离子导入对降钙素经皮促渗作用的研究

摘要：为了提高大分子生物药经皮给药的治疗浓度，以多肽类生物药鲑降钙素为模型药物，研究离子导入法和化学促渗剂对鲑降钙素经皮渗透的影响。利用水平双室扩散池的方法, 考察了离子导入法、化学促渗剂氮酮以及离子导入-氮酮并用对鲑降钙素经皮渗透的促渗作用。

Abstract: To improve biological macromolecules transdermal therapeutic drug concentration, peptide drug salmon calcitonin is taken as a model of biological drugs, the impact of iontophoresis and chemical penetration enhancers on percutaneous penetration of salmon calcitonin is studied. Dual-chamber diffusion cells methods are adopted to investigate transdermal penetration effect of iontophoresis, Azone chemical penetration enhancers and iontophoresis - Azone and use of salmon calcitonin.

关键词：离子导入；氮酮；鲑降钙素；经皮渗透

Key words: Iontophoresis；Azone；salmon calcitonin；transdermal

中图分类号：R94文献标识码：A文章编号：1006-4311（2011）03-0290-01

0引言

离子导入作为促进药物经皮吸收的物理方法，近年来已较多地应用在多肽等大分子药物给药方法的研究上，主要包括胰岛素、血管加压素、促甲状腺释放激素、人生长激素、干扰素和寡核酸等[1]。化学促渗剂是指能够增加药物透皮速度或药物透皮量的物质。在经皮给药过程中，皮肤中角质层是类脂屏障，小分子亲脂性药物易于通过，而肽类蛋白质大分子药物不易通过。

1仪器与方法

1.1 仪器高效液相色谱仪（美国Waters公司）；紫外检测器（UVD340U）；恒温磁力搅拌器（江苏金坛市大地自动化仪器厂）；水平扩散池（委托加工；扩散面积1.42cm2，接收池容积7ml）；离子导入仪（自制；电流0-20mA可调）。

1.2 试药注射用鲑降钙素 （20μg（100U），青岛国大生物制药股份有限公司）；水溶性氮酮（南京锋云化工有限公司）；已腈（色谱纯， Product of Tedia.united states of America）；其他试剂均为分析纯。

1.3 皮肤的处理取大鼠，剪去腹部皮肤毛，剪取皮肤，用镊子小心剥离皮下组织及脂肪，在生理盐水中浸洗30min后用滤纸吸干后使用或冷冻备用，实验前自然解冻[2]。

1.4 实验方法

1.4.1 HPLC测定鲑降钙素。色谱条件[3]色谱柱：C18反相色谱柱（ 250mm×4.6mm，10um） ，柱温40℃；流动相：lmol/L四甲基氢氧化铵-水-乙腈（4：364：150），用适量磷酸调pH值至3.0；流速：1.0ml/min； 检测波长：210nm；进样量：20μL。配制系列浓度的降钙素标准液，分别进样，各进3针。以平均峰面积对浓度作图，得鲑降钙素的标准曲线为Y=3.2328X-0.0341r=0.9995（n=4），在0.5-10U/ml线性关系良好。

1.4.2 透皮实验将处理好的大鼠皮肤置于水平扩散池间，角质层面向供应室，真皮层面向接受室。把已经组装好了的水平扩散扩池放至恒温磁力搅拌器上，供给室加入浓度为10.0u/ml的鲑降钙素溶液，溶液接受池加入pH值为5.0的磷酸盐缓冲溶液，两室温度为37（±0.5）℃，均速搅拌。

离子导入仪电极分别放入供给室和接收室内，供给室电极接正极，接受室接负极，正负极等距于皮肤两侧，控制通过皮肤的电流强度为0.5mA/cm2。每三十分钟取样2ml，并补充等量的5.0的磷酸盐缓冲溶液。离子导入6小时。所得样品过滤后进高效液相色谱柱，各进3针，以平均峰面积求算浓度，并计算各时间点的累积透过量及渗透速率。并对离子导入对鲑降钙素经皮渗透作用与被动扩散进行比较。

在供给室降钙素液中加入2％氮酮，考察单独使用化学促渗剂氮酮对鲑降钙素的经皮渗透速率的影响。按上述方法，接入离子导入6小时。考察氮酮与离子导用对鲑降钙素的经皮渗透速率的影响。

2结果

不同方法对鲑降钙素透过速率透过量的影响

表1 是不同方法对鲑降钙素的经皮透过速率。采用氮酮-离子导入并用、离子导入、氮酮对降钙素经皮促渗时，降钙素的渗透速率分别达到30.61±0.42×10－1u/cm2・h、22.42±0.39×10－1u/cm2・h、4.12±0.21 ×10－1u/cm2・h。分别是其被动扩散的11.9倍、8.7倍、1.6倍。氮酮-离子导入并用技术的促渗作用，显著高于单独使用离子导入、氮酮的促渗作用。

3讨论

在经皮给药过程中，药物分子主要以附属器（毛囊和汗腺）途径、细胞间途径和直接透细胞途径通过皮肤进入机体。离子导入时，皮肤中原有通道（皮肤附属器）开放，从而使离子型药物在电场力的作用下通过电泳运动而透过皮肤[4]。而氮酮对很多药物均有透皮促进作用，它可能是使角质层中类脂质产生不规则的排列和溶解皮肤的类脂来增加药物的吸收。有报道氮酮促进肽类药物透皮吸收的机理主要是改变细胞膜脂质双层的排列，形成汤匙状结构[5]。

化学促渗剂氮酮与离子导并用促渗过程中，氮酮使皮肤产生可渗透性的结构，突破了角质层对鲑降钙素的屏障作用。同时在离子导入电场力的作用下可有效的推动药物的被动扩散、改善药物分子在皮肤中的滞留情况，从而提高药物的经皮渗透量。

参考文献：

[1]Henry s，McAllister D，Allen M，et al.Microfabricated microneedles: a novel approach to transdermal delivery[J]. J Pharm Sci，1998，87:922.

[2]hatia KS ， Singh J . Effect of linolenic acidPethanol orlimonenePethanol and iontophoresis on the in vivopercutaneous absorption of LHRH and ultrastructure of humanepidermis[J].Int J Pharm，1999，180（2）:235-250.

[3]吴伟明，陈丽佳，诸乐凯.高效液相色谱法测定鲑鱼降钙素鼻喷剂的含量[J].中国药业，2006（15）18：24-25.

[4]潘妍，赵会英，郑俊民.电致孔和离子导入对胰岛素经皮渗透的促进作用[J].药学学报，2002，37（8） :649-652.

[5]陆一，徐明.不同剂型吡喹酮透皮给药的实验观察[J].中国血吸虫病防治，1998，10（4）：202.