酒石酸长春瑞滨及其脂质体中药物的降解动力学研究

[摘要] 目的:考察长春瑞滨及其脂质体的稳定性与降解动力学。方法:考察光和热对长春瑞滨溶液及其脂质体中药物稳定性及降解动力学的影响,并拟合模型。结果:长春瑞滨溶液及其脂质体光降解均符合零级动力学;40℃热降解过程溶液组符合一级动力学,脂质体组符合零级动力学;60℃溶液组和脂质体组均符合一级动力学。结论:脂质体可显著提高长春瑞滨的光和热的稳定性。

[关键词] 药剂学;脂质体;酒石酸长春瑞滨;降解动力学;稳定性

[中图分类号] R94[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2009)08(b)-023-03

The research on degradation kinetics of NVB solution and its liposome

ZHANG Weiming, DENG Yingjie, GU Jijin, DONG Xiaodong, ZHOU Yan

(School of Pharmacy, Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016, China)

[Abstract] Objective: To research the stability and degradation kinetics of NVB solution and its liposome. Methods: The light and thermal stabilities of NVB solution and its liposome were studied and the degradation kinetics was also investigated, the model was fit. Results: Both the light degradation kinetics of NVB solution and its liposome fit the zero-order kinetics; the thermal degradation of solution group at 40℃ fit the first-order kinetics, and the liposome group fit the zero-order kinetics; both the solution and liposome group at 60℃ fit the first-order kinetics. Conclusion: The liposome can significantly improve the light and thermal stabilities of NVB.

[Key words] Pharmaceutics; Liposome; NVB; Degradation kinetics; Stability

酒石酸长春瑞滨(Vinorelbine Bitartrate,NVB)属于长春碱类抑制细胞分裂的抗肿瘤药物,临床上主要与其他抗癌药物联合应用于治疗非小细胞肺癌[1],也用于晚期乳腺癌[2]、食管癌等。FDA于1994年批准NVB用于晚期非小细胞肺癌患者的一线治疗。

NVB是细胞毒类抗肿瘤药物,它导致骨髓损耗、恶心,也会引起脱发、腹泻、呕吐、便秘、手脚麻痹、头痛等,其他毒副作用包括骨髓抑制、局部静脉炎、神经毒性、血液毒性、局部皮肤坏死[3]。因此,笔者制备了NVB脂质体,以期降低其毒副作用[4]。由于NVB稳定性较差,对光、热均不稳定,本文考察了脂质体对NVB的稳定性和降解动力学的影响。

1 仪器与试药

1.1 仪器

集热式恒温磁力搅拌器(浙江乐成电器厂);LIPEX挤出仪(Northern);HPLC色谱仪(日立);TGL-16G型离心机(上海安亭科学仪器厂);粒度分析仪;440SX zeta电位测定仪。

1.2 药品

Sephadex G-50(Pharmacia进口分装);NVB脂质体(自制);NVB(杭州民生制药厂,批号20040506,纯度>99%);磷脂(Degussa,批号050511);胆固醇(天津市博迪化工有限公司,批号950517);色谱纯乙腈(天津康科德科技有限公司);其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 脂质体的制备

2.1.1 空白脂质体按处方称取磷脂胆固醇等辅料,以乙醇注入法制备空白脂质体,过挤出仪得到的脂质体强度径为(241.0±112.8) nm ,体积径为(293.4±173.3) nm。

2.1.2 NVB脂质体空白脂质体加入NVB储备液,在50℃下孵育1 h,即得包封率为89.4%的脂质体。

2.2 NVB含量测定

2.2.1 色谱条件色谱柱:Diamonsil ODS柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:以0.05 mol/L磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾6.8 g,加水约800 ml,溶解后,加三乙胺10 ml,用磷酸调节pH至4.0,再加水至1 000 ml)-乙腈(60∶40)为流动相;流速:1 ml/min;检测波长:268 nm;柱温25℃;进样量20 μl[5]。NVB溶液与NVB脂质体样品的色谱图分别见图1、2,保留时间约为5.6 min。

2.2.2 稳定性试验

2.2.2.1 稳定性试验样品取NVB原料药,用生理盐水溶解,制成浓度约为0.5 mg/ml的溶液,分装于10 ml的西林瓶中,每瓶分装5 ml。制备好的脂质体样品同样分装于西林瓶中。

