活率、进食情况、精神状态、活动度、皮毛光泽度等。

1.4.4.2血清Urea、Crea 最后1次给药后次日，10%水合氯醛麻醉，腹主动脉取血。留取血清，以全自动血生化分析仪检测Urea、Crea变化。

1.4.4.3 脂质代谢效应指标TG、LDL-C、HDL-C 最后1次给药后次日，10%水合氯醛麻醉，腹主动脉取血。留取血清，以全自动血生化分析仪检测TG、LDL-C、HDL-C变化。

1.4.4.4 脂质代谢机制指标M-CSF 最后1次给药后次日，10%水合氯醛麻醉，腹主动脉取血。留取血清，采用ELISA法检测血清M-CSF含量。

1.5统计学方法 计量资料以（x±s）表示，用SPSS17.0统计分析软件进行非参数检验和单因素方差分析。

2结果

2.1一般情况 实验期间，正常大鼠全部存活，饮食饮水正常，活动灵活，皮毛光泽。造模处理后各组大鼠均出现死亡，各组存活率分别为：模型组66.67%，阳性对照组55.56%，NSF组77.78%；造模后各组大鼠均出现不同程度进食饮水量下降，精神萎靡恶动，毛色发黄干枯，体态消瘦等，尤以模型组最为严重。治疗后，阳性对照组和NSF组均较模型组有一定程度恢复，进食、活动均有增加。

2.2血清Urea、Crea 各组大鼠Urea、Crea增高，与假手术组相比，具有显著差异（P0.05），表明NSF能降低血Urea、Crea的含量。见表1。

注："*"P

2.3 血脂TG、脂蛋白LDL-C、HDL-C 模型组与假手术组比较，TG、LDL-C和HDL-C改变均有显著差异（P

注："*"P

2.4血清M-CSF的表达 各组与假手术组比较，M-CSF含量增高，有显著性差异（P

注："*"P

3讨论

肾脏疾病若缺乏有效治疗，其终末易转为CRF，随着肾功能逐渐失代偿，最终进展至ESRD，同时易出现各种并发症并导致病情恶化和死亡。其中以动脉粥样硬化性心血管疾病的发病和死亡风险较高。如何延缓CRF的进展，防治各种并发症的发生发展，降低死亡率已成为近年研究热点。

本课题组前期实验发现，NSF对CRF模型大鼠，有改善肾脏功能、干预肾脏纤维化以及干预模型大鼠血液微炎症状态效果。近期研究[5]显示，CRF存在的微炎症状态，与AS的发生存在显著相关性。M-CSF可由激活的单核细胞、巨噬细胞等分泌产生，也可由肾小管上皮细胞分泌产生，是反映单核-巨噬细胞增殖功能的重要因子，在机体的免疫应答中起重要的作用。CRF可由于肾组织受损，M-CSF表达增高；且升高幅度与肾受损程度呈正相关。且另M-CSF可通过影响单核-巨噬细胞的趋化、增殖和分泌能力及其脂质代谢，参与动脉粥样硬化的形成。

本实验通过5/6肾切除复制大鼠CRF模型，观察NSF对模型大鼠肾功的改善，研究药物对肾衰模型的治疗作用；并选取AS化独立性危险致病因素：TG、LDL-C、HDL-C和血脂代谢调节相关炎症细胞因子M-CSF进行检测，研究药物对肾衰时脂质代谢紊乱的干预效果，探索NSF对脂质代谢调节的作用机制。实验结果显示NSF对该模型大鼠肾脏功能有改善作用；能降低该模型TG、LDL-C的表达，增加HDL-C，该结果提示NSF对5/6肾切除模型大鼠存在的脂质代谢紊乱状态有治疗作用；血清M-CSF的结果则显示NSF可降低M-CSF表达。以上结果提示NSF能够改善模型大鼠肾脏功能，调节脂质代谢；其机制可能在于通过下调M-CSF的表达，发挥其对CRF及脂质代谢障碍相关并发症的防治作用。

参考文献：

[1]吴学敏，魏.慢性肾功能衰竭并发冠状动脉粥样硬化性心脏病危险因素的研究[J]河北医药， 2008，30（11）：1788-1790.

[2]廖仰平，赖岳晓，叶建新，等.田基黄及其制剂的研究进展[J].中医药导报，2012， 18（3）： 109-111.

[3]余晓红.地耳草颗粒治疗慢性肾功能不全23例[J].华西医学， 2009， 24（10）： 2711-2711.

[4]邓聪，魏连波.肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭营养不良大鼠Leptin-下丘脑NPY、POMC轴的影响[J]. 中国中西医结合杂志， 2010， 30（13）： 952-956.

[5]邓声京.终末期肾病微炎症状态和动脉粥样硬化的关系[J]. 中国当代医药，2013（20）15：45-46.编辑/许言