HS―SPME―GC/MS法分析阴香叶中挥发性成分

【摘 要】目的：分析阴香叶中挥发性成分。方法：采用顶空固相微萃取和气质联用技术（HS-SPME-GC/MS），结合保留指数法并用峰面积归一化法测定相对百分含量。结果：阴香叶中鉴定出9个挥发性成分，占总峰面积的89.87%。结论：叶中主要成分为β-水芹烯 （22.13%）、石竹烯 （18.67%）、γ-榄香烯 （15.09%）及D-柠檬烯 （12.39%）等。

【关键词】阴香 挥发性成分 固相微萃取 气质联用

【Abstract】OBJECTIVE： To assay the volatile constituents of C. burmannii. METHODS： The volatiles were analyzed by head-space solid micro-extraction， coupled with GC/MS and Kovats. RESULTS： There were 9 different kinds of volatile constituents in leaves of C. burmannii， 89.87% of the total essential constituents. CONCLUSIONS： The major volatile constituents of C. burmannii leaves were β-phellandrene （22.13%）， caryophyllene （18.67%）， γ-elemene （15.09%）， D-limonene （12.39%） and so on.

【Key words】C. burmannii； volatile constituents； SPME； GC/MS1

阴香Cinnamomum burmannii （Nees et T. Nees） Blume为樟科樟属植物，主要分布于海南、广东、福建及云南等省[1]。阴香属于多用途经济林木，其树皮、叶和果实提取物是制造香精、肥皂等的原料[2]；果实中含有大量花色苷、原花青素等黄酮类成分[3-4]，具有较强的清除自由基能力[5]；叶提取物对多种植物病原菌具有抑制作用[6]，具有抗氧化活性[7]。

目前，国内关于阴香叶挥发性成分的研究多采用GC技术或GC/MS技术[8-9]，本文采用HS-SPME-GC-MS方法快速分析阴香叶挥发性成分， 无需有机试剂、灵敏度高，以期为其化学成分和药理活性的深入研究提供依据。

1 材料

1.1 仪器

GC 6890 N GC / 5975 MS 气相色谱-质谱联用仪（美国安捷伦公司）；手动固相微萃取（SPME）装置（美国Supelco公司）；萃取头为100 μm 聚二甲基硅氧烷 （PDMS-DVB，美国Supelco公司）。

1.2 试剂

C6-C26正构烷烃（美国Alfa Aesar公司）。

1.3 药材

阴香叶于2015年2月采集于海南省万宁市，经河南大学中药研究所李昌勤教授鉴定为阴香（Cinnamomum burmannii）的叶，标本存于河南大学天然药物研究所。

2 方法与结果

2.1 顶空固相微萃取

使用前先将SPME 的萃取纤维头在气相色谱的进样口老化10 min，老化温度为250℃，载气体积流量为1.0ml/min。取阴香叶0.7 g，置于5ml进样瓶中，插入100μm PDMS-DVB萃取纤维头，于50℃下顶空取样30min后，取出后立即插入色谱仪进样口（温度250 ℃）脱附1min。

2.2 GC/MS 分析条件

气相色谱条件HP-5MS石英弹性毛细管柱（0.10mm×30.0m×250mm），载气为高纯氦气（99.999%），流速1.0 ml/min，进样口温度250℃；色谱柱初始温度50℃（保持2.0min），以4℃/min升温至120℃（保持2 min），最后以6℃/min升温至230℃（保持10min）。分流进样，分离比为10：1。

质谱条件：电离方式：EI源，电离能量80eV；离子源温度为230℃；四极杆温度150℃；传输线温度为280℃；电子倍增器电压1588V。质量扫描范围m/z30-400，谱图检索：采用RTLPEST3.L和NIST08. L 进行检索。

2.3 保留指数测定

按照文献[10-11]，测定各组分的保留时间计算出各组分的Kovats保留指数。

2.4 结果

用HS-SPME-GC-MS技术，从阴香叶中鉴定出9个挥发性成分，占总峰面积的89.87%。具体结果见表1。

3 结语

从表1可以看出，阴香叶中主要挥发性成分是β-水芹烯 （22.13%）、石竹烯（18.67%）、γ-榄香烯（15.09%）及D-柠檬烯（12.39%），与已报道研究[12]相比，生长于海南万宁地区的阴香叶中主要挥发性成分α-水芹烯、β-水芹烯、石竹烯及D-柠檬烯，含量明显高于深圳产阴香。

阴香叶中β-水芹烯含量较高，达到22.13%。文献研究发现，β-水芹烯对麦蛾、玉米象成虫、赤拟谷盗成虫等储粮害虫具有一定的毒杀作用[13]，其可能为阴香叶抑菌作用的主要活性成分。本文采用HS-SPME-GC/MS分析阴香叶中挥发性成分，样品用量少，集采样、萃取、浓缩、进样于一体，具有分析速度快、灵敏度高等优点，是一种分析植物挥发性成分简单可行的方法。

参考文献：

[1]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M].北京：科学出版社，1982，31：202.

[2]程必强，许勇，曾凤仙，等.狭叶阴香的引种及其精油化学成分的研究[J].云南植物研究，1992，14（1）：105.

[3]郑洁旋，林烁慧，陈泽意，等.阴香叶黄酮类化合物提取工艺的研究[J].保鲜与加工，2016，16（2）：48.

[4]张镜，朱明睿，刁树平.阴香果实主要生物活性成分的提取工艺[J].食品科学，2013，34（4）：65.

[5]张镜，廖福林，陈梓云，等.阴香果实花色苷的体外抗氧化活性[J].食品科学，2011，32（17）：128.

[6]骆焱平，郑服丛，谢江.阴香叶提取物的抑菌活性初步研究[J].现代农药，2005，4（2）：31.

[7]邓超澄，霍丽妮，李培源，等.广西阴香叶挥发油化学成分及其抗氧化研究[J].中国实验方剂学杂志，2010，16（17）：105.

[8]刘艳清，汪洪武，鲁湘鄂.阴香茎与叶挥发油化学成分的气相色谱-质谱联用分析比较[J]. 时珍国医国药，2007，18（10）：2383.

[9]刘发光，，王羽梅.粤北阴香不同器官中精油成分研究[J].生物学杂志，2007，24（5）： 25.

[10]李锟，卢引，顾雪竹，等.细叶石仙桃地上部分挥发性成分的HS-SPME-GC-MS分析[J].中国药房，2012，23（35）：3319.

[11]Juan Juan Zhang， Wen Yi Kang. Volatiles from Flowers of Lagerstroemia caudate by HS-SPME-GC-MS[J]. Chem Nat Comp， 2014，500（5）：806.

[12]衣晓明，谷茂，陈飞鹏.阴香叶挥发性物质的GC/MS分析[J].深圳职业技术学院学报，2009，8（3）：53.

[13]熊件妹，曹华国，任宇红，等.人工合成β-水芹烯对几种储粮害虫的毒力测定[J].江西农业大学学报，2000，22（3）：351.