毛细管气相色谱法测定食用油中反式脂肪酸

摘 要：选用氢氧化钾-甲醇法甲酯化，以SP-2560毛细管色谱柱用气相色谱法测定反式脂肪酸。结果表明，采用合适的分析条件，可以很好地将反式油酸和反式亚油酸跟其它的脂肪酸分开；反式油酸和反式亚油酸在市售的食用一级油中普遍存在。

关键词：毛细管气相色谱法 食用油 反式脂肪酸

Determination of trans fatty acids in edible oil by capillary gas hromatography

Cai Chun-ming

（Zhangjiagang institute of supervision and inspection on product quality;Suzhou 215600;China）

Abstract:After converted to methyl esters with KOH-CH3OH, trans fatty acids in edible oil were separated and analyzed by capillary gas (SP-2560) chromatography. The results showed that trans-oleic acid and trans-linoleic acid could be well separated from other fatty acids under optimal conditions. Trans-oleic acid and trans-linoleic acid were generally existed in the first level edible oil in the market.

Key words:gas chromatography edible oil trans fatty acids

许多研究表明，食品反式脂肪酸（trans fatty acids，简称TFAs）会加速动脉硬化，导致心血管疾病和老年痴呆，已成为近年来关注的焦点。由于反式脂肪酸对健康的危害大，丹麦从2003年6月1日起，丹麦市场上任何含反式脂肪酸超过2％的油脂都被禁售。到2004年，这个规定拓展到含反式脂肪酸的加工食品。美国自2004年1月起，已强制要求所有包装食品业者，必须在包装上标注反式脂肪酸含量，要求反式脂肪酸含量不得超过2%。加拿大政府也要求在预包装的食品标签上标明反式脂肪酸含量，并鼓励使用健康替代品替代高反式脂肪酸含量的动物油和植物油。美国FDA（即美国食品与药物管理局）规定自2006年1月1日起，食品营养标签中必须标注产品的饱和脂肪酸含量及反式脂肪酸的含量。加拿大2003年1月，加拿大采用了新的强制性的食品标签系统，要求列出反式脂肪酸成分。我国食用油是否含有反式脂肪酸，含有多少反式脂肪酸，这都需要我们检验部门去检测，统计。

一、材料与方法

1.仪器

Agilent 6890N气相色谱仪，7683B Series自动进样器，安捷伦化学工作站。

2.试剂和样品

脂肪酸甲酯标准品：Supelcotm37 Component FAME Mix,100mg Neat，其中脂肪酸甲酯有C4:0，C6:0，C8:0，C10:0，C11:0，C12:0，C13:0，C14:0，C14:1，C15:0，C16:0，C16:1，C17:0，C17:1，C18:0，C18:1n9t，C18:1n9c，C18:2n6t，C18:2n6c，C20:0，C18:3n6，C20:1，C18:3n3，C21:0，C20:2，C220，C20:3n6，C22:1n9，C20:3n3，C20:4n6，C23:0，C22:2，C24:0，C20:5n3，C24:1，C22:6n3。样品选用市售的食用油。

3.方法

3.1样品前处理[1]

以15ml附盖试管取样品油0.12~0.15g(4~5滴)，加入3 ml 0.5N氢氧化钾-甲醇溶液，封盖.放在65℃水槽中反应约15分钟，每5分钟振荡一次，至底部无油滴。取出，放冷后,再加入3ml正己烷（HPLC级）及3ml蒸馏水，静置分层后, 取上层液以进样。

3.2色谱检测条件[2]

选用SPTM-2560毛细管石英柱（100m×0.25mm×0.20um film thickness），FID测器，载气为高纯氮气，INJ 260℃，FID 260℃，Air 400mL/min，H2 400mL/min，分流比100:1，柱温：初始温度140℃，保持5min，以4℃/min升温至212℃，保持10min，以4℃/min升温至240℃，保持15min。

3.3 标准品进样分析

吸取1uL标准品进样，所得标样图如图1。

图1 脂肪酸标准样品图

Figure 1 Standard sample of fatty acids

各脂肪酸甲酯分离完全，其中反式脂肪酸C18:1n9t及C18:2n6t与其它的脂肪酸可以很清楚地分开。

3.4食用油样品进样分析

吸取5uL按1.3.1方法样品处理后的处理液进样分析，以下是部分食用油的反式脂肪酸分析图：

图2 一级菜籽油反式酸分析图

Figure 2 The trans fatty acids of first level rapeseed oil

图中峰4为C18:1反式酸，与C18:1顺式酸分离完全；峰7、8为C18:2反式酸，与C18:2顺式酸分离完全。

图3 一级大豆油反式酸分析图

Figure 3 The trans fatty acids of first level soybean oil

图中峰9为C18:2反式酸，与C18:2顺式酸分离完全。

图4 一级葵花籽油反式酸分析图

Figure 4 The trans fatty acids of first level sunflowerseed oil

图中峰8为C18:2反式酸，与C18:2顺式酸分离完全。

3.5定量分析[3]

3.5.1组成的测定：

使用内部归一法，即假定试样的所有组分都显示在色谱图上，因此各峰面积的总和即代表100%的组成（完全洗脱）。

3.5.2计算方法：

通过测定相应峰面积对所有峰面积总和的百分数计算给定组分i的含量，用甲酯的质量百分比表示，见公式（1）：

Ai×100

∑A …………………………………………（1）

式中：Ai――组分i的峰面积

∑A――各峰面积的总和

二、结果

1.顺、反式脂肪酸的分离情况

由图一脂肪酸标准样品图可见，除了脂肪酸甲酯C20:4n6与C23:0、C24:0与C20:5n3之间分离不理想外，所有的饱和脂肪酸之、饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸之间、不饱和脂肪酸中的顺式与反式之间都分离得很好，完全满足检测要求。食用油样品分析图中C18:1t，C18:2t与其它脂肪酸之间也分离得很好。

2.检测实例

以下是一组分析测得的市面上购买的食用油中反式脂肪酸含量数据（表1）：

表1 市售食用油中反式脂肪酸含量

Table1 The content of trans fatty acids in edible oil in the market

三、结论

选用氢氧化钾-甲醇法甲酯化，以SP-2560毛细管色谱柱用气相色谱法测定反式脂肪酸。结果表明，采用合适的分析条件，可以很好地将反式油酸和反式亚油酸跟其它的脂肪酸分开；反式油酸和反式亚油酸在市售的食用一级油中普遍存在，但都没有超过2.0%，达到国际一些国家要求食用油中反式酸含量不超过2%的要求。

参考文献：

[1]GB/T 17376-2008 动植物油脂 脂肪酸甲酯制备.

[2]AOCS Official Method Ce 1f-96 《Determination of cis- and trans- Fatty Acids in Hydrogenated and Refined Oils and Fats by Capillary GLC》.

[3]GB/T 17377-2008 动植物油脂 脂肪酸甲酯的气相色谱分析.