2.2.2.2 加速试验取NVB溶液与脂质体样品,置于60℃与40℃的烘箱中,在0、1、5、10 d取样,用甲醇溶液破坏,按“2.2.1”项下方法测定药物含量,结果见表1、2,图3、4。

表1 NVB溶液与脂质体在60℃的热稳定性数据

Tab.1 The heat stability data of NVB and NVB liposome at 60℃

表2 NVB溶液与脂质体在40℃的热稳定性数据

Tab.2 The heat stability data of NVB and NVB liposome at 40℃

图3 NVB脂质体与溶液的60℃热稳定性拟合图谱

(左图为溶液组;右图为脂质体组)

Fig.3 The figure of thermal degradation kinetics of NVB and NVB liposome at 60℃

(the left figure was solution group; the right figure was liposome group)

表1中数据分别按一级、零级、Higuchi拟合[6],结果表明,在60℃下,NVB和NVB-L的光降解均符合一级过程(图3),降解动力学方程分别为:lgC=-0.027 9t+1.970 9(r=0.962 6);lgC=-0.019 6t+1.999 1(r=0.996 7),降解速率常数分别为0.027 9%/d和0.019 6%/d。

表2中数据分别按一级、零级、Higuchi拟合,结果表明,在40℃下,NVB的光降解符合一级过程,NVB-L的光降解均符合Higuchi过程(图4),降解动力学方程分别为:lgC=-0.008 8t+1.992 4(r=0.958 8),C=-0.310 2t1/2+31.097 0(r=0.991 6),降解速率常数分别为0.008 8%/d和0.310 2%/d。

2.2.2.3 光照试验取NVB溶液与脂质体样品,置于人工光照箱(5 000±500) Lx,分别于0、1、5、10 d取样,按“2.2.1”项下方法测定药物含量,结果见表3和图5。

表3 NVB溶液与脂质体光稳定性数据

Tab. 3 The light stability data of NVB solution and NVB liposome

图5 NVB溶液与脂质体光稳定性拟合图谱

(左图为脂质体组;右图为溶液组)

Fig. 5The figure of light degradation kinetics of NVB and NVB liposome

(the left figure was liposome group; the right figure was solution group)

结果表明,在光照条件下,NVB溶液组和脂质体组的光降解均符合零级动力学过程(图5),降解动力学方程为:C= -2.029t+100.02(r=0.998 0),C=-0.559 7t+99.989(r=0.996 4),降解速率常数分别为2.029 0%/d和0.559 7%/d。

3 讨论

已报道的NVB脂质体的辅料主要是磷脂酰丝氨酸和胆固醇[7]、神经鞘磷脂和胆固醇[8]、心磷脂等,成本较高,本文主要以天然磷脂与胆固醇制备了脂质体,考察了脂质体与溶液的光、热稳定性,其相关研究未见国内外文献报道。

由数据可知,NVB和NVB-L的光降解均符合零级动力学过程,但NVB溶液在光照条件下降解非常严重,10 d降解50.4%;而NVB-L可显著降低药物的光降解,10 d降解35.9%。原因可能是脂质体包裹药物后,减弱了光照射的强度,从而降低药物的降解浓度。

NVB和NVB-L在60℃时均符合一级动力学,但脂质体组相对溶液组来说降解稍小,原因可能是初期脂质体包裹药物在一定程度上减小了药物的降解,后期脂质体被破坏后降解相对加快。NVB和NVB-L在40℃时分别符合一级动力学和Higuchi过程,可见脂质体使得药物降解减慢。

笔者制备了NVB-L,考察了溶液组与脂质体组相比的光、热稳定性,从动力学角度上说明了脂质体使NVB稳定性提高。

综上所述,本研究结果表明,脂质体具有显著提高NVB的光和热稳定性的作用。

[参考文献]

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[4]Zhang HY, Tang X, Li HY, et al. A lipid microsphere vehicle for vinorelbine: stability, safety and pharmacokinetics [J]. International Journal of Pharmaceutics,2008,348(1):70-79.

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(收稿日期:2009-02-18)