双灵固本散抗肿瘤药理作用研究

关键词 双灵固本散 抗肿瘤 药理

目前，肿瘤是人类的常见疾病之一，死亡率在许多国家逐年上升，仅次于心血管疾病，在国际大都市调查恶性肿瘤死亡率已跃居第一位。肿瘤研究的根本目的是降低肿瘤的发病率和死亡率，降低死亡率主要靠药物治疗。灵芝制剂是中药抗癌治疗的新制剂，一直是医学界引人注目的课题。

肿瘤细胞生物学及分子学的研究进展与新的肿瘤治疗途径及靶点的发现，为灵芝制剂抗肿瘤研究提供了新的思路及方法。双灵固本散由灵芝精粉、灵芝孢子粉经科学方法提取配制而成，其药理作用经实验得到进一步阐明。

1 诱导细胞分化及抗突变作用

诱导癌细胞使其自己向正常细胞分化作为一种潜在的治疗方法受到重视。灵芝有效成分(GL-B)在0.25~0.5mg／ml的浓度下可明显诱导人早幼粒细胞白血病细胞(HL-60)向粒细胞系统分化，使G1期细胞群体明显增加。GL-B在0.5mg／ml浓度下可诱导黑色素瘤(B-16)分化，使细胞中黑色素增加，细胞呈有序状排列。双灵固本散治疗急性早幼粒白血病，观察患者血象及骨髓象，治疗后白细胞逐渐升高，同时分类中、早幼粒细胞减少，而中、晚幼粒细胞比例上升，这些变化与维甲酸的诱导分化颇为相似。

对实体肿瘤主要诱导G1期细胞凋亡，阻止肿瘤细胞进行脱氧核糖核酸复制，抑制肿瘤细胞生长。

基因稳态失衡是肿瘤发生的根本原因，预防恶性肿瘤的发生及彻底治愈恶性肿瘤，抗突变起重要作用。双灵固本散具有抗突变及减少、避免细胞突变作用，同时能帮助基因稳态的恢复(免疫作用)。上海预防医学研究院对双灵固本散抗突变作用予以Ames试验，结果与本研究所的试验的结果相一致。见表1。

2 促进细胞凋亡及杀伤肿瘤细胞

双灵固本散诱导肿瘤细胞凋亡在实验中得到证实。灵芝提取物(GL-E)和灵芝多糖(GL-B)对在体外培养的肿瘤细胞无直接抑制作用，进入体内能阻滞HL-60细胞从S期进入G2及M期，24h诱发细胞凋亡最为明显，缓解后的骨髓中可见粒细胞退行性改变，核固缩、核破裂成“凋零小体”。笔者分别进行了以下研究：不同剂量的GL-E给小鼠灌胃后观察S-180细胞凋亡，不同剂量的GL-B给小鼠灌胃后观察HL-60细胞凋亡。结果见表2、表3。

表2 含GL-E血清对小鼠S-180细胞增殖和

表3 含GL-E血清对小鼠HL-60细胞增殖和

凋亡的影响

凋亡的影响

双灵固本散中灵芝多糖及三萜类提取物等有效成分通过抑制细胞增殖的相关酶――端粒酶，形成有机共价结合，破坏端粒酶活性，达到校正细胞失衡、校正端粒系统，从而达到影响细胞分裂和DNA复制，直接杀伤癌细胞的作用。同时，能抑制DNA拓扑异构酶Ⅰ(TOTO Ⅰ)，延迟G1向S期移行，直接干扰DNA合成代谢；能抑制DNA拓扑异构酶Ⅱ(TOPO Ⅱ)的DNA断裂重新连接反应，使染色体畸变和细胞死亡。

这种抗癌作用既具有机制和化学结构独特，又有作用持久、抗癌谱广、无毒副反应等特点。

本所同中科院上海药物研究所丁健等研究对灵芝主要成分灵芝精粉和灵芝孢子粉混合物在体外对小鼠白血病细胞P388和10种不同类型的人肿瘤细胞株，如人急性红白血病细胞K562、人单核白血病细胞U-937、人淋巴母细胞性白血病细胞HL-60、人胃中分化腺癌细胞SGC-7901、人胃高分化腺癌细胞MKN-28、人结肠低分化腺癌细胞HCT-116、人肝细胞癌细胞BEI-7402、人肺腺癌细胞SPC-A4、人非小细胞肺癌细胞A-549、人卵巢浆液腺癌细胞HO-8910等进行实验研究，证实双灵固本散对TOPO Ⅰ和TOTO Ⅱ的抑制是抑制肿瘤细胞生长的作用机制之一。

3 体会

在双灵固本散二期临床试验中，笔者注意观察了部分患实体肿瘤、失去综合治疗机会的晚期患者，单纯服用双灵固本散，连续服用一段时间观察，大部分患者症状缓解，病痛减轻；部分患者能控制瘤体不增大；部分患者有一定程度的瘤体缩小，并且维持较长的时间；极少数患者出现瘤体消失，大多数延后复发。目前在恶性肿瘤病因及机制未完全清楚时，应加强对双灵固本散抗肿瘤药理作用的深入研究。

收稿日期 2007-01-05