适宜北美花楸茎段不同组织培养阶段的培养基研究

【摘要】组培所用的北美花楸枝条采自于辽宁林业职业技术学院校园内。 1.2 外植体的制备 取当年生健壮枝条,去叶,将枝条切成1cm左右的茎段,每个小段上带1～2个节。洗洁精水中浸泡30min后流水...

摘 要：本试验以MS作为基本培养基,添加不同种类、不同浓度的生长调节剂,寻求适宜于北美花楸茎段各组织培养阶段的培养基。研究结果表明:在初代培养阶段,其适宜的诱导培养基为MS+BA1.5+NAA1.0；继代增殖阶段,以MS+BA1.0+NAA0.5为培养基效果较好;生根阶段,最适宜的培养基为1/2MS+NAA0.1+活性炭4g/l。

关键词：北美花楸；茎段外植体；组织培养；培养基

北美花楸（Sorbusamericana）原产北美，落叶乔木。能适应各种土壤和地域，比较适合城市环境，可作为观赏树和大型绿篱。近年来随着对北美花楸苗木数量和质量需求的不断提高,通过组织培养建立北美花楸无性繁殖体系是获取高质量和高数量苗木行之有效的途径。为此,我们以北美花楸茎段为材料进行了其诱导、继代及生根组织培养阶段适宜培养基的研究,试图寻求适于北美花楸茎段不同组培的最佳培养基。

1 材料与方法

1.1 供试材料

组培所用的北美花楸枝条采自于辽宁林业职业技术学院校园内。

1.2 外植体的制备

取当年生健壮枝条,去叶,将枝条切成1cm左右的茎段,每个小段上带1～2个节。洗洁精水中浸泡30min后流水下冲洗。超净工作台上用0.1％升汞消毒10～15min，无菌水冲洗6次，无菌滤纸吸干后备用。

1.3 接种程序

将晾干的北美花楸茎段接种到初代培养基上进行诱导培养，茎长到1.5cm左右时，切下茎段上的新芽接种到继代培养基上进行继代增殖培养,再移至生根培养基上进行生根培养。将生根的无菌苗移至苗床上继续作常规的苗木培育。

1.4 培养条件

初代培养阶段要求温度保持25℃恒温，光照1600lx，光照12-14h/day。继代和生根培养阶段要求温度为22～26℃。

2 结果与分析

2.1 不同诱导培养基上北美花楸茎段的芽丛诱导率

选择MS培养基，附加BA浓度为0.5～1.5mg/l，NAA浓度为1～2mg/l，从中筛选出最佳的诱导培养基组合。各培养基组合及不同诱导培养基上北美花楸茎段的芽丛诱导率（pH值均为5.7）分别为：

H1-1MS+BA0.5+NAA1.0 42.9％；

H1-2MS+BA0.5+NAA1.537.5％；

H1-3MS+BA0.5+NAA2.050.0％；

H1-4MS+BA1.0+NAA1.071.4％；

H1-5MS+BA1.0+NAA1.562.5％；

H1-6MS+BA1.0+NAA2.050.0％；

H1-7MS+BA1.5+NAA1.087.5％；

H1-8MS+BA1.5+NAA1.557.1％；

H1-9MS+BA1.5+NAA2.037.5％。

从上述数据可以看出,以诱导率作为评价标准,MS+BA 1.5+NAA1.0培养基诱导率为87.5％，为北美花楸茎段的最适诱导培养基。

2.2 不同继代培养基上北美花楸茎段的增殖系数

在继代培养基中，基本培养基仍采用MS、BA和NAA的浓度范围分别为0.5～1.5mg/l和0.1～1.0mg/l，从中筛选出最佳的继代培养基组合。各培养基组合及不同继代培养基上北美花楸茎段的增殖系数（pH值均为5.7）分别为：

H1MS+BA1.5+NAA1.08.9；H2MS+BA1.5+NAA0.511.4；

H3MS+BA1.5+NAA0.113.9；H4MS+BA1.0+NAA1.015.7；

H5MS+BA1.0+NAA0.520.8；H6MS+BA1.0+NAA0.115.9；

H7MS+BA0.5+NAA1.09.1；H8MS+BA0.5+NAA0.517.2；

H9MS+BA0.5+NAA0.115.6。

从上述数据可以看出,MS+BA1.0+NAA0.5的培养基增殖系数为20.8，最高，为最佳继代培养基。

2.3 不同生根培养基的效果

当芽苗增殖到一定数量后,将其转移至生根培养基中培养。切开芽丛，将2cm长芽苗接种于生根培养基中，1周左右即分化出不定根，2～3周每个芽苗基部均可生长出3～6条健壮的幼根。基本培养基为1/2MS，NAA浓度范围为0.1～ 0.2mg/l，添加一定量的活性炭对比，得到生根培养基。各培养基组合及生根率分别为：H3-11/2MS+NAA0.191.3；H3-21/2MS+NAA0.1+活性炭4g/l89.7；H3-31/2MS+NAA0.290.5；H3-41/2MS+NAA0.2+活性炭4g/l 93.1。

从上述数据可以看出,北美花楸组培苗在1/2MS+ NAA 0.2+活性炭4g/l培养基中的生根率最高,达到93.1％以上。

3 结论与讨论

试验结果表明,北美花楸茎段外植体的最适宜诱导培养为MS+BA1.5+NAA1.0。增殖阶段NAA浓度为0.5mg/L、BA浓度为1.0mg/L时,比较适宜北美花楸芽的增殖,其增殖系数为20.8。在生根培养阶段,最好使用1/2MS+NAA0.2+活性炭4g/l为生根培养基,能够提高北美花楸组培苗的移栽成活率。本试验只是对北美花楸的一个品种进行研究,在某些方面和其他研究者的研究结果具有一致性,但也有一定的差异,这可能与其品种间基因型的差异和激素浓度有关,还须进一步研究。

参考文献

1 谭文澄,戴策刚.观赏植物组织培养技术[M].北京:中国林业出版社, 1991