多药耐药基因蛋白TopoⅡ在胃肠癌中的表达及其临床意义

摘要　目的：探讨TopoⅡ蛋白的表达特点及其与胃肠癌临床病理因素的关系。方法：采用免疫组化s-p法对98例胃肠癌(33例胃癌，65例结肠癌)进行TopoⅡ蛋白表达的检测。结果：TopoⅡ蛋白在胃癌、肠癌中表达的阳性率分别为48.5％(16／33)、40.0％(26／65)，两者无显著差异(P＞0.05)。TopoⅡ蛋白的的表达与淋巴结转移有关(P＜0.05)。结论：TopoⅡ蛋白在胃肠癌中的表达可能与胃肠癌的耐药有关。

关键词　胃肠癌　TopoⅡ

化疗是治疗胃肠道恶性肿瘤的重要手段之一，然而胃肠癌对化疗药物的耐药性是影响化疗效果的主要原因。多药耐药性(MDR)是许多化疗方案无效的主要原因之一是指肿瘤细胞对某一化疗药物产生耐药性后，对其他化学结构及机理不同的化疗药物也产生交叉耐药性。在1970年，Biedler和Riehm首次注意到多药耐药现象。目前认为多药耐药有关主要分子包括转运蛋白如P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MBP)、肺耐药蛋白(LRP)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)和抗原过程相关转运泵(TAP)，细胞解毒系统如谷胧甘肤转移酶(GST)和DNA修复系统，药物靶点如拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)。MDR的机制目前尚不完全明了，但研究表明其与拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)有关㈨。

本文拟用免疫组化方法检测胃肠癌组织中TopoⅡ多种耐药基因蛋白的表达，并探讨与胃肠癌临床病理因素的关系。为胃肠癌耐药谱的诊断、制定化疗方案提供依据。资料与方法

一般资料：收集一汽总医院病理科2006年1月～2007年6月住院手术治疗，病理确诊的98例胃肠癌标本为研究对象，65例为结肠癌患者，33例为胃癌患者，中位年龄55岁(38～76岁)。各例癌常规取材制片4张以上。每例淋巴结7～12个，平均10个。

试剂与方法：所有标本10％福尔马林固定，常规石蜡包埋，4p,m连续切片4张，分别作HE染色及topoⅡ免疫组化染色。免疫组化采用s-P法，TopoⅡ抗体及s-p试剂盒均为麦新公司产品。

结果观察与判定：每例至少观察10个高倍视野1000个肿瘤细胞。TopoⅡ阳性着色产物定位于细胞核，为棕色阳性颗粒，棕色颗粒≥20％即为高表达，棕色颗粒＜20％者为低表达，不着色为阴性。 统计学处理：采用X2检验。

结果

TopoⅡ蛋白在胃癌、肠癌的表达：98例胃肠癌包括33例胃癌，65例结肠癌，TopoⅡ蛋白在胃癌、肠癌中表达的阳性率分别为48.5％(16／33)、40.0％(26／65)，经统计学处理分析，两者无显著差异(P＞0.05)。

根据有无淋巴结转移，将本组病例分为两组即“有淋巴结转移组”及“无淋巴结转移组”。经统计学处理分析，在胃肠癌组织中TopoⅡ蛋白的表达与淋巴结转移有关(P＜0.05)。

讨论

TopoⅡ是在DNA复制、转录和染色体分离中起重要作用的核酶，主要存在于s期的细胞中，TopoⅡ蛋白的表达与肿瘤细胞的增殖率密切相关。Topo-Ⅱ的生理功能在DNA复制、转录、有丝分裂、染色体分离、修复中起到关键作用。与TOPO I有关的化疗药有丫陡类、表鬼臼毒素、葱环类、蕙醒类，TOPO 1U是这些药物细胞内重要的作用目标，这些药物干扰TOPOn的正常功能，从而引起永久性DNA损伤。当某些原因如等位基因的突变、重排、甲基化、TOPOn调节因子的改变以及TOPOn以外基因的改变，而引起的肿瘤细胞中TOPOI蛋白数量和催化活性的减少，这常常表现在一些耐药白血病细胞中。TOPOn的数量减少，引起药物作用靶分子减少，导致药物诱导DNA断裂减少和药物细胞毒效果的降低。许多抗肿瘤药物以Topo为靶点，选择性抑制增殖期DNA复制细胞，集中杀伤肿瘤细胞，有很好的选择性，如DNA嵌入剂柔红霉素、阿霉素，非嵌入剂喜树碱、足叶乙甙都是通过抑制拓扑异构酶的活性，干扰DNA的遗传代谢从而发挥抑制肿瘤细胞生长的药理作用。同时它又是某些化学药物的靶酶。当TopoⅡ活性降低或发生基因突变时，就表现为耐药。本研究结果显示TopoⅡ蛋白在胃肠癌中表达的阳性率分别为48.5％(16／33)、40.0％(26／65)，同时其表达与胃肠癌淋巴结转移有关，提示这些易于发生转移的胃肠癌的细胞增值率较高